Neonatal screening for galactosemia using tandem mass spectrometry

의과학과/석사[한글] 갈락토오스혈증은 상염색체 우성으로 유전되는 대사이상질환으로galactose-1-phosphate uridyl transferase, galactokinase , 또는 UDP-galactose-4-epimerase 의 결핍으로 혈액과 조직 내에galactose-1-phosphate (gal-1-P)가 축적되어 그 증상이 나타난다. 갈락토오스혈증의 선별검사로는 기존에 여러 방법들이 소개되었으나 기존 방법들은 검체 전처리에 여러 과정과 여러시약들을 필요로 하며 검사소요시간이 길다는 단점을 가지고 있다. 본 연구는 tandem mass spectrometry (MS/MS)를 이용하여 갈락토오스혈증 선별검사를 시도하였다. Hexose monophosphates (HMPs)를 측정하여 간접적으로 갈락토오스혈증 진단의 표지자인 gal-1-P의 정량을 시도하였다. - - 생후 3-6일 사이의 신생아의 혈액여지를 이용하였으며 갈락토오스혈증으로 진단된 3예를 포함해서 158개의 혈액여지를 분석하였다. MS/MS를 이용하여 negative-ion mode에서 스캔하여 HMPs 농도를 이용하여 gal-1-P를 간접적으로 측정하였으며 ion abundance ratio (IAR, 전하질량 79과 97의 비)을 산출하였으며 상품화된 gal-1-P를 외부 표준물질로 이용하였다. 정상군에서 MS/MS법으로 실시한 aldose monophosphate (전하질량 79)의 평균 농도는 각각 1.46 mmol/L이었으며 ketose monophosphate (전하질량 97) 평균 농도는 2.63 mmol/L이었으며, 평균 IAR은 1.22, 0.50이었다. 그리고 갈락토오스혈증 환자에서 이들 각각의 aldose monophosphate 농도는 24.9, 20.4, 18.5 mmol/L이었으며 IAR은 각각 1.54, 1.67, 1.72로 정상군에 보여 증가되었다. 그리고, 기존 ECA법과도 좋은 상관관계를 보여주었다. 갈락토오스혈증 선별검사를 위한 MS/MS법은 기존 ECA법과 좋은 상관관계를 보이며 갈락토오스혈증 환자에서 현저히 증가된 값을보였다. MS/MS을 이용한 갈락토오스혈증 선별검사는 보다 소요시간이 짧고 검체 전처리에 적은 과정이 필요하며 위양성을 줄일 수 있는 좋은 검사로 사료되었다. [영문]Galactosemia (OMIM 230400) is an inherited disorder in the metabolism of galactose caused by deficiency of the enzyme galactose-1-phosphate uridyl transferase, galactokinase, or UDP-galactose-4-epimerase, which leads to accumulation of galactose and galatose-1-phosphate (gal-1-P) in blood and tissues. There are several methods for neonatal screening of galactosemia. Enzymatic colorimetric assay (ECA) is widely used method. But all current methods require special reagents with multistep sample preparation procedures, and are time-consuming. The object of this studyis to evaluate tandem mass spectrometry (MS/MS) for the screening of galactosemia. The specimens were analyzed by a MS/MS protocol to determine the hexose monophosphates (HMPs) content, from which indirectly gal-1-P, a marker of galactosemia was determined. We analyzed dried filter-paper blood samples obtained 3~6 days after birth for routine neonatal screening from 158 cases, including 3 galactosemia patients. Total HMPs were assayed by negative-ion mode electrospray tandem mass spectrometry (MS/MS). The predominant precursor/product ion pair (m/z 259/79) was used to quantify total HMPs by external standardization. A total of 111 reference samples were available for this study. The mean concentration of aldose monophosphate and the mean concentration of ketose monophosphate were 1.46 mmol/L, 2.63 mmol/L, respectively. The mean ion abundance ratio (IAR) was 0.50. Samples from galactosemia patients (deficiency of UDP-galactose-4-epimerase) showed increased HMP (m/z 79) concentration (range for patients, 18.5-24.9 mmol/L) and IAR (range for patients, 1.52-1.72). MS/MS method was in good correlation with ECA (r2=0.926). And turn around time was less than 2 minutes. In conclusion, quantitative analysis of HMPs by MS/MS was correlated well with conventional ECA method, reducing the turnaround time comparing with ECA method, and was regarded as useful for the galactosemia screening.ope

Clinical Study on the Congenital Anomalies of the Kidney and Upper Urinary Tract

의학과/석사[영문] [한글] 신장 및 상부요로계의 기형은 여러 종류의 신장 및 요로계 질환들의 중요한 원인이 되 며 때로는 만성 신부전증까지도 초래할 수 있다. 비뇨생식기계의 기형은 전체 선천성 기형의 10%내외를 차지하는데 중추신경계, 심혈관 계, 소화기계, 근골격계의 기형과 더불어 높은 빈도를 보인다. 이들중 대부분을 차지하는 하부요로계 기형은 대개 육안으로 쉽게 관찰될 수 있어 많은 보고들이 있으나 신장 및 상부요로계기형은 외형적으로 나타나지 않고 신생아기에 기형을 의심 할만한 문제를 일으 키지 않는 경우가 많아 진단이 어려운점이 있으며 이에 대한 보고도 국내에서는 거의 없 는 실정이다. 본 연구는 신장 및 상부요로계의 선천성 기형의 종류 및 각각의 빈도에 관 하여 그리고 환아 개개인의 단독 또는 다수기형의 발생에 관하여 알아 보았으며, 다음으 로 그 기형들 중에서 빈도가 높은 몇가지 기형들에 대하여 발생빈도, 성, 연령, 위치, 형 태 그리고 동반된 타장기의 기형에 관하여 알아보고자 하였다. 연세대학교 의과대학 부속 세브란스병원에 입원한 1978년 7월부터 1988년 6월까지의 소 아과환아 및 1984년 7월부터 1988년 6월가지의 비뇨기과 환아중 신장 및 상부요로계 기형 이 있는 179명을 대상으로 하였으며 각 기형별 관찰에서 방광요관역류가 68례로 가장 많 았고 요관신우접부협착이 42례, 이중 요집합계가 36례, 요관방광접부협착, 요관류, 이소 요관등의 순으로 기형이 발생하였다. 환아 개인별 관찰에서는 방광요관역류 환아 68명중 14례에서 다른 기형이 동반되었고 남녀비는 1.3:1 이었다. 연령분포는 1세 미만이 32%였 으며 연령이 증가할수륵 빈도가 낮았다. Grade III 이상의 역류를 보였던 환아중 6세 이 상이 10례나 되었다. 요관신우협착환아 42명중 3례에서 다른 기형이 동반되었고 남녀비는 2.8:1 이었다. 이중 요집합계환아 35명중 17례에서 다른 기형이 동반되었는테 요관류가 6례로 제일 많았다. 남녀비는 1:1.6이었고 3세 미만은 50%였다. 방광요관역류, 요관신우 접부협착, 이중 요집합계의 병변위치와 형태를 보면 모두에서 일측성이 양측성보다 많았 고 방광요관역류와 요관신우접부협착에서는 좌측에서 호발하는 것을 알 수 있었다. 이중 요집합계는 완전형이 50%로 가장 많았고 혼합형은 65였다. 신기형은 32례에서 발견되었으며 다낭포성신 9례, 편측성 신무발육증 8례, 신이형성증 5례, 마제신 3례, 이소성신 2례등의 순이었고 신이형성중 5례중 2례에서 이소성요관이 동 반되었다. 타장기의 기형이 동반된 환아는 15명으로 기형의 빈도는 심장혈관계, 중추신경 계, 하부요로생식기계의 순이었다. 이상과 같이 신장 및 상부요로계기형의 환아가 적지 않은데도 국내에는 정확한 조사가 되어 있지 않음으로 이에대한 많은 연구가 필요하고, 신장 및 상부요로계 기형의 조기발 견을 위해서는 태아, 신생아 및 학동들의 집단선별검사가 필요하며, 요로계 환아에게 적 극적인 자세한 검사들을 시행하는 것이 중요하다고 하겠다. Clinical study on the congenital anomalies of the kidney and upper urinary tract. Jae Kyoun Rhim Department of Medical Scicnce The Graduate School Yonsei University (Directed by Jac Seung Lee, M.D) The incidence of the congenital anomalies of the urogenital system in Korea is about 10% of all congenital anomalies in neonates. In contrast to the lower urinary tract anomalies, which make up the majority of the urogenital anomalies, anomalies of the kidney and upper urinary tract are rather difficult to diagnose and therefore are scarecely reported. The medical records of the patients with the anomalies of the urogenital system during the 10-year period from July 1978 to June 1988 were reviewed and analyzed for incidence, age and sex distribution, location of the lesion and associated diseases. As a result, anomalies of the kidney and upper urinary tract were found in 179 patients. Vesicoureteral reflux, in 68 patients. was most common, followed by ureteropelvic junction stenosis, double collecting system, ureterovesical junction stenosis, ureterocele. and ectopic uretel. Sex ratio of the patients with vesicoureteral reflux was 1.3:1, and the other anomalies were associated in 14 cases. Patients under 1 year of age comprised 32%. In 42 patients with ureteropelvic juncton stenosis, male to female ratio was 2.8:1, and male patients predominated especially under 1 year of age. Among 36 patients with double collecting system 17 accompanied other anomalies, of which ureterocele was the most frequent finding, accounting for 6 cases. Male to female ratio was 1:1.6, and patients under 3 year of age comprised 50%. In vesicoureteral reflux, ureteropelvic junction stenosis, and double collecting system, unilateral cases outnumbered bilateral ones. Especially both in vesicourteral reflux and ureteropelvic junction stenosis, a great number of cases occured on the left side. In double collecting system, complete type was most common, comprising 50% of cases. Meanwhhile. anomalies localized in the kidney were detected in 32 cases, among which polycystic kidney was most common, accounting for 9 cases, followed by 8 cases of unilateral renal agenesis, 5 of renal dysplasia, 3 of horseshoe kidney and 2 of renal ectopic. There were 15 patients who also had anomalies in other organ systems such as cardiovascular, neuroectodermal, urogenital, skeletal, gastrointestinal and chromosomal anomalies.restrictio

Proteinase activity of acanthamoeba sp. with reference to pathogenicity

의학과/박사[한글] 자유생활아메바의 병원성과 단백분해효소의 연관성을 밝히기 위해 병원성인 Acanthamoeba culbertsoni와 비병원성 인 Acanthamoeba sp. 한국 분리주 YM-3에서 단백분해효소의 활성을 비교 관찰하였다. 각 아메바의 영양형을 ICR 마우스에 접종시켜 사망률을 관찰하였다. A.culbertsoni 와 Acanthamoeba sp., YM-3의 영양형 1x10**5개가 함유된 부유액 5μl를 secobarbital로 마취한 마우스의 비강에 떨어뜨려 감염시켰다. A.culbertsoni에 감염된 마우스의 사망률이 60.0%였고 YM-3를 감염시켰을 때 사망률이 0%였다. Gelatin을 기질로 한 Sodium dodesyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis의 결과 A.culbertsoni는 6개, YM-3는 5개의 분획을 보였다. Chinese hamster ovary 세포에 대한 세포독성을 Cytotox 96 assay kit(Promega, Madison, Wl, U.S.A.)을 사용하여 측정한 결과, A.culbertsoni와 YM-3는 차이를 보이지 않았다. A.culbertsoni 와 YM-3의 단백분해효소원은 azocasein을 기질로 하여 활성잔기 억제 실험을 한 결과 차이를 보였다. A.culbertsoni와 YM-3의 용해물자 24시간 배양액에 여러 단백분해 활성 억제제를 처리하였다. A.culbertsoni에 cysteine계 단백분효소와 serine 및 histidine계 단백분해효소가 존재함을 알수 있었고 YM-3에는 serine 및 histidine계 단백분해효소가 있음이 관찰되었다 Sephacryl S-300-HR column을 사용하여 부분정제한 A.culbertsoni의 용해물을 임의로 6개의 분획으로 나누고 단백분해 활성 억제제를 처리하여 Ⅲ번 분획이 cysteine계 단백분해효소원이고, V번 분획이 serine 및 histidine계 단백분해효소원임을 추정할 수 있었으며, 그 분자량을 측정한 결과 Ⅲ번 분획이 63,100 Da, V분획은 33,900 Da였다. [영문] The pathogenicity of free-living amoeba has been 7own to be related to the proteinase activity. This study aimed to verify the proteinase acclivity of Acanthamoeba sp. Korean isolate YM-3 and /acanthamoeba culbertsoni with reference to the pathogenicity. Mortality of ICR mice inoculated intranasally with 1×10**5 Acanthamoeba app. trophozoites was observed. Forty of the mice infected with A.culbertsoni were survived after 17 days. None of the mice which was infected with YM-3 was dead. This demonstrated that A.culbertsoni was pathogenic strain and YM-3 was non-pathogenic strain, To determine the type of proteinase, various modification reagents were added to Acanthamoeba app. Iysate and media. Various reagents used were as follows; Aspartic type proteinase inhibitors, serine type proteinase inhibitors, Phenylglyoxal, partial serine type proteinase inhibitor and cysteine type proteinase inhibitor(leupeptin), some serine type proteinase inhibitor and histidine type proteinase inhibitor. As a result, cysteine type, serine type, histidine type proteinases were detected in A.culbertsoni and serine type, histidine type poteinases were detected in YM-3. Proteinase activity of A.culbertsoni and YM-3 was tested by SDS-PAGE containing 0.4% gelatin. A.culbertsoni and YM-3 revealed different band patterns, 6 bands for A.culbertsoni and 5 bands for YM-3. The cytotoxicty was observed against Chinese hamster ovarian cell using the Cytotox 96 assay kit(Promega, Madison Wl, U.S.A.) This was not different between A.culbertsoni and YM-3. The Gel filtratifnl of A.culbertsoni Iysate was performed using Sephacryl S-300-HR. Six fractions were demonstrated and tested by various proteinase inhibitors. Ⅲ fiaction was inhibited by cysteine type proteinase inhibitor, and V flaction was inhibited by serine and histidine type proteinase inhibitor. Molecular weight of Ⅲ fraction was 63,100 Da'and V fraction 33,900Da.restrictio

단층 영상을 생성하기 위한 장치와 방법

A method of generating a tomography image includes performing a depth scan on one spot on a surface of a subject using modulated light received from a spatial light modulator, obtaining depth scan data for each of a plurality of patterns of the spatial light modulator by repeating the depth scan on the spot for each of the plurality of patterns, forming a matrix R representing a vector space based on a correlation of signal values of the depth scan data for each of the plurality of patterns, performing a matrix decomposition on the matrix R, dividing the vector space into a noise subspace and a signal subspace based on a matrix obtained by the matrix decomposition, constructing a vector space based on either one or both of components of the signal subspace and components of the noise subspace, and generating a tomography image based on the reconstructed vector space

Apparatus and method for generating tomography image

단층 영상을 생성하는 방법 및 장치는, 깊이 스캔이 반복적으로 수행되는 동안, 깊이 스캔에 의해 획득된 간섭 신호를 이용하여 후보 단층 영상을 생성하고, 생성된 후보 단층 영상을 이용하여 대상체에 대해 가장 선명한 단층 영상을 획득하기 위한 최적 픽셀 패턴을 반복적으로 결정한다. 그리고 나서, 깊이 스캔이 모두 완료된 경우 최종적으로 결정된 최적 픽셀 패턴을 이용하여 최종 단층 영상이 생성된다

파장 변환 레이저의 중심 파장을 피드백하여 안정화하는 시스템

An apparatus and method for stabilizing an output of a laser is provided. An optical amplifier oscillates light having a first wavelength band. A filter filters the light having the first wavelength band to output light having a second wavelength band narrower than the first wavelength band. The light having the second wavelength band may correspond to an output of a laser. To stabilize the wavelength center of the output laser, at least a portion of the light having the second wavelength band may be transferred to a fiber Bragg Grating (FBG) through a coupler. By performing feedback of a difference between the signal output from the FBG and a laser modulation signal, an offset corresponding to a lead zirconate titanate (PZT) operating parameter of a Fabry-Perot filter may be controlled to automatically stabilize the wavelength center

Apparatus and method for generating tomography image

단층 영상 생성 방법 및 이를 수행하는 단층 영상 생성 장치에 따르면, 픽셀들이 배열된 패턴에 따라 입사되는 광선의 위상을 변조시키는 공간 광 변조기의 적어도 하나의 기본 패턴을 결정하고, 기본 패턴에 대하여 수직 또는 수평 방향으로 소정의 개수만큼 픽셀들의 배열을 이동시키는 공간 시프트 변조를 수행하여 기본 패턴의 복수의 시프트 패턴들을 획득하고, 공간 광 변조기를 통과하여 대상체에 입사된 광선들에 의하여 획득되는 광선들의 스펙트럼 신호를 이용하여 기본 패턴의 복수의 시프트 패턴들 각각에 대한 단층 영상들을 생성하고, 생성된 단층 영상들에 기초하여 기본 패턴의 복수의 시프트 패턴들 중 가장 선명한 단층 영상을 생성하는 하나의 패턴을 선택하고, 선택된 패턴을 이용하여 대상체에 대한 최종 단층 영상을 생성한다

Synthesis and Characterization of Dithienyl-DPP-based Copolymer and Applications to Solution-Processable organic Transistor

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단층 영상을 생성하기 위한 장치와 방법

Provided is an apparatus and method for generating tomography mages, the apparatus including a detection unit configured to modulate each of incident beams into at least two basic modulated incident lights on the basis of at least a basic modulation parameter and into a target modulated incident light on the basis of a target modulation parameter, and to detect at least two basic interference signals and a target interference signal of an object; and an imaging unit configured to analyze the at least two basic interference signals to output a set target modulation parameter, to process the target interference signal as a target image of the object, and to output the target image