오로볼의 자외선에 의한 피부 주름 개선 효능 및 작용기작 규명

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 농생명공학부, 2016. 8. 이기원.콩 내의 생리활성 물질인 이소플라본은 주름억제, 미백, 보습 등의 효능을 갖기에 유용한 기능성 화장품, 식품 소재이다. 본 연구에서는 콩 이소플라본 genistein의 대사체인 오로볼이 피부 노화를 예방할 수 있음을 제시하였다. 광노화는 자외선 노출에 의해 비정상적으로 유도된 콜라겐 분해효소 (Matrix Metalloproteinase, MMP-1)가 피부 내 콜라겐을 과다하게 분해하는 과정이다. MMP-1의 분비는 자외선에 의해 활성화된 세포 전달 기작이 MMP-1의 상위 전사인자인 Activator protein-1 (AP-1)의 전사과정을 촉진함으로써 일어난다. 본 연구 결과, 콩 발효 대사체인 오로볼은 피부 각질 형성세포 및 인간 진피 섬유아세포에서 자외선에 의해 유도된 MMP-1의 단백질 발현을 농도 의존적으로 억제하였으며, MMP-1 전사 과정 역시 저해됨을 확인하였다. 또한, 오로볼은 MMP-1의 주요 전사인자인 AP-1을 효과적으로 억제하였다. AP-1 및 MMP-1을 조절하는 상위 신호전달 표적 단백질을 규명하기 위하여 인체 내 존재하는 359종의 Kinase와의 결합을 확인하는 Kinase profiling을 수행하였다. 그 결과, T-LAK Cell originated Protein Kinase (TOPK)를 orobol과 직접 결합하는 상위 신호전달 표적 단백질로 선정하였다. kinase assay와 pull-down assay를 수행한 결과, 오로볼은 TOPK에 직접적으로 결합함으로써 MAPKs (ERK, JNK, p38)의 인산화로 인한 AP-1 활성을 막는 것을 규명하였다. 추후, TOPK를 knock-down한 세포에서 동일한 신호 기작이 일어나는지에 대한 추가 연구가 진행될 예정이다. 본 연구 결과를 통해 오로볼은 자외선에 유도된 피부노화를 억제하는 강력한 화학적 효능을 가지고 있음을 규명하였다. 본 연구를 바탕으로 오로볼을 자외선 노출에 의해 발생되는 피부 노화를 개선할 수 있는 소재로 이용할 수 있을 것이다.Soy isoflavones are attractive source of functional cosmetic and food materials with anti-wrinkle, whitening and skin hydration effects. After fermentation or bioconversion, the majority of soy isoflavones are transformed to their metabolites. Recently, metabolites have been studied in their improved bioactivity. Matrix metalloproteinase (MMP)-1 play a critical role in the degradation of collagen in skin, thereby accelerating the photoaging process of skin. In this study, I investigated the anti-photoaging effect of orobol, a major metabolite of genistein in soybean. Orobol reduced sUV induced MMP-1 expression in human keratinocyte (HaCaT) cells and human dermal fibroblasts (HDFs). It further inhibited MMP-1 mRNA transcription. And the transactivation of AP-1, a major transcription factor of MMP-1, is also suppressed. From a 359 whole human kinase profiling assay, T-LAK Cell-originated Protein Kinase (TOPK) was suggested as a direct target of orobol. Additionally, orobol decreased sUV induced phosphorylation of extracellular signal-regulated kinase (ERK), c-Jun N-terminal kinases (JNK) and p38 mitogen-activated protein kinase (p38) which are downstream of TOPK. In addition, pull-down assay showed that orobol directly bound TOPK in ATP non-competitive manner. Overall, orobol produced the anti photoaging effect by directly targeting TOPK and suppressing sUV-induced MMP-1 expression in HaCaT cells and HDFs. Thus, orobol could be a beneficial agent for reducing sUV-induced wrinkle formation.Ⅰ.INTRODUCTION 1 Ⅱ.MATERIALS AND METHODS 5 1.Chemicals and reagents 5 2.Cell culture and treatments 6 3.sUV irradiation 6 4.Cell viability 7 5.Western blot 7 6.Gelatin zymography 8 7.Real-time quantitative PCR 9 8.Luciferase reporter gene assay 9 9.In vitro and ex vivo pull down assay 11 10.Kinase profiling and kinase assay 11 11.Statistical analysis 12 Ⅲ.RESULTS 13 1.Orobol has inhibitory effect on sUV-induced MMP-1 protein expression in HaCaT cells and HDFs 13 2.Orobol decrease sUV-induced MMP-1 gene transcription and transactivation, resulting from suppression of AP-1 tansactivation 17 3.Orobol reduces the kinases activity including TOPK 21 4.Orobol suppresses sUV-induced MAPKs phosphorylation in HaCaT cells and HDFs 30 5.Orobol inhibits TOPK activity and directly binds to ATP non competitive binding site of TOPK 33 Ⅳ.DISCUSSION 37 Ⅴ.REFERENCES 42 Ⅵ.국문초록 48Maste

Social Network Effect on Creative Performance in Korean Film Industry

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 경영학과, 2012. 2. 이동기.이 연구는 네트워크의 거시적 구조와 네트워크 내에 위치한 개인의 창의적 성과가 갖는 관계를 알아보는 데 주된 목적이 있다. 창의성은 혁신을 견인하는 주된 요인이다. 이러한 창의성을 높이는 요소로 스몰월드 네트워크 구조는 다양한 분야에서 핫이슈로 떠올랐다. 사람들은 행위를 함에 있어 불가피하게 사회적 네트워크를 형성하고, 그러한 개별적 연결망이 모여 네트워크의 거시적 구조를 형성한다. 네트워크의 거시적 구조는 다시 네트워크 내 개인의 창의적 성과에 영향을 미친다. 이 연구는 이와 같은 이론적 주장을 실증분석을 통해 증명해 보고자 하였으며, 1920~2009년 동안 한국영화 제작진의 공동제작 네트워크를 분석 대상으로 삼았다. 그 결과, 기존 스몰월드 네트워크 연구와 일관되게, 두 노드 간 평균 거리가 짧은 네트워크에서 개인의 창의적인 성과가 증가하였으며, 거대 컴포넌트가 등장한 네트워크에서 창의적인 성과가 증가하는 경향이 있음을 알 수 있었다. 노드 간 사회적 거리가 짧고, 거대 컴포넌트로 연결되어 있는 네트워크는 많은 양의 정보와 아이디어가 효율적으로 이동하기 때문이다. 또한 시계열 분석을 통해 네트워크의 연결선 도수분포가 진화해 가는 과정을 분석하였으며, 그 결과 창의적 성과가 뛰어난 시기의 도수분포가 싱글 스케일에서 브로드 스케일로 진화함을 발견할 수 있었다.Maste