Thiol compounds and transcription factor NF-κB on IL-8 production in Helicobactor pylori-stimulated gastric epithelial cells

의과학사업단/박사[영문] [한글] Helicobacter pylori (H. pylori)는 위궤양과 위암과 같은 여러 위장관 질환을 일으키는 주된 위험 요소 중 하나로 알려졌지만 그 정확한 기전은 명확히 규명되지 않았다. Redo x에 의해 활성이 민감하게 조절되는 전사조절인자인 Nuclear factor κB (NF-κB)와 acti vator protein-1 (AP-1)은 염증유발 cytokine 또는 흡착인자와 같이 염증에 관여하는 인 자의 발현에 관여하는 것으로 생각하고 있다. 인체의 위 상피세포인 AGS에서 H. pylori 가 inducible nitric oxide synthase (iNOS)를 발현시킴을 선행연구에서 보고한 바 있다. 본 연구는 H. pylori, nitric oxide (NO), NF-κB또는 AP-1의 활성 변동과 염증유발 cyt okine인 interleukin-8 (IL-8) 단백 사이의 연관성을 밝히고, 항산화 효과를 갖는 thiol 화합물인 glutathione (GSH)과 N-acetylcysteine (NAC)이 NF-κB, AP-1과 IL-8 단백 생성 에 미치는 효과를 규명하고자 하였다. 인체 위 상피세포인 AGS에 H. pylori를 100:1의 비 율로 처리하고, 배지 내에 유리되는 IL-8과 지질과산화물의 양을 각각 효소결합면역흡착 법과 분광광도법으로 측정하여 시간에 따른 증가를 관찰하였다. 또한 형광염료인 5-(6)-c hloromethyl-2,7-dichlorodihydro fluorescein diacetate로 위 상피세포를 염색한 후, co nfocal microscopy를 이용하여 H. pylori를 투여하고 시간이 증가함에 따라 활성산소종이 증가함을 확인하였다. NF-κB와 AP-1의 활성 변동은 H. pylori 자극으로 증가함을 젤 지 연 분석법을 통해 관찰하였다. 항산화 효과를 갖는 thiol 화합물인 NAC와 GSH의 병용투 여로 NF-κB와 AP-1의 활성 변동과 IL-8 단백 유리가 농도 의존적으로 억제되었다. NO 공 여물질인 SIN-1과 NOC-18의 투여로 위 상피세포에서의 NF-κB와 AP-1의 활성변동이 증가 하고 IL-8 단백의 유리가 시간 의존적으로 증가하였다. 각 전사조절인자들의 결합부위의 한 염기를 치환한 DNA를 transfection한 위 상피 세포로 luciferase reporter assay를 수 행한 결과 전사조절인자인 NF-κB와 AP-1이 H. pylori 또는 NO 공여물질에 의하여 유도되 는 IL-8의 발현에 반드시 필요함을 확인하였다. 이상의 결과를 통하여 H. pylori로부터 발생된 활성산소종 또는 활성질소종은 염증유발 cytokine인 IL-8의 발현을 유도하며, 이 과정에는 전사조절인자인 NF-κB와 AP-1의 활성 증가가 반드시 필요하다는 결론을 얻었다 . Thiol 화합물인 NAC 또는 GSH는 H. pylori에 의한 NF-κB와 AP-1 활성 증가를 억제함으 로써, H. pylori에 의해 유도되는 IL-8 단백 생성을 감소시켜 위점막의 염증성 손상에 대 하여 보호작용을 나타낼 것으로 생각된다. THIOL COMPOUNDS AND TRANSCRIPTION FACTOR NF-κB ON IL-8 PRODUCTION IN HELICOBACTOR PYLORI-STIMULATED GASTRIC EPITHELIAL CELLS Even though Helicobacter pylori (H. pylori) is considered as one of the major risk factors in the pathogenesis of many gastrointestinal diseases such as peptic ulcer and gastric cancer, exact pathogenic mechanisms have not been clarified. Redox sensitive transcription factors, nuclear factor κB (NF-κB) and activator protein-1 (AP-1), are believed to be involved in the inflammatory events such as gene expressions of proinflammatory cytokines and adhesion molecules. The previous studies showed that inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression was induced in H. pylori-stimulated AGS cell. The present study aimed 1) to determine the relations among reactive oxygen species (ROS), nitric oxide (NO), the activations of NF-κB and AP-1 as well as the production of proinflammatoy cytokine interleukin-8 (IL-8) and 2) to investigate the effects of N-acetylcysteine (NAC) and glutathione (GSH), known thiol containing free radical scavengers, on the activations of NFκB and AP-1 activation as well as IL-8 production in H. pylori-stimulated gastric epithelial AGS cells. AGS cells, treated with or without NAC and GSH, were incubated in the presence or the absence of H. pylori at the ratio of 100:1 (H.pylori:AGS). The levels of lipid peroxides (LPO) and IL-8 were measured by colorimetric methods and ELISA, respectively. Production of ROS were determined by confocal microscopy using fluorescence releasing dye, 5-(6)-chloromethyl-2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate. DNA binding activities of NF-κB and AP-1 were detected by eletrophoretic mobility shift assay (EMSA). Involvement of transcription factors on H. pylori- or nitric oxide (NO) donors-induced IL-8 expression were investigated by lucifease reporter assay. H. pylori stimulation induced DNA binding activities of NF-κB and AP-1, and increased IL-8 release time-dependently. H. pylori-induced alterations were inhibited by treatment with NAC or GSH dose-dependently in AGS cells. error(2): wrong syntax It is concluded that 1) ROS generated from H. pylori and nitric oxide may activate NF-κB and AP-1, resulting in upregulation of proinflammatoy cytokine IL-8 in AGS cells, and 2) NAC and GSH may be beneficial to attenuate H. pylori-induced damages resulting from their inhibition on the activations of NF-κB and AP-1 as well as IL-8 productions in AGS cells.ope

Speckle displacement measurement using image correlation

Maste

Assembly sequence planning for ship and offshore structures considering welding distortion

학위논문(석사) - 한국과학기술원 : 해양시스템대학원, 2015.8 ,[vi, 53 p. :]조선 해양 생산에서 용접 공정은 필연적으로 변형을 수반한다. 이러한 용접 공정의 변형은 해양 플랜트의 품질과 생산성에 영향을 미친다. 따라서 해양 플랜트의 고품질과 생산성의 향상을 위해 용접 공정에 의한 변형의 감소에 대한 연구되어야 한다. 조립순서는 다른 부재의 조립 시 구속도를 변형시켜 구조물의 최종 변형값에 영향을 준다. 따라서 변형을 최소화 시킬 수 있는 최적의 조립순서가 필요하다. 동시에 생산성을 향상시키기 위한 연구 역시 병행되어야 한다. 본 연구에서는 해양 플랜트의 생산성을 고려함과 동시에 용접 공정에서의 부재의 각 조립 단계의 변형을 고려해 변형을 최소화할 수 있는 최적 조립 순서를 도출 할 수 있는 알고리즘을 개발한다. 사례기반추론(Case-based reasoning)을 통해 각 부재의 종류를 정의하여 부재의 유사성이 생산성에 미치는 영향을 고려하며, 조립 순서에 따른 부재의 이동 및 조립 작업 방법을 고려한다. 또한 용접 생산 공정을 고려하기 위해 용접 공정시의 부재 선호도와 용접의 종류를 고려한다. 용접 변형은 열변형도 기반의 탄성해석을 통해 각 단계별 부재의 구속도와 강성을 고려한 간의 해석법을 이용, 최소의 변형을 갖는 조립 순서를 도출한다. 앞서 실제 생산 현장과 용접 생산 공정을 고려한 생산성과 조립 순서에 따라 변하는 구속도에 따른 용접 변형을 동시에 고려하는 실제 건조 비용과 시간을 고려한 Cost function을 통해 최적의 조립순서를 도출한다.한국과학기술원 :해양시스템대학원

Effect of pertussis toxin and herbimycin a on proteinase-activated receptor 2-mediated cyclooxygenase 2 expression in Helicobacter pylori-infected gastric epithelial AGS cells

Helicobacter pylori (H. pylori) is an important risk factor for chronic gastritis, peptic ulcer, and gastric cancer. Proteinase-activated receptor 2 (PAR2), subgroup of G-protein coupled receptor family, is highly expressed in gastric cancer, and chronic expression of cyclooxygenase-2 (COX-2) plays an important role in H. pylori-associated gastric carcinogenesis and inflammation. We previously demonstrated that H. pylori induced the expression of PAR2 and COX-2 in gastric epithelial cells. Present study aims to investigate whether COX-2 expression induced by H. pylori in Korean isolates is mediated by PAR2 via activation of Gi protein and Src kinase in gastric epithelial AGS cells. Results showed that H. pylori-induced COX-2 expression was inhibited in the cells transfected with antisense oligonucleotide for PAR2 or treated with Gi protein blocker pertussis toxin, Src kinase inhibitor herbimycin A and soybean trypsin inbitor, indicating that COX-2 expression is mediated by PAR2 through activation of Gi protein and Src kinase in gastric epithelial cells infected with H. pylori in Korean isolates. Thus, targeting the activation of PAR2 may be beneficial for prevention or treatment of gastric inflammation and carcinogenesis associated with H. pylori infection. © Yonsei University College of Medicine 2011