Neuronális és extraneuronális aminerg receptorok jellemzése gerinctelenekben = Characterization of neuronal and extraneuronal aminergic receptors in invertebrates

Radioaktív ligandok kötődésével vizsgáltuk az acetilkolin, szerotonin és dopamin receptorokat Lymnaea CNS-ben. A kolinerg ligandok kötődése nikotin és muskarin receptorok jelenlétét igazolták a CNS-ben. Nem kötődtek specifikusan és nagy affinitással az 5HT receptorok ligandjai és mérsékelt affinitású a dopamin receptor ligand kötődese. Az 3H-LSD az egyetlen ligand mely nagy affinitással kötődött mind a szerotonin, mind a dopamin receptorhoz. A kolinerg receptorok az evolúció során konzerválódtak, míg a szerotonin és dopamin receptorok gerincesekre jellemző típusai nem találhatók meg a puhatestűek idegrendszerében. A szárazföldi csigák a száraz meleg periódusokat inaktív "nyári álom" állapotban élik át. Ekkor metabolitikus aktivitásuk az aktív periódusra jellemzőnek csak a 20-30 %-a. Kísérleteinkben vizsgáltuk, hogy hogyan szabályozza a szerotonin és a dopamin az aktivációs/inaktivációs folyamatokat. Helix pomatia-ban. HPLC-s vizsgálatokkal kimutattuk, hogy az aktiváció során az idegrendszerben a MA szintje csökken, míg a szív és a talpizomban nő és szerotonin túlsúly alakul ki. A meg növekedett szerotonin szint az adenil cikláz stimulációja révén növelte a szövetek cAMP koncentrációját. A cAMP szint növekedése a protein kinazA aktivitásának serkentését eredményezte. A protein kinazA foszforilációval növelte egy 600 és egy 50 kDa molekulatömegű fehérje mennyiségét a szövetekben, melyek jelentős szereppel bírnak az izom kontrakciójának/relaxációjának szabályozásában. | We characterized acetylcholine, serotonin and dopamine receptors in the Lymnaea brain, using 3H-ligand binding methods. The ligands of cholinergic receptors bound with high affinity to the Lymnaea CNS and pharmacological properties of the binding suggest the presence of both nicotinic and muscarinic receptor types. No specific, high affinity binding of 5HT receptor ligands were found. The selective dopamine D1 and D2 receptors bound to the Lymnaea CNS with moderate affinity. The 3H-LSD was the single ligand displaying a high affinity binding to both serotonin and dopamine receptors. Terrestial snails are aestivated for several weeks, when the surrunding humidity becomes low. During this dormant state the overall metabolic rate depressed to a level of only 20-30 % of that of active snails. Our aim was to study how 5HT and DA are involved in the regulation of activatio/inactivation process in Helix pomatia. HPLC assay show that in Helix heart and foot there is a 5HT dominance and this dominance became more significant in active animals. The increased level and dominance of 5HT resulted in a increase of the concentration of cAMP by stimulating the adenylate cyclase. The high cAMP concentration stimulated the cAMP dependent protein kinaseA activity resulting in the phosphorylation a high (600 kDa) and a low (50 kDa) molecular weight protein involved in the regulation of the relaxation/contraction of the muscle

Neuromoduláció sejtszintű mechanizmusainak vizsgálata ideg-izom és ideg-mirigy kapcsolatokban. = Cellular mechanisms of the neuromodulation in neuromuscular and neuroglandular junctions.

Az éticsiga nyálmirigy jó modell az ideg-izom, ideg-mirigy szinapszis és a szekréció molekuláris mechanizmusának a tanulmányozásában. A mirigyben négyféle sejttípust azonosítottunk és megállapítottuk, hogy azok száma, eloszlása az aktív és inaktív állatokban eltérő és az ingerületáttevődés nem-szinaptikus úton valósul meg. A varikozitásokban lévő vezikulákból dopamin, szerotonin és neuropeptidek szabadulnak fel. A mirigysejtek közötti gap-junction ill. deszmoszóma kapcsolatok biztosítják a szerv szinkron működését. Leírtuk a mirigysejtek passzív és aktív elektromos tulajdonságait, és a feszültségfüggő ion-konduktanciákat. Jellemeztük a transzmitter receptorokat, amelyek heteromér formában vannak jelen, ily módon egymás hatását antagonizálják. Eredményeink ujabb adatokkal szolgálnak a puhatestüek 5HT receptorainak osztályozásához. A transzmitterhatást számos neuropeptid modulálja, amely csak a puhatestüekben fordul elő, de a PACAP is, melynek jelenlétét és szerepét puhatestűekben kimutattuk. Egy endogén neuropeptid szignalizációs útvonalát vizsgáltuk és megállapítottuk, hogy G-protein kapcsolt és amelyben mindkét disszociált alegység részt vesz és a deszenzitizációt egy protein kináz enzim végzi. A fiziológiai ingerek hatására a cisztikus sejtek száma megnőtt, melyek kivétel nélkül a programozott sejthalál morfológiai és molekuláris jeleit mutatták. Megállapítottuk, hogy a nyálfelszabadulás fiziológiai útja a mitochondrium-kaszpáz mediált útvonal. | The snail salivary gland is a suitable model in studying neuro-muscular, neuro-glandular synapse and the molecular mechanism of salivation. For cell types were identified in the gland and it was found, that distribution and number of different cell types were different in active and inactive snails. Vesicles in varicosities liberate dopamine, serotonin and number of neuropeptides. Gap-junction and desmosome-like structures ensure the synchronization of gland cells. Passive and active electrical properties of cells were examined and voltage-dependent ion currents were characterized. It was found that receptors occur in heterometric form, they bind both DA and 5HT and thereby antagonizing its effect. Our results contribute to the characterization and classification of 5HT-receptors in mollusc. The transmitter effect is modulated by peptides present only in molluscs, and by PACAP occurrence and distribution of which is described in mollusc. Signalling pathway of the neuropeptide (MIP) was studied and found that it is G-protein coupled and both subunits are active and the desensitization of the receptor is performed by receptor kinase. Physiological stimuli such as transmitters or nerve stimulation increased the number of cystic cells. These cells every time revealed a morphological and molecular signs of the programmed cell death. It is concluded, that the mitochondrial-caspase pathway of the programmed cell death is a physiological way of the saliva release