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CHARACTERISTICS OF FUSANTS BY INTERSPECIFIC PROTOPLAST FUSION OF THE GENUS CELLULOMONAS
Protoplasts of Cellulomonas flaviqena NCIB 12901 and Cellulomonas bibula NCIB 8142 were fused and regenerated, and characteristic of fusants obtained were investigated
In order to give genetic maker, C. bibula was treated with 500 ㎍/ml NTG for 1 hr. and arginine requiring auxotrophic mutants were isolated. Protoplasts of the genus Cellulomonas were obtained by treatment with 600 ㎍/ml lysozyme, and 0.5 M sorbitol was optimal for osmotic stabilizer on protoplast formation. Protoplast fusion was enhanced by 40% PEG(M.W.6,000) containing 25 mM CaCl_(2) at 30˚C for 30 min. and fusion frequency between C. bibula and C. flavigena was 5X10^(-4). Processes of protoplast formation, cell wall regeneration and protoplast fusion were observed by scanning electron microscope.
By comparing enzyme activities of cellulase, exocellobiohydrolase, β-glucosidase of the parent strains of Cellulomonas with that of their mutants and fusants, fusants with increased enzyme activity were obtained. By the studies on nutritional requirement, antibiotic resistance, cellulolytic enzyme activities, type of peptidoglycan and motility of two mutants and fusants, fusants were proved to be recombinant of both mutant strains.;섬유소를 분해할 수 있는 Cellulomonas flavigena NCIB 12901과 Cellulomonas bibula NCIB 8142의 종간 원형질체 융합을 하고 그로부터 얻은 융합체의 특성을 조사하였다.
C. bibula는 유전자 표지를 부여하기 위해 돌연변이 유발원인 NTG(500㎍/㎖)를 1시간 처리하여 Arginine 요구성 변이주를 얻었다. Cellulomonas속의 원형질체는 lysozyme(600㎍/㎖)를 6시간 처리하여 얻었으며, 이때 삼투압 안정제로는 0.5 M Sorbitol이 최적이었고, 원형질체의 재생율은 6.7%였다. 원형질체 융합은 25mM CaCl_(2)를 포함하는 40% PEG(M.W. 6000)를 30℃에서 30분간 처리함으로 수행하였고, 영양 요구성 및 항생물질 내성을 유전자 표지로 하여 융합체를 선별하였다. C. bibula와 C. flavigena의 융합 빈도는 5×10^(-4)으로 원형질체의 형성 및 세포벽 재생과 융합 과정은 주사 전자 현미경으로 확인하였다.
Cellulase exocellobiohydrolase, β-glucosidase 효소 활성이 아생형 균주나, 돌연변이주와 비교하여 증가된 융합체를 선별하였고, 모균주와 융합체의 세포벽 중 peptidoglycan을 추출 amino산 성분을 조사 비교하였다. 융합 균주의 영양 요구성, 항생물질 내성, 효소 활성, 세포벽 성분, 운동성 등을 비교하여 융합체는 모균주의 재조합체임을 밝히었다.목차 = ⅲ
논문개요 = ⅷ
Ⅰ. 서론 = 1
Ⅱ. 실험재료 및 방법 = 4
1. 실험 재료 = 4
(1) 사용 균주 = 4
(2) 배지 및 용액 = 4
2. 실험 방법 = 7
(1) 배양 방법 = 7
(2) 돌연변이주의 분리 = 7
(3) 원형질체 형성과 세포벽 재생 = 9
(4) 원형질체 융합 = 12
(5) 전자 현미경 시료 준비 및 촬영법 = 12
(6) 효소의 활성 측정 = 14
(7) 세포벽의 추출 및 peptideglycan의 amino acid type 결정 = 16
Ⅲ. 실험 결과 및 고찰 = 20
1. Cellulomonas속 세균의 증식 곡선 = 20
2. C. bibula의 돌연변이 유발과 분리 및 선별 = 20
(1) NTG에 의한 돌연변이 유발 및 분리 = 20
(2) 영양 요구성 변이주의 효소활성 = 24
3. C. bibla의 원형질체 형성 및 세포벽 재생 = 24
(1) 원형질체 형성 = 24
(2) 세포벽 재생 = 29
(3) SEM을 통한 관찰 = 29
4. 원형질체 융합 = 31
(1) 원형질체 융합 빈도 = 31
(2) SEM을 통한 관찰 = 31
5. 융합체의 특성 조사 = 33
(1) 융합 균주의 유전 형질 확인 = 33
(2) 융합체의 유전적 안정성 = 33
(3) 효소 활성 = 33
(4) Peptidoglycan의 amino acid type = 38
(5) 운동성 = 38
Ⅳ. 결론 = 42
참고문헌 = 43
PLATE = 50
ABSTRACT = 5
검체의 한정된 두께를 고려한 마이크로파 대역에서의 액와(腋窩)림프절의 유전율 측정에 관한 연구
학위논문(석사)--서울대학교 대학원 :전기· 컴퓨터공학부,2003.Maste
후-중합 과정에서 3D 프린팅 된 광중합체에 다양한 온도와 함께 글리세린 또는 진공을 사용한 산소 차단 효과 평가
With recent advances in digital dentistry, additive manufacturing provides a tailored approach to various dental treatments and could offer an advanced solution for fabricating dentures that require freeform designs. The photosensitive resin used in additive manufacturing is cured by free radical polymerization by UV irradiation. A high percentage of polymeric conversion helps improve the mechanical properties. However, undesired reaction with oxygen during polymerization inhibits polymerization and results in an under-cured polymer. Therefore, in this study, the hypothesis that successful oxygen shielding in the post-polymerization step could affect the properties of the final polymer was tested. Additionally, other factors such as temperature variation can influence the efficacy of post-polymerization while in interaction with immediate micro-environment. Therefore, in this study, we tested the following null hypotheses that (i) oxygen shielding in the post-polymerization step could not affect the properties of the final polymer, (ii) varying post-polymerization temperature has no significant effect on the final polymer and (iii) the two factors do not have any interaction. 3D printed specimens using denture base resin were post polymerized either by immersion in glycerin for oxygen shielding (GL group) or placed in a medium-low vacuum chamber at 5 × 10-2 Torr (VA group). Specimens cured with no additional conditioning served as the control (CON group). To consider the effect of temperature, all groups were additionally compared after post-polymerization at 80 °C or without an increase in temperature (room temperature). Fourier transform infrared spectroscopy was used to measure the monomer conversion ratios between different groups. In addition, the mechanical properties were quantified by the micro-hardness, flexural strength, and elasticity, and the water sorption and solubility. Dynamic mechanical analysis (DMA) was conducted to observe the trend in storage and loss modulus between the groups against temperature. Differences in the surface as a function of the post-polymerization conditions were qualitatively observed by scanning electron microscopy (SEM). All results were statistically analyzed by two-way analysis of variants (ANOVA), considering the post-polymerization conditions and temperature to confirm interaction within the factors. To compare the different post-polymerization conditions, ANOVA was performed with the Tukey method for post-hoc testing. Finally, the effect of Temperature was compared using a t-test for the same post-polymerization condition. The level of significance (p value) was set at 0.05 (95% confidence interval) for all tests. Oxygen shielding during post-polymerization showed an increase in the degree of conversion (DC) and hardness of the resin surface. The highest DC was observed for GL-group specimens at both room temperature and 80 °C. This result was confirmed by the SEM micrographs of the resin surface, where the interface between the layers of the GL group structure becomes more robust. However, a difference was observed between the samples prepared at room temperature and 80 °C. The flexural modulus was highest in the GL group, followed by the VA group, and lowest in the CON group at 80 °C. No difference in water sorption was observed for any groups, but high water solubility was observed in the GL group at room temperature. Overall, more significant differences in the properties were observed for the samples post-polymerized at 80 °C than at room temperature. The results of DMA analysis to determine the glass transition temperature showed a similar trend in all groups, and the storage modulus and loss rate obtained in the same experiment decreased in the order of GL, CON, and VA. In conclusion, an oxygen shielded post-polymerization environment at elevated temperature effectively improves the mechanical properties of photosensitive resin. Therefore, within the limitations, the use of glycerin as a barrier to oxygen diffusion at elevated temperature could be recommended to improve the properties of 3D-printed resins for dental applications.
디지털 치과의 발전과 함께 맞춤형 접근 방식을 제공하는 적층 제작 방식은 자 유형 디자인을 필요로 하는 치과 보철물 제작에 진보된 해결책을 제공할 수 있다. 적 층 제조에 사용되는 감광성 수지는 자외선 조사에 의해 자유 라디칼 중합으로 경화되 며, 고분자의 높은 전환율은 우수한 기계적 특성을 달성하는데 도움을 준다. 하지만 중합과정에서의 산소와의 반응은 중합을 억제하고 경화되지 않은 중합체를 생성한다. 또한 온도 변화와 같은 다른 요인도 즉각적인 미세 환경과 상호 작용하면서 후-중합 효과에 영향을 미칠 수 있다. 따라서 본 연구에서는 후-중합 단계에서 (1) 산소 차단, (2) 다양한 후-중합 온도는 최종 광중합체 특성에 영향을 미칠 수 없고, (3) 두 요인 간 상호작용이 없다는 귀무 가설을 검증하였다. 의치상 베이스용 수지를 사용하여 3D 프린팅 된 시편은 글리세린에 담그거나 (GL 군), 5.0×10-2 Torr의 중-저 진공 챔버(VA 군)에 넣어 후-중합 하였다. 추가적 인 컨디셔닝 없이 경화된 시편은 대조군으로 사용되었다(CON 군). 또한, 온도 변화의 작용을 고려하여 모든 그룹을 80 °C와 실온에서 비교하였다. 푸리에 변환 적외선 분 광 분석법(FT-IR)을 사용하여 경화된 시편의 표면에서 단량체 전환을 직접 측정하였 다. 또한, 표면 미세경도, 굴곡강도 및 탄성, 물의 흡수 및 용해도를 통해 기계적 물성 을 정량화 하였다. 온도에 대한 그룹 간에 굴곡 탄성계수의 경향을 관찰하기 위해 동 적 기계적 분석(DMA)을 수행하였다. 후-중합 조건에 따른 표면의 차이를 주사전자현 미경(SEM) 이미지를 통해 정성적으로 차이를 관찰하였다. 모든 결과는 요인 내 상호 작용을 확인하기 위해 후-중합 조건과 온도를 고려 하여 이원 배치 분산분석에 의해 통계적으로 분석되었다. 다양한 후-중합 조건을 비 교하기 위해 일원 배치 분산분석을 수행하였으며, 사후 검정으로 Tukey 방법을 사용 하였다. 마지막으로 후-중합 조건에 대해서 온도 변화의 영향을 t-test를 사용하여 비교하였다. 유의 수준은 모든 테스트에 대해 0.05(95% 신뢰 구간)로 설정되었다. 후-중합 동안 산소의 차단은 수지 표면의 전환율과 경도의 증가를 보였다. 전 환율은 실온과 80 °C에서 모두 GL 군에서 가장 높게 나타났다. 이는 수지 표면의 SEM 현미경 이미지에서도 볼 수 있다. 그러나 실온과 80 °C 에서는 차이가 관찰되었 다. 굴곡 탄성은 80 °C에서 GL 군이 가장 높았고, VA 군이 그 뒤를 이었으며, CON 군이 가장 낮았다. 물의 흡수도는 모든 군에서 차이를 보이지 않았지만, 실온에서 GL 군에서 높은 용해도가 보였다. 전반적으로 실온 보다는 80 °C에서 후-중합 했을 때 효과의 차이가 높게 관찰되었다. 유리전이온도(Tg)에 대한 DMA 분석 결과 모든 그룹 이 비슷한 경향을 보였으며, 동일한 실험에서 저장 탄성률과 손실률은 GL, CON, VA 순으로 감소하였다. 결론적으로 높은 온도에서 산소 차단된 후-중합 환경은 감광성 레진의 기계적 특성을 효과적으로 향상시킨다. 따라서 연구의 한계 내에서 높은 온도에서 산소 확산 에 대한 장벽으로 글리세린을 사용하여 치과 응용 분야에서 3D 프린팅 레진의 특성 을 개선하는 것이 추천된다.open박
E2EPF ubiquitin carrier protein-von Hippel-Lindau interaction and uses of thereof
The present invention relates to the E2EPF UCP-VHL interaction and the uses thereof, more precisely a method for increasing or reducing VHL activity or level by regulating UCP activity or level to inhibit cancer cell proliferation or metastasis or to increase angiogenesis. The inhibition of UCP activity is accomplished by any UCP activity inhibitor selected from a group consisting of a small interfering RNA (RNAi), an antisense oligonucleotide, and a polynucleotide complementarily binding to mRNA of UCP, a peptide, a peptide mimetics and an antibody, and a low molecular compound. In the meantime, the increase of angiogenesis is accomplished by the following mechanism; UCP over-expression is induced by a gene carrier and thus endogenous VHL is reduced, leading to the stabilization of HIF-1α which enhances VEGF activation based on the HIF-1α stabilization. The method for regulating UCP activity or level results in the increase or decrease of VHL activity or level, so that it can be applied to the development of an anticancer agent and an angiogenesis inducer.국
Triazolo Quinazoline Dione Derivatives
본 발명은 트리아졸로 퀴나졸린디온 유도체에 관한 것으로, 신규 합성된 트리아졸로 퀴나졸린 디온 유도체가 암세포의 증식을 억제하고, 생체 내에서도 항암 활성을 나타내므로, 본 발명의 화합물을 암 치료 분야에서 유용하게 사용할 수 있다.국
A multi-channel flow rate controller
본 발명은 순환관을 통해 유체를 공급받는 복수개의 용기; 상기 용기에 설치되어 용기의 변화되는 중량값을 측정하는 측정장치; 및 상기 측정장치에서 측정된 신호에 따라 적어도 하나의 용기를 선택하여 상기 용기로 공급되는 유체의 양을 제어하는 유량제어수단; 을 포함하는 다채널 정밀 유량제어장치에 관한 것이다.본 발명은 서로 연결된 복수개의 용기에 유체를 제어하는 다채널 유량 제어방법에 있어서, 상기 복수개의 용기에 유체를 공급하여 저장하는 유체공급단계; 데이터베이스부에 입력중량값을 입력하여 저장하는 입력중량값 저장단계; 측정장치로 상기 복수개의 용기의 중량을 측정한 후 신호처리부로 신호를 전달하는 신호처리단계; 상기 신호처리부에서 처리된 신호는 비교연산부로 전달되어 상기 입력중량값과 비교연산하는 비교연산 단계; 및 상기 비교연산부에서 처리된 비교연산값에 따라 적어도 하나의 순환관을 선택하는 순환관 선택단계; 를 포함하는 다채널 정밀 유량제어방법에 관한 것이다.open국
Dual structured cell culture dish
본 발명은 상면이 개방되며, 배양액을 담을 수 있는 외부용기; 상기 외부용기의 상단에 결합되어 미생물이 침투하는 것을 방지하는 용기 커버; 및 상기 외부용기 내부에 위치하여 배양액을 담을 수 있고, 상기 외부용기로 부터 분리 가능한 내부용기; 를 포함한 것을 특징으로 하는 세포배양용기에 관한 것이다.국
Precision circulating culture system
본 발명은 복수개의 이중배양용기; 상기 복수개의 배양용기가 상호 연결되도록 이웃하는 각각의 배양용기를 연결하며, 양 말단에 배치되는 한 쌍의 배양용기를 연결하는 순환관; 상기 순환관에 연결설치되어, 상기 순환관을 따라 유체를 상기 배양용기에 공급하는 펌프; 상기 펌프를 구동하는 펌프구동수단; 상기 배양용기에 설치되어 배양과정에서 상기 배양용기의 변화되는 중량값을 측정하는 중량센서; 및 상기 중량센서에서 측정되는 신호에 따라 선택적으로 어느 하나의 상기 펌프구동수단을 작동시키는 유량제어수단; 을 포함하는 순환 배양 시스템에 관한 것이다.국
spatially combined v-band mmic coupled oscillator array in waveguide
본 논문은 V-band에서 동작하는 MMIC 결합 발진기 array에 관한 것이다. 제안된 발진기 array의 unit cell들은 한 개의 microstrip patch 안테나와 두개의 발진기가 결합된 push-pull 능동 안테나 구조로 되어 있다. 전체 발진기 array의 주파수 동기화는 각 unit cell의 microstrip patch 안테나 사이의 강한 전자기적 결합을 통해 이루어진다. 이로 인해 전체 array를 하나의 MMIC로 구현할 수 있었다. 제안된 구조로 설계된 2종의 V-band 1×2 결합 발진기 array가 0.15 um pHEMT MMIC 표준 공정을 이용해 제작되었다. 제작된 MMIC 칩은 도파관을 이용한 전력 결합 module로 구현되었다. 모듈 측정 결과, 첫 번째 array는 56.372 GHz에서 0.5 dBm의 출력을 나타내었고 다른 하나는 60.147 GHz에서 5.85 dBm의 출력을 나타내었다.
In this paper, V-band MMIC coupled oscillator arrays are presented. In the proposed array, two push-pull patch antennas are synchronized by using strong electromagnetic coupling between two antennas. As a result, total size of the array is reduced and the array can be integrated in a single chip. To verify proposed array concept, two 1×2 arrays are designed and fabricated using standard 0.15 um gate length pHEMT MMIC process. The circuits are mounted in an oversized waveguide and measured. The first array shows 0.5 dBm at 56.372 GHz and the second one has an output of 5.85 dBm at 60.147 GHz.N
