H. pylori의 EGFR 신호전달에 미치는 영향 및 celecoxib의 위암발생 억제기전 연구

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 의학과, 2012. 8. 김나영.배경 : Helicobacter pylori (H. pylori)의 감염은 세포의 생존 조절능력을 저해하여 위암의 발생위험을 증가시킨다. H. pylori 감염은 세포내 EGFR의 활성화와 관련이 있으며, 하부단계의 phosphatidylinositol 3-OH kinase (PI3K)-Akt-Glycogen synthase kinase-3 (GSK3) 와 같은 경로를 활성화시켜 세포의 생존과 이동을 조절하는 것으로 알려져 있다. 또한 H. pylori감염은 COX-2의 과발현을 유발하는데, 이전 연구에서 COX-2 억제제인 celecoxib가 Akt 신호전달경로를 억제한다고 밝힌 바 있다. EGFR과 COX-2는 Akt 신호전달경로를 공유하며 긴밀한 영향을 주고받을 가능성이 있다. 이에 본 연구는 H. pylori가 EGFR 신호전달에 미치는 영향을 확인하고 celecoxib이 이를 억제하는지 확인하고자 하였다. 연구재료 및 방법 : AGS 위암세포주를 H. pylori (cagA+, vacA+) G27과 cagE 돌연변이를 가진 G27에 24시간동안 감염시킨 후 mRNA와 단백질의 발현을 확인하였다. COX-2, EGFR, TGF-ß, Snail, Slug, E-cadherin의 mRNA발현을 RT-PCR로확인하였다. 그리고 다양한 농도(0, 10, 20, 30 µmol/L)의 ceclecoxib를 처리하여 COX-2, EGFR, tAkt, pAkt와 pGSK3ß의 단백질 발현을 확인하였다. 결과 : AGS 위암세포주에서 wild type의 H. pylori 감염은 COX-2, EGFR, TGF-ß, Snail, Slug의 mRNA 발현을 증가시켰으며 E-cadherin의 mRNA발현을 감소시켰다. 또한 wild type의 H. pylori 감염은 COX-2, EGFR, pAkt, pGSK3ß 의 단백질 발현을 증가시킨 반면, cagE 돌연변이로 인해 IV형 분비계에 결함이 있는 H. pylori에 의한 감염은 EGFR을 활성화시키지 못하였다. Celecoxib은 H. pylori에 의해 과발현되는 COX-2 (p=0.015), EGFR (p=0.025), pAkt (p=0.025)와 pGSK3ß (p= 0.029)를 억제시켰다. 결론 : AGS 위암세포주에서IV형 분비계가 정상인H. pylori에 의한 감염은 EGFR 신호전달체계를 활성화시켰으며, celecoxib은 이를 억제하는 효과를 보였다.Background and aim: Helicobacter pylori (H. pylori) infection increases the risk of gastric cancer through disrupting the regulation of cell survival. H. pylori infection is associated with epithelial growth factor receptor (EGFR) activation. EGFR downstream targets, such as phosphatidyl inositol 3-OH kinase (PI3K)-Akt-glycogen synthase kinase-3 (GSK3) pathways, regulate cell survival and migration. H. pylori infection also induces cyclooxygenase-2 (COX-2) over-expression, and previous study suggested that selective COX-2 inhibitor, celecoxib, blocks Akt signaling pathways. COX-2 and EGFR may cross talk through Akt-signaling pathways. The aim of the present study was to evaluate the effect of H. pylori on EGFR signaling pathways and to find out whether celecoxib has inhibitory effect on the EGFR signaling pathway or not. Methods: AGS gastric epithelial cell lines were co-cultured with the toxigenic H. pylori cagA+, vacA+ G27 and the cagE- mutant of G27. The expressions of COX-2, EGFR, TGF-ß, Snail, Slug and E-cadherin were measured by real-time PCR. In the next, western blot analyses of COX-2, EGFR, total Akt (tAkt), phosphorylated Akt (pAkt) and pGSK3ß were carried out at various concentrations (0, 10, 20, 30μmol/L) of celecoxib treatment for 24 hours in H. pylori treated AGS cell lines. Results: H. pylori infection significantly up-regulated the mRNA levels of COX-2, EGFR,TGF-ß, Snail, Slug and down-regulated E-cadherin in RT-PCR. AGS cell lines treated with cagE- mutants, which have a defective type IV secretion system did not show EGFR up-regulation. Celecoxib had inhibitory effects on H. pylori-induced over-expression of COX-2 (p=0.015), EGFR (p=0.025), pAkt (p=0.025) and pGSK3ß (p=0.029) in AGS cell lines in Western blot analysis. Conclusion: Infection by H. pylori with intact type IV secretion system activates EGFR signal pathways in AGS cell lines and celecoxib has inhibitory effect on this pathway. These finding provide insights into the anti-gastric cancer effect of celecoxib.초록 I 목차 Ⅲ LIST OF TABLES Ⅳ LIST OF FIGURES Ⅴ 본문 서론 1 연구재료 및 방법 2 연구결과.. 5 고찰 13 참고문헌 17 국문초록 23Maste

중심립 유리과정에서 pericentrin 역할 연구

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 자연과학대학 생명과학부, 2017. 8. 이건수.A centrosome is composed of a centriole surrounded by protein matrix, called pericentriolar materials (PCM). The microtubule organization is the prime function of the centrosome. Cilia formation is another important function of the centrosome in quiescent cells. Duplication and segregation of centrioles occur in tight link to cell cycle. A daughter centriole is assembled next to the mother centriole during S phase, and remained in an engaged state until the cell exits M phase. New daughter centrioles may be generated only after the mother and daughter centrioles in the previous cycle are separated. Therefore, centriole separation is considered a licensing step for centriole duplication. However, it is largely unknown how centriole engagement is maintained and disrupted during the cell cycle. Pericentrin (PCNT) is a PCM protein which is important for maturation process of centrosome to become spindle poles during mitotic entry. PCNT is also involved in induction of centriole separation during mitotic exit. PCNT is specifically cleaved, which is considered an essential step for centriole separation during mitotic exit. The purpose of my research is to elucidate mechanistic aspects of PCNT functions in centriole engagement and separation during M phase. In chapter 1, I report that PCNT has to be phosphorylated by PLK1 in order to be a suitable substrate of separase. The phospho-resistant mutants of PCNT are not cleaved by separase and eventually inhibit centriole separation. Furthermore, phospho-mimetic PCNT mutants rescue centriole separation even in the presence of BI2536. Based on these results, I propose that PLK1 phosphorylation is a priming step for separase-mediated cleavage of PCNT and eventually for centriole separation. PLK1 phosphorylation of PCNT provides an additional layer of regulatory mechanism to ensure the fidelity of centriole separation during mitotic exit. In chapter 2, I generated PCNT knockout cell lines and analyzed the phenotypes in relation to PCM assembly and centriole association. Deletion of PCNT hardly affected interphase centrosomes but conferred defects in centrosome maturation in cells entering M phase. The centrioles in PCNT–deleted cells were prematurely separated in early phase of mitosis and frequently amplified in M phase-arrested cells. Abnormal multi-nuclear cells repeatedly appeared in PCNT-deleted cells at interphase. My results confirmed that PCNT is critical for centriole association during M phase.BACKGROUND 1 1. Structure of centrosome 1 1.1 Discovery of centrosome 1 1.2 Centrioles 1 1.3 Pericentriolar material (PCM) 2 2. Functions of centrosome 6 2.1 Microtubule network formation in interphase 6 2.2 Spindle formation during mitosis 6 2.3 Primary cilia formation in quiescent cells 7 3. Centrosome cycle 12 3.1 Initiation of centriole duplication 12 3.2 Centriole elongation 13 3.3 Centrosome maturation 13 3.4 Centrosome separation 14 3.5 Bipolar spindle formation 14 3.6 Centriole disengagement 14 4. Licensing mechanism for centriole duplication: Centriole engagement and disengagement 19 PURPOSE 23 CHAPTER 1. PLK1 regulation of PCNT cleavage ensures fidelity of centriole separation during mitotic exit 24 ABSTRACT 25 INTRODUCTION 26 MATERIAL AND METHODS 29 Plasmids, siRNA, and cell culture 29 Antibodies 30 Immunoprecipitation and immunoblot analyses 31 Immunostaining analysis 33 Statistical analysis 34 RESULTS 35 BI2536 blocks both PCM disassembly and centriole separation 35 PLK1 phosphorylation is necessary for PCNT cleavage 36 PLK1 phosphorylates PCNT in vivo 38 PCNT phosphorylation is necessary for centriole separation 40 PCNT and CEP215 are essential for centriole association 41 Dual functions of PLK1 phosphorylation of PCNT 43 Discussion 60 CHAPTER 2. Phenotypic analyses of PCNT-deleted cells 64 ABSTRACT 65 INTRODUCTION 66 MATERIAL AND METHODS 68 Plasmids, siRNA, and cell culture 68 Generation of knockout cell lines with CRISPR/CAS9 system 69 Antibodies 69 Immunoblot analysis 70 Immunostaining analysis 71 Statistical analysis 72 RESULTS 73 Generation of PCNTTP53 double knockout cell lines 73 Interphase centrosomes in the PCNT-deleted cells 73 Spindle poles in the PCNT-deleted mitotic cells 74 Active role of PCNT for centriole association 77 DISCUSSION 94 PERSPECTIVE 98 REFERENCES 101 ABSTRACT IN KOREAN (국문 초록) 108Docto

금나노 입자를 이용한 switchable-linker 기반 검출법의 응집과 침전반응에 영향을 미치는 요소에 관한 연구

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 농업생명과학대학 농생명공학부, 2018. 8. 최영진.Aggregation of gold nanoparticles (AuNPs) has been used in various fields for assorted purposes. In particular, detection of analytes through visual color changes induced by aggregation of AuNPs has been extensively studied in recent years. In our previous research, switchable-linker based detection system was introduced. In the system, sensing of specific targets is achieved based on the quantitative correlations between linkers, targets and particles. When the number of particles and linkers are ideally matched, a maximum aggregation occurs in suspension inducing aggregates settling. This linker range where aggregates precipitation dominantly occurs is called exhibiting visual color change (REVC). Since REVC plays a critical role in the system, it is important to gain an understanding of the factors that could affect in REVC formation. However, little research has been done about the basic mechanisms of REVC formation based on AuNPs aggregation and precipitation, especially focusing on the effects of particles size and surface area. In this study, the effects of total surface area of AuNPs in REVC formation were identified by comparing 3 different cases. In the first case, 11 nm and 19 nm-sized particles were used in the previous study. Under the same plasmon absorbance, as the size of particle increased, the total surface area decreased. In this case, REVC appeared at lower linker concentrations with a narrower range. After the addition of target streptavidin, REVC shifted more in 19 nm particles which had smaller surface area. As for the second case, 12, 18, and 24 nm-sized particles were used. In this case, the number of particles was identically adjusted, thus as the particle size increased, the total surface area of AuNPs increased. In larger surface area, REVC appeared at higher linker concentrations in a broader range which correspondsss to the previous results. With the addition of target streptavidin, REVC shifted less as the surface area increased. Lastly, the surface area of AuNPs was identically adjusted by controlling the number of particles using 13, 21, 30, and 36 nm-sized particles. Under the same surface area, REVC was formed at a similar linker concentrations regardless of individual particle sizes and REVC shifting occurred identically under the addition of target streptavidin. Three cases indicated that as the surface area of AuNPs decreased, REVC worked more sensitively as a sensor. As part of an effort to confirm the reaction time according to particles, the third case was intensively interpreted. When the surface area of AuNPs was identically controlled, it was observed that in 21 nm-sized particles, REVC was formed the slowest among others in observation time of 200 minutes. From DLS size measurements of aggregates and Stokes law, settling velocity of aggregates in REVC was calculated. At an early settling stage, aggregates of 30 and 36 nm-sized particles precipitated more rapidly. However, as time went by, settling speed of aggregates composed of 13 and 21 nm-sized particles reached beyond the speed of larger particles. At around 120 minutes, the settling velocity of aggregates composed of 13 nm-sized particles went over than that of 21 nm-sized particles. This phenomenon might be explained by the fact that smaller individual particles made clusters more rapidly in much bigger sizes, thus settling speed inversion seemed to be happened. The results of this study suggest the importance of the surface area in REVC formation and the aggregates precipitation speed inversion was revealed by the actual calculations using Stokes law. These can be contributed to the further development of switchable-linker based detection system and can be used as clues in other aggregation-based applications.Ⅰ. INTRODUCTION 10 Ⅱ. MATERIALS AND METHODS 13 2.1. Materials 13 2.2. Instrumentation 13 2.3. Preparation of gold nanoparticles 14 2.4. Preparation of streptavidin-coated gold nanoparticles (stAuNP) 18 2.5. Adjustment of the total surface area of AuNPs 22 2.6. Schematic explanations of the switchable-linker based detection system 24 Ⅲ. RESULTS AND DISCUSSION 28 3.1. Effects of AuNPs surface area on REVC formation under the different conditions 28 3.1.1. REVC formation under the same absorption spectra 28 3.1.2. REVC formation under the same number of particles 32 3.1.3. REVC formation under the same AuNPs surface area 35 3.2. Settling velocity of aggregates in REVC interpreted by the modified Stokes law 38 3.2.1. Aggregates sizes obtained by DLS and TEM measurements of 13, 21, 30, and 36 nm-sized particles 39 3.2.2. Settling velocity of aggregates in REVC using the modified Stokes law and occurrence of speed inversion phenomenon 47 Ⅳ. CONCLUSION 53 Ⅴ. REFERENCES 55 국문초록 59Maste

Research in Using Spatial Pattern Analysis of GIS for Department Store Marketing

본 연구에서는 고객의 정확한 위치정보와 속성정보를 이용하여 공간분석을 시행하였다. 기존의 연구는 인구 통계 데이터와 거래 데이터를 사용하여 상이한 특징을 지니는 고객들로 세분화한 연구가 많았으나, 본 연구는 고객의 공간 데이터를 중심으로 공간 분포를 확인하고 공간분포에 따른 인구 통계적 특성과 거래 특성을 연구하였다. 본 연구는 지금까지 간과하고 있었던 데이터의 중요 요인인 공간 데이터를 중심으로 백화점 고객을 좀 더 깊이 있게 분석, 파악하여 효과적인 마케팅 집중 고객과 잠재고객 지역을 선정하는 대안을 제시하고자 하였다. 본 연구의 목적은 고객의 위치와 매출 자료를 근거로 고객의 공간적 집중 분포 지역을 GIS를 활용한 밀도분석을 통해 파악하고, 거래 특성과 관련한 다수의 군집으로 분류한 후 군집별 공간적 특성과 거래 특성을 군집 분석을 통해 파악하는데 있다. 그리고 최우수고객의 공간적 분포특성과 거래특성을 최근린 계층군집분석을 통해 분석하고, 마지막으로 마케팅 집중 고객과 잠재 고객의 마케팅 지역을 선정하는 데 본 연구의 목적이 있다. 이를 위해 서울시 B 백화점 4개 지점의 카드 거래 고객 중 우수고객 데이터를 추출하여 우편번호 코드체계로 된 거주지 정보를 공간 객체의 점 사상으로 생성하였다. 먼저 우수 고객들의 일반적인 현황을 알아보고 고객들의 전반적인 특성을 파악하였다. 고객 분포 특성을 알아보기 위해 GIS 공간분석기법 중 밀도분석기법 DENCLUE와 Voronoi Diagram, 군집분석기법 K-means Clustering, Nearest neighbor hierarchical clustering을 수행하여 고객의 밀집 위치 및 군집을 발견하고 고객의 거래 특성을 파악하였다. 연구 결과 일반적 특성 분석을 통해 30~40대 연령대가 15~17시에 많은 이용을 하며, 20대가 17시 이후에 많은 이용을 하고 있음을 알 수 있었으며, 고객 수와 구매량 중심의 밀도 분석을 통해 남가좌동, 옥수동, 잠원동, 풍납동 중심의 밀집 지역을 시각화할 수 있었다. 또한 군집분석을 통해 신촌, 용산, 강남, 천호 지역에 나타난 4개 군집 고객들의 구매 현황과 연령별, 시간대별, 주거형태별 특성을 파악할 수 있었고, 최근린 계층군집 분석을 통해 매출액의 80% 이상을 차지하는 최우수 고객들의 분포와 주 거래 품목, 연령, 시간대, 주거형태 등의 특성을 알 수 있었다. 마지막으로 서울시 인구밀도와 우수고객 밀도의 버퍼를 통한 영향권 파악으로 잠재고객 지역을 선정하였다. 잠재적으로 최우수 고객이 될 수 있는 지역은 경쟁백화점의 영향권에 포함되지 않고, B백화점 영향권 내의 인구가 많은 지역 중 최우수 고객이 없으며 아파트 공시지가가 높은 지역으로 둔촌, 광장, 마포, 연희, 망원, 신정, 토정, 하중, 현석, 창전동 등이 선정되었다. 또한 모든 백화점의 영향권에 포함되지 않지만 인구가 많으며 아파트 공시지가가 높은 지역을 잠재적으로 우수고객을 유치할 수 있는 지역으로 예측할 수 있었다. 이것으로 마케팅 집중 지역의 고객 특성을 반영한 마케팅 대안을 제시할 수 있었다. GIS를 활용한 공간분석기법을 적용하여 군집으로 나타난 우수고객과 최우수고객이 밀집된 지역에 마케팅을 집중하고, 인구밀도와 경쟁지점 위치를 통해 선정한 잠재고객 지역에 차별화된 마케팅 노력을 기울인다면 효율적인 매출 증진 방안이 될 수 있다.;The major reason that spatial analysis has attracted a great deal of attention in business GIS in recent years is due to the wide availability of huge amounts of spatial data and the imminent need for turning such data into useful geographic information. In the research area of geography, we investigate the spatial distribution characteristics and patterns of department store customer in many databases using GIS. The purpose of this research is to predict the targeted marketing area by discriminating the potential customers who use credit card in department store by transaction quantity. Focused on the methodology, this research is aiming to use Geographic Information System(GIS), DENCLUE, Spatial Statistics to identify the spatial aspects in department store customer's databases, to investigate the spatial distribution patterns of department store customer and to analyze the associations among department store customers with geographic feature. Department store customer data was classified into the point (the location of department store customer) and the area unit data (aggregate to an administrative district). Particularly, these patterns are used of the clustering algorithm with K-means and Nearest neighbor hierarchical clustering to investigate the local patterns of department store customer. And then, the associations between spatial distribution patterns of department store customer and geographic feature are investigated with the factors including the proximity to department stores and the others. On the theoretical level, spatial statistics is very useful for detecting spatial factor of huge amount of geographical data and analyzing the distribution pattern of department store customer. Especially local spatial patterns are analyzed by Hierarchical clustering algorithm with k-means to investigate the local patterns of department store customer reflecting geographic characteristics of study region. On the practical level, this paper identify the effect of residence type, economic characteristic and geographic feature of the study area on the spatial distribution and consumption pattern of department store customer. There not only proximity to department stores but the others are important factors to analyze the potential customers. Therefore, this case study will be useful for marketers who want to find their target marketing area and discriminate a potential customer in automatic way.I. 서론 = 1 A. 연구의 필요성과 목적 = 1 B. 연구 방법 = 3 C. 이론적 배경과 선행연구 = 5 II. 점 패턴 데이터의 공간분석 기법 = 8 A. 밀도 분석 = 8 1. DENCLUE(Density-based Clustering) = 9 2. Voronoi Diagram = 11 B. 군집 분석 = 13 1. K-means partitioning Clustering = 13 2. 최근린 계층군집(nearest neighbor hierarchical clustering) = 15 III. 백화점 고객의 공간적 분포 특성 = 16 A. 백화점 고객의 일반적 현황 = 16 B. GIS를 이용한 우수고객의 밀도 분석 = 23 1. DENCLUE를 활용한 고객 분포 특성 = 23 2. Voronoi Diagram을 활용한 고객 분포 특성 = 25 C. GIS를 활용한 우수고객의 군집 분석 = 27 1. K-means Clustering을 활용한 군집별 고객 분포 특성 = 27 2. 최근린 계층군집분석을 활용한 최우수 고객 분포 특성 = 31 D. 잠재적 고객의 분포 = 36 IV. 결론 및 논의 = 42 참고문헌 = 45 ABSTRACT = 4

A basic study on the protocol training program of International conference

국가간의 정치·경제적 상호교류의 확대에 따라 성장한 국제회의산업은 최근 부가가치가 높은 신종산업으로 부상하게 되었다. 국제회의 산업의 질적 향상의 근본이 되는 것이 의전 담당자의 자질이며, 의전 담당자의 자질은 국제회의 산업에 직접적인 영향을 미치게 된다. 무엇보다 의전 담당자의 질적 수준향상을 위해서는 의전이라는 특수한 임무를 수행하기 위한 전문적이고 체계적인 의전 교육 프로그램이 요구된다. 이에 본 연구의 목적은 첫째, 현재 이루어지고 있는 국제회의 의전 교육의 현황을 파악하고, 이에 도출된 문제점을 토대로 둘째, 국제회의 의전 교육 프로그램에서 가장 필요한 교육내용과 교육방법들을 분석하여 셋째, 국제회의 산업에서 의전 담당자들의 지위향상과 역할수행을 지원할 수 있는 체계적이고 종합적인 의전 교육 프로그램 개발에 기초 자료로 제공하고자 한다. 본 연구를 위해 기본적으로는 국제회의 의전 교육 프로그램 개발에 필요한 기초 자료의 확보를 위해 해당분야의 문헌과 학술지 및 연구논문을 분석한 후 국제회의 의전교육의 현황 및 문제점을 분석하고 국제회의 의전 교육 프로그램 개발을 위해 정부기관 및 공공기관, PCO업체(국제회의 전문업체)의 의전 담당자와 국제회의 전문가들을 대상으로 면접조사를 실시하였다. 설문지는 사전 조사를 통하여 최종문항이 결정되었으며 총 210부의 설문지를 배포하여 186부를 회수 하였으며, 수집된 자료는 SPSS 13.0을 사용하여 분석하였다. 신뢰도 검증을 위해 Cronvach-α를 사용하였고, 국제회의 의전 교육 프로그램의 현황과 문제점을 알아보기 위해 빈도분석을 사용하였다. 국제회의 의전 교육에 필요한 내용을 알아보기 위해 빈도분석과 t-test, ANOVA분석을 사용하였고, 의전 교육방법을 알아보기 위해 빈도분석을 사용하였다. 본 연구에서는 국제회의 의전 교육 프로그램의 현황과 문제점을 도출하고 국제회의 의전에 필요한 이론 교육 내용과 의전 실무 교육 내용을 분류하여 모델을 제언하였다.;The purpose of this research is to provide source materials for developing the systematical and synthetic curriculum and appropriate protocol training program to assist the position improvement and performance of the roles of the people responsible for protocol at the international conference protocol industry by analyzing problems and presenting situation of international conference protocol training as well as by analyzing the most necessary contents of training for the international protocol training program. We analyzed problems and current situations of international protocol training after performing analysis of references and research papers related to this field to obtain source materials that is necessary to develop international protocol training program. In addition, we performed the preliminary survey with people in charge of the government agencies, public institutions, and PCO enterprise (a special company for international conference) and experts of international conferences. The final queries for the questionnaire were determined through the preliminary survey. We obtained 186 questionnaires from 210 in total and analyzed the collected data by using SPSS 13.0. The reliability of this research was confirmed by Cronvach-α. Frequency analysis was used to figure out the current situation and problems of international conference protocol training program. Frequency, t-test, and ANOVA analysis were performed to obtain factors that are necessary for the international conference protocol training, and frequency cross-tabulation analysis was used to figure out the way of protocol training. The results of our research show that the current situation of protocol training is not sufficient for international conference protocol because most of the protocol training are focused only on theories and are weak in practice. In addition, our results indicate that Korean government, public institutions, PCO enterprise and professional training institutions lack systematic protocol training programs and the level of their training programs are below standard. Another problem is that there are a lot of dissatisfactions after protocol training. The reason for the dissatisfaction is that the contents of training program are not sufficient for the practical field and also outdated. Training contents of theory in international conference protocol are composed of attitude toward globalization, protocol precedence, ability of protocol management, understanding of foreign culture, banquet, international protocol ceremony, reception procedure, regulation of protocol, and introduction of international conference protocol. The practical training contents of international conference protocol are composed of foreign language, on-the-job-training, practical affair of international conference protocol, protocol etiquette, banquet, national protocol and social etiquette, and customer services. International conference protocol training program has to be synthetically and systematically developed at professional training institution according to the characteristics of trainee group to design the curriculum of protocol training for each group. In addition, it is necessary to regularly and longitudinally develop the protocol training program to accomplish successful training.제1장 서론 = 1 1. 연구의 배경 = 1 2. 연구의 필요성 및 목적 = 2 3. 용어의 정리 = 3 제2장 국제회의 의전과 교육 프로그램 = 5 제1절 의전의 개념 및 종류 = 5 1. 의전의 정의 = 5 2. 의전연구의 유래 및 배경 = 6 3. 의전의 종류 = 7 제2절 국제회의 의전0의 중요성과 사례연구 = 7 1. 국제회의 의전의 중요성 = 7 2. 국제회의 의전관리 기본계획 = 8 3. 국내외 의전 사례연구(case study) = 9 제3절 일반적 용어 = 15 1. 교육 프로그램 의의와 개념 = 15 2. 교육 프로그램 = 16 3. 교육 프로그램 개발 = 21 제3장 연구방법 = 23 제1절 연구절차 = 23 제2절 사전조사 = 23 제3절 본조사 = 25 1. 연구대상 = 25 2. 측정도구 = 26 3. 자료수집 = 28 4. 자료 분석의 방법 = 28 제4장 연구결과 및 해석 = 30 제1절 응답자의 일반적인 특성분석 = 30 제2절 측정도구의 신뢰성 및 타당성 = 30 제3절 국제회의 의전 교육 프로그램 = 32 1. 국제회의 의전 교육 현황 = 32 2. 국제회의 의전 교육 프로그램 만족도 평가 = 35 제4절 국제회의 의전 교육 내용 = 44 제5절 국제회의 의전 교육 방법 = 65 제6절 국제회의 의전 교육 프로그램 모델 제언 = 69 제5장 결론 = 76 제1절 연구결과의 요약 및 시사점 = 76 제2절 연구의 한계 및 제언사항 = 79 참고문헌 = 83 설문지 = 86 ABSTRACT = 9

걸러내지 못한 기억

This study is a record of recognizing the existence of the inner 'unfiltered memory' and filtering it into a work. I realized that specific memories imprinted in the unconscious, suddenly emerge as suffering or pain initiated by a stimulation, then show their existence in both mental and physical states of a being. This realization led me to perceive that trauma-like memory existed in my unconsciousness and question the form of memory that was accompanied by pain. Therefore, I as the researcher first examine how the memory of the past affects the subject and then examine how the memory is expressed and what it means. Based on this, I would like to express changing emotions and attitudes through my work and extend my study to how it connects to inner healing eventually. Accordingly, I newly defined the trauma, the memory imprinted in the unconscious, as 'unfiltered memory' and try to understand the form of memory called from the unconscious to the consciousness based on the meaning of the memory and its expression presented by Marcel Proust. These memories are divided into “voluntary memories” and “involuntary memories,” and based on Gilles Deleuze's “involuntary memories,” they convey hidden truths of unconscious memories. Through this research process, the subject perceives 'unfiltered memory' and recognizes the necessity of the filtering action and tries to heal the memory through art. Memory Healing, based on Gestalt and Gestalt Therapy, talks about why memory healing is necessary and visually interprets the healing process through the filtering of the functional meaning and form of the ‘memory net’ in the artwork. In this way, the net in art work helps to face the memory of the past, stimulates a change of perception, and as a result, protects the inner self. Also, this research considers the meaning of art's healing based on the works of writers such as Louise Bourgeois and Cristina Iglesias who express healing and rest in their work. This paper is a record of a journey that contains changing of a being as it encounters its internal memories. The purpose of this research is to delve deeply into the wounds caused by neglect, disregard and emotional problems and seek for possible healing by looking directly into the inner mind. I, as the researcher, am at the starting point of this healing journey, and intend to provide an opportunity for weaving a strong and wide net inside one’s more maturely changed inner mind.;본 논문은 내면의 ‘걸러내지 못한 기억’의 존재를 인지하고 이를 작품으로 걸러내기까지의 기록이다. 연구자는 무의식 속에 각인된 특정한 기억이 자극을 통해 갑작스럽게 고통이나 아픔으로 살아나오는 경험을 시작으로 그 기억들은 자신의 존재를 정신적, 육체적으로 나타낸다는 것을 깨달았다. 이러한 경험은 본인의 무의식 속에 트라우마와 같은 기억이 존재하고 있었음을 지각하게 되었으며, 지각함과 동시에 고통스럽게 표출되어지는 기억의 형태에 의문을 가지게 되었다. 따라서 연구자는 과거의 기억이 어떠한 방식으로 주체에게 영향을 주는지 먼저 살펴본 후, 기억이 표출되어지는 방식과 의미에 대해 고찰하고자 한다. 그리고 이를 기반으로 변화되는 감정과 태도를 작업과 결부하여 표현하면서, 결과적으로 내면의 치유까지 다다르는 연구를 하고자 한다. 이에 따라 연구자는 무의식 속 각인된 기억인 트라우마를 ‘걸러내지 못한 기억’으로 새롭게 정의하고 마르셀 프루스트(Marcel Proust)가 제시한 기억의 의미와 이의 표출 방식을 기반으로 무의식에서 의식으로 전환되는 기억의 형태에 대해 이해하고자 한다. 이러한 기억은 ‘자발적 기억’과 ‘비자발적 기억’ 나뉘어지며, 질 들뢰즈 (Gilles Deleuze)의‘무의지적 기억’을 토대로 무의식에 내재하는 기억이 지닌 숨겨진 진실에 대해 알아본다. 이러한 연구 과정을 통하여 연구자는 ‘걸러내지 못한 기억’을 지각하게 되면서 걸러내기 행위의 필요성을 인지하고 이를 예술로써 기억을 치유하고자 한다. 기억 치유는 게슈탈트(Gestalt)와 게슈탈트 치료(Gestalt Therapy)를 바탕으로 기억 치유가 필요한 이유에 대해 이야기하고 작품 속 ‘기억 그물’의 걸러내는 기능적 의미와 형태를 통해 치유되는 과정을 시각적으로 해석한다. 이처럼 작품 속 그물은 과거의 기억과 똑바로 마주하도록 도와주며 인식의 변화를 야기시키고 이의 결과로 내면을 스스로 보호할 수 있게 한다. 그리고 치유와 쉼을 담은 작가 루이스 부르주아(Louise Bourgeois)와 크리스티나 이글레시아스(Cristina Iglesias)의 작품을 토대로 예술이 가진 치유의 의미에 대해 고찰한다. 본 논문은 내면의 기억을 인지하게 되면서 변화되어지는 자신을 담은 여정의 기록이다. 외면하고 방치했던 상처와 감정들로 생겨난 문제들을 인지하고 치유할 수 있는 가능성에 대해 깊게 고찰하며 내면을 온전하게 바라보고자 한다. 여기서 연구자는 이 치유의 여정의 출발점에 위치하며, 이 연구를 토대로 보다 성숙하게 변화한 내면 속에 튼튼하고 넓은 그물을 엮어나갈 수 있는 계기를 마련해주는 데에 그 의미를 두고자 한다.Ⅰ. 서론 1 Ⅱ. 남아버린 기억 4 A. 기억 저장소 4 B. 걸러내지 못한 기억 6 C. 무의식 속 자발적인 기억과 비자발적 기억 8 Ⅲ. 예술로 흘려보내기 12 A. 기억 걸러내기 12 B. 기억 그물 14 C. 기억 치유의 예술 16 Ⅳ. 작품설명 23 Ⅴ. 결론 68 참고문헌 70 ABSTRACT 7

Cyclosporin A 치료의 부작용인 치은 과성장에 대한 azithromycin의 작용기전에 대한 연구

Dept. of Medical Science/석사[한글] 목적: Cyclosporin A (CsA)는 1970년대 이래로 장기이식이나 골수이식 수술을 받은 환자들에게 보편적으로 처방되는 면역억제제이다. 그러나 CsA는 획기적인 효과를 갖고 있음에도 불구하고, 신독성, 간독성 등 다양한 부작용을 나타내며, 치은과성장도 그 중 한가지이다. 이식 수술을 받은 후, CsA를 복용한 환자들에서 나타나는 치은과성장은 평균 30%로 높은 비율로 보고되었다. 최근 임상연구를 통해서 CsA로 인한 치은과성장은 macrolide 계열의 항생제인 azithromycin(AZI)에 의해 효과적으로 억제된다는 결과가 보고되었다. 그러나 현재까지 CsA에 의한 치은과성장의 유도기전과, AZI에 의한 억제기전은 명확히 밝혀지지 않았다. 그러므로, 본 연구에서는 CsA에 의한 치은과성장 유도 기전과 AZI에 의한 억제 기전을 밝히고자 한다. 방법: 치은 섬유아세포는 과거에 CsA를 복용하여 치은과성장을 보인 환자와 CsA를 복용한 경험이 없는 건강한 환자의 치은에서 explant culture로 분리하였다. 치은 섬유아세포의 CsA에 의한 증식률과 AZI에 의한 억제률은 MTT assay에 의해 측정하였고, 약물에 의한 치은 섬유아세포의 형태학적 변화를 광학 현미경을 이용하여 관찰하였다. 그리고 MMPs (matrix metalloproteinases)의 mRNA의 발현과 활성도는 각각 reverse transcription - polymerase chain reaction (RT-PCR)과 zymography로 조사하였다. 결과: CsA에 의한 세포의 증식률은 건강한 환자보다 CsA를 복용한 경험이 있는 환자로부터 분리한 치은 섬유아세포에서 뚜렷하게 증가되었다. 그러므로 이후의 연구는 CsA를 복용한 경험이 있는 환자의 치은 섬유아세포로 진행하였다. 120시간 동안 CsA (10ng/ml)와 AZI를 함께 처리한 경우, AZI의 농도에 비례하여 치은 섬유아세포의 증식률이 감소하였다. CsA에 의한 형태학적 변화는 관찰되지 않았지만, CsA와 AZI을 함께 처리했을 경우에는 타원형 모양으로 변화되었다. CsA를 처리한 치은 섬유아세포는 MMP-2의 mRNA 발현양과 활성도가 억제되었다. 그러나 AZI과 CsA를 함께 처리했을 경우에는 MMP-2의 mRNA 발현양은 CsA만 단독 처리한 경우와 비교하여 정상적으로 회복되었고, MMP-2와 MMP-9의 활성이 유도되었다. Membrane-type (MT)1 - MMP와 MT3 - MMP를 통해 latent MMP-2의 활성도를 억제한다고 보고된 testican 1은 CsA에 의해 mRNA의 발현이 많이 증가되었으나, AZI과 함께 처리한 치은 섬유아세포에서는 대조군과 비슷한 정도로 발현양이 감소되었다. 결론: AZI에 의한 세포증식 억제와 MMP-2의 활성도의 증가는 CsA에 의해 유도된 치은과성장을 억제하는데 중요하다. 핵심되는 말: cyclosporin A, azithromycin, 치은과성장, matrix metalloproteinase-2, testican 1 [영문]Cyclosporin A (CsA) is the most frequently used immunosuppressor in transplant surgery, but gingival overgrowth (GO) remains one of its adverse side effects. Many previous reports have demonstrated that GO can be effectively treated by azithromycin (AZI), a macrolide antibiotic of the azalide subclass that suppresses protein synthesis of both gram-positive and gram-negative aerobes. However, the mechanism by which AZI suppresses CsA-induced GO (CIGO) has not yet been elucidated. In the present study, we examined the inhibitory effect of AZI on CIGO and its mechanism of action, as well as the mechanism whereby CsA induces GO. Human gingival fibroblasts were isolated from the gingival tissues of healthy subjects and patients exhibiting CIGO. The cell proliferation was significantly increased by CsA exposure for 5 days in fibroblasts isolated from gingival tissue of patients taking CsA. In contrast, AZI significantly inhibited CsA-induced cell proliferation. Morphological alterations were observed in the gingival fibroblasts stimulated with CsA, AZI, or the combination of AZI and CsA. The mRNA level and activity of matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) were inhibited by CsA, but were increased by the combination of AZI and CsA. The activities of the latent and active forms of MMP-2 were increased by AZI in a dose-dependent manner. Interestingly, both the latent and active forms of MMP-9 were secreted from gingival fibroblasts exposed to the combination of AZI and CsA. The increased mRNA expression level of testican 1 in CsA-treated gingival fibroblasts was inhibited by the combination of AZI and CsA in a dose-dependent manner. Testican 1 has been known to inhibit pro-MMP-2 activation by membrane-type 1 (MT1)-MMP or MT3-MMP. These results suggest that AZI alters the synthesis degradation of the extracellular matrix (ECM) by regulating the expression of testican 1, which consequently mediates the activation of MMP-2. Therefore, the induction of MMP-2 by AZI treatment might play an important role in the inhibitory mechanism of AZI on CIGO. Key words : cyclosporin A, azithromycin, gingival overgrowth, matrix metalloproteinase-2, testican 1ope

PLK1에 의한 pericentrin 인산화가 중심립 유리현상에 미치는 영향 연구

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 생명과학부, 2013. 8. 이건수.중심체는 막이 없는 대표적인 세포소기관으로서, 세포분열기에 방추극으로 작용하여 방추사를 형성한다. 염색체 수 이상에 의해 발생되는 다극 방추체는 염색체불안정성 혹은 세포사멸을 일으킨다. 따라서, 정교한 중심체 수 조절기작은 세포가 자신의 유전물질을 안정적으로 딸세포에 전달해주는데 중요한 역할을 한다. 중심립 유리현상은 중심체의 수를 조절하는 핵심 기작으로 딸중심립이 모중심립에서 떨어지는 현상을 말한다. 또한 최근 연구결과에 따르면 separase에 의한 pericentrin의 절단이 중심립 유리현상을 일으키는 주요한 원인으로 밝혀졌다. 본 연구는 PLK1에 의해 조절되는 pericentrin 절단 기작에 대해 연구하였다. Pericentrin은 PLK1에 의해 2259번 및 2267번 아미노산이 인산화되며, 이 두 아미노산이 알라닌으로 치환된 돌연변이에서는 pericentrin의 절단 및 중심립 유리현상이 줄어듦을 관찰하였다. 이 결과는 PLK1이 중심립 유리현상을 pericentrin의 인산화를 통해 조절할 수 있음을 제안한다.Centrosome is a non-membrane bound organelle which functions as a spindle pole body during mitosis. Abnormalities in centrosome number cause multipolar spindles which result in chromosomal instability or cell death. Therefore the precise regulation of centrosome number is important for maintaining genome stability. During mitotic exit, procentrioles are disengaged from the mother centriole during mitotic exit, which is considered a licensing step for centriole duplication. It was recently reported that pericentrin cleavage is necessary and sufficient for centriole disengagement during mitosis. Here, I report that the pericentrin cleavage is regulated by PLK1. PLK1 phosphorylates S2259 and S2267 residues of pericentrin. FLAG-PCNT S2259A, S2267A in which these two residues are substituted to alanine is not cleaved during mitosis. Finally, centriole disengagement was inhibited in the pericentrin-depleted cells rescued with the phospho-resistant FLAG-PCNT mutants at S2259 and S2267. Based on the results, I propose that PLK1 phosphorylation is prerequisite to pericentrin cleavage and eventually to centriole disengagement during mitotic exit.ABSTRACT 1 CONTENTS 3 LIST OF FIGURES 5 INTRODUCTION 7 MATERIALS AND METHODS 9 DNA constructs and transfection 9 RNA interference 9 Cell culture and stable cell lines 10 Cell cycle synchronization and drug treatments 10 Antibodies 11 Immunofluorescence microscopy 11 Immunoblot analysis 12 RESULTS 13 The PLK1 activity is required for pericentrin cleavage during mitotic exit. 13 Specific phosphorylation of pericentrin is critical for its cleavage. 14 Phosphorylation at S2259 and S2267 residues is important for the pericentrin cleavage. 15 Specific phosphorylation of pericentrin is prerequisite to centriole disengagement during mitotic exit. 18 DISCUSSION 46 REFERENCES 48 ABSTRACT IN KOREAN(국문초록) 52Maste

차세대 시퀀싱을 이용한 위내 세균과 위암 발병의 관련성에 관한 연구

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 의과대학 의학과 분자유전체전공, 2016. 2. 김나영.Introduction: Little is known about the role of gastric microbiota except for Helicobacter pylori (HP) in human health and disease. We compared the differences of human gastric microbiota according to gastric cancer or control and HP infection status and assessed the role of bacteria other than HP. Materials and methods: Gastric microbiota of 63 antral mucosa, 18 corpus mucosa samples were analyzed by barcoded 454-pyrosequencing of the 16S rRNA gene. Antral samples were divided into the four subgroups based on HP positivity in pyrosequencing and presence of cancer. The analysis was focused on bacteria other than HP, especially, nitrosating or nitrate reducing bacteria (NB). The changes of NB in antral mucosa of 16 subjects were followed-up. Results: The number of NB other than HP (non-HP-NB) was two times higher in the cancer groups than control groups but it did not reach statistical significance. The number of non-HP-NB tends to increase over time, but this phenomenon was prevented by HP eradication in the HP-positive control group, but not in the HP-positive cancer group. Discussion: We found out HP plays more important role than other bacteria in the gastric carcinogenesis.1. Introduction 1 2. Materials and Methods 3 3. Results 10 4. Discussion 30 5. References 36 국문초록 41Docto