Identification of autoantibody to melanocytes and characterization of vitiligo antigen in vitiligo patients

의학과/석사[한글] 백반증(vitiligo)은 다양한 크기의 백색 탈색반을 특징으로 하는 피부의 색소이상증으로 병리 조직학적으로는 멜라닌세포의 파괴를 보이는 질환이다. 백반증의 원인을 설명하는 가설중 가장 유력한 가설의 하나로 생각되고 있는 자가면역설은 멜라닌세포에 대한 비 정상적인 면역기전에 의하여 멜라닌세포가 파괴되고 그 결과 백반증이 발생된다는 것으로 1980년대 이후 이에 대한 많은 연구결과들이 보고되었고, 최근에는 백반증 환자의 혈청내에 자가항체가 존재하며, 이들 자가항체는 멜라닌세포의 표면에 존재하는 특정 항원, 즉 백반증 항원(vitiligo antigen)과 특이하게 반응한다는 주장이 제기되고 있다. 그러나 이들 자가항체의 존재여부, 특이성, 백반증 환자에서의 빈도는 물론, 멜라닌세포 표면의 백반증 항원에 대해서도 기초적인 분자량조차 규명되지 않은 상태이다. 따라서 본 연구 에서는 백반증 환자의 혈청내에 멜라닌세포에 대한 자가항체가 존재하는지를 알아보고, 이들 자가항체와 반응하는 멜라닌세포 표면의 백반증 항원을 확인하고자 하였다. 정상인의 피부와 백반증 환자의 비병변 부위의 피부에서 분리 배양한 멜라닌세포에 정상 및 백반증 환자의 혈청을 반응시켜 간접면역형광법, 효소결합면역흡착검사상에서 혈청내 자가항체의 존재여부 및 특이성을 비교하고, 멜라닌세포의 표면 단백질에 대하여 SDS-전기영동과 Western blotting을 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 간접 면역형광검사에서 백반증 환자의 혈청은 정상 멜라닌세포 및 백반증 환자의 비병변 부위의 멜라닌세포 모두에서 정상 혈청에 비하여 강한 형광반응을 나타내었다. 2. 멜라닌세포에 대한 효소결합면역흡착검사에서 백반증 환자의 혈청은 정상 멜라닌 세포 및 백반증환자의 비병변 부위의 멜라닌 세포 모두에서 정상 혈청에 비하여 높은 흡광도를 나타내었다. 3. 악성 흑생종 세포주 및 섬유아세포에 대한 효소결합면역흡착검사에서는 백반증 환자의 혈청과 정상인의 혈청간의 의의 있는 차이를 관찰할 수 없었다. 4. 베체트병 또는 매독 환자의 혈청은 효소결합면역흡착검사에서 섬유아세포, IGR 3, 멜라닌 세포에 대하여 정상 혈청과 차이를 나타내지 않았다. 5. 효소결합면역흡착검사에서 항멜라닌세포 토끼혈청을 전처치함으로써 환자의 혈청과 멜라닌 세포간의 반응이 차단되었다. 6. 환자의 혈청내에 존재하는 자가항체의 역가는 면역억제제인 스테로이드 전신치료에 의하여 감소되었다. 7. SDS-전기영동에서 멜라닌 세포는 65kDa에 해당되는 부위에 특이한 band를 나타내었다. 8. Western blotting상에서 65kDa의 표면항원과 반응하는 혈청의 빈도는 백반증 환자의 경우 44.4%, 정상 혈청의 경우 7.1%로 관찰되었다. 9. Western blotting상에서 항멜라닌세포 토끼혈청을 전처치한 결과, 백반증 환자의 혈청과 65kDa의 표면항원과의 반응이 차단되었다. 이상의 결과로, 멜라닌세포 표면에서 65kDa의 분자량을 가진 단백질이 확인되었으며, 백반증 환자의 44.4%가 이 항원과 반응하는 자가항체를 가지고 있는 것으로 관찰되었다. [영문] Vitiligo is a common pigmentary disorder affecting approximately 1% of the population. It is characterized by depigmented macules or patches due to destruction of melanocytes. Although the exact cause of vitiligo is still unknown, it is suggersted that autoimmune mechanisms may be involved in its pathogenesis. Since the 1980's there have been many studies and reports on the autoimmune theory. Recently, it has been suggested that autoantibodies to specific antigens on the surface of melanocytes are present in the sera of vitiligo patients. However, it is not known whether these autoantibodies exist, whether they are specific for vitiligo patients, and what percentage of autoantibodies to melanocytes and changes associated with the autoantibodies during treatment. The specificity of the vitiligo antigen, the difference between normal and vitiligo melanocytes, and the exact molecular weight of the antigen are all unsolved areas demanding further research. To investigate the possible role of autoimmune mechanisms inthe development of vitiligo, this study was designed to verify the presence of autoantibodies in vitiligo patients, the vitiligo antigen from the surface of melanocytes, the specificity of autoantibodies and vitiligo antigen. The results are as follows. 1. By indirect immunofluorescent method, vitiligo sera showed more prominent fluorescence on the surface of melanocytes cultured from nomal and vitiligo patients than normal sera. 2. In live cell ELISA, vitiligo sera showed higher optical density on the surface of melanocytes cultured from normal and vitiligo patients than normal sera. When performed with malignant melanoma cell lines and fibroblasts, no significant difference was observed between normal and vitiligo sera. 3. In live cell ELISA, the sera of Behcet's disease and syphilis patients showed no significant difference between normal and vitiligo sera in the reaction to fibroblasts, 1GR 3 and melanocytes. 4. Pretreatment with antimelanocyte rabbit sera blocked the reaction between vitiligo sera and melanocytes in ELISA. 5. The antibody titers of vitiligo patients decreased following systemic treatments with steroids. 6. SDS-PAGE analysis of melanocytic lysates showed the presence of specific surface protein of 65kDa. 7. The incidence if vitiligo sera and normal sera blocked the reaction to 65kDa protein were 44.4% and 7.1% respectively. 8. Pretreatment with antimelanocyte rabbit sera blocked the reaction between vitiligo sera and 65kDa-surface antigen of melanocytes in Western blotting. In conclusion, a surface antigen of 65kDa was identified from melanocytes and 44.4% of the vitiligo sera showed positive reactions to this antigen.prohibitio

Isolation, cultivation, and identification of microvascular endothelial cells derived from rat lung

의학과/석사[한글] 혈관 내피 세포가 관여하는 것으로 알려진 동맥 경화, 당뇨병성 미세 혈관병증 등 여러 질환의 병리 기전과 종양의 혈행성 전이 과정 중 혈관 내피세포와 종양 세포간의 상호 작용기전등에 대해서는 많은 관심과 노력에도 불구하고 확실히 밝혀진 것이 없다. 이처럼 연구에 어려움이 따르는 가장 큰 이유는 혈관 내피세포를 시험관내에서 배양하기가 어렵 기 때문이며, 그 중에서도 특히 미세혈관 내피세포의 배양은 직경이 큰 혈관의 내피세포 에 비하여 배양 조건이 훨씬 까다롭다. 본 연구는 미세혈관 내피세포를 시험관 내얘서 배 양시킬 수 있는 방법을 정립하고 세포의 기질, 배지내 혈청의 유무등이 미세혈관 내피세 포의 증식에 미치는 영향을 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 백서의 폐에서 얻은 세포와 이식편들을 1 % 젤라틴으로 처치한 후 24 well 세포 배양판 에 분주하고 혈관 내피세포 증식 보강제 및 여러 발육 인자, 영양분등을 첨가한 무혈청 배지에서 배양하였다. 배양 7일에서 10일 사이에 다각형, 또는 조약돌 모양의세포들에 의 하여 단층이 형성되었다. 이들 세포는 서로 촘촘하게 결합된 양상을 보였으며 형태학적으 로 전형적인 미세혈관 내피세포의 특징을 나타내었다. 보다 정확한 동정을 위하여 혈관 내피세포에 특이한 factor VⅢ-related antigen의 유무를 면역 화학적 방법에 의하여 조 사한 결과, 양성을 보임으로써 배양된 세포가 미세혈관 내피세포임을 확인하였다. 세포의 기질이 미세혈관 내피세포의 시험관내 증식에 미치는 영향을 알아보고자 젤라틴처리 배 양판과 처리하지않은 배양판에서 각각 미세혈관 내피세포를 배양시켜 관찰한 결과, 젤라 틴으로 처리한 배양판애서 더 빠른 세포 증식속도를 보였으며, 젤라틴을 입히지 않은 세 포들은 factor VⅢ-related antigen 음성이었다. 한편 배지내 혈청의 유무와 미세혈관 내 피세포의 선택적 증식과의 관계를 관찰한 결과, 혈청이 포함된 배지을 사용한 경우에는 미세혈관 내피세포 대신에 섬유아세포로 생각되는 t[포의 증식이 관찰되었고, factorVⅢ- related antigen도 음성이었다. 즉, 미세혈관 내피세포의 선택적 증식을 위해서는 젤라틴 으로 처리된 배양판과 무혈청 배지의 사용이 필요함을 알 수 있었다. 무혈청 배지에 의하 여 일차 배양에서 단층을 형성한 미세혈관 내피세포의 이차 배양은 Oulbecco's modificat ion of Eagle's medium(DMEM)과 Ham's F l2 medium이 1:1로 혼합된, 20%의 우태아 혈청이 포함된 배지을 사용하였으며 배양 4일에서 5일 사이에 미세혈관 내피세포에 의한 단층이 형성되었다. [영문] Since the first reports of Jin vitro culture of vascular endothelium, most successes have been achieved with endothelial cells derived from large vessels such as human umbilical vein rind bovine aorta. Many authors have investigated adherence, chemotaxis, extravasation and intercellular interactions of various cell types, like neutrophils, lymphocytes, and tumor cells in contact with large vessel endothelial cells. However, it has become clear that there are many fundamental differences between microvascular endothelial cells and large vessel endothelial cells. Thus, the inferences that haute been made about the mechanisms of angiogenesis, inflammation, and tumor metastasis based on a study of large vessel endothelium may not be valid. In vitro culture of microvascular endothelium remains a difficult procedure because of the difficulty of obtaining pure population of micmvascular endothelial cell in primary cultures and the difficulty of satisfying their fastidious culture requiremcnt. In this report the isolation, cultivation, identification and growth pattern of microvascular endothlium from rat lunge arc described. Cells and explants derived from rat lungs were plated on 1% ge1atin coatod culture plate and cu1tured with serum-free media containing endothelial ce11 growth supplement, epidermal growth factor, insulin, hydrocortisone and so on. Five to seven days afar plating, cultured cells demonstated a homogencous population with features characteristic of cndothelium, namely they formed a monolayer of flats polygonal cells with round or oval nuclei contains several nucleoli. Identification of these cells was also performed by immunocytochemical method for factor VⅢ-related antigen and they expressed factor VⅢ-related antigen on virtually 100% of cells. Therefore, the cultured cells were identified as endothelial cells by their morphology and by positive stain for factor VⅢ-related antigen. Differences between gelatin coated culture plate and uncoatod culture plate in endothelial cell growth were evaluated. Cells plated on uncoated platic plate had a spindle shaped morphology and did not express factor VⅢ-related antigen. Serum-free media containing endothelial cell growth supplement and RPMI 1640 media supplemented with 10% fetal calf serum were also compared in primary culture. In contrast with serum-free media, cells cultured in serum-contains media showed fibroblast-like morphology, and these fibroblast-like cells did not express factor VⅢ-related antigen. These results suggest that a gelatin substratum and serum-free media containing endothelial cell growth supplement are necessary for the in vitro proliferation of microvascular endothelial cells. The cu1ture method and conditions outlined herr allows the proliferation of pure microvascular endothelial cells and may be useful for the studies of inflammation, angiogensis, metastanisms, and the role of microvascular endothlium in other pathologic states.restrictio

(The) burn-out syndrome of the doctors and nurses working in the emergency department.

병원행정학과/석사[한글] 이 연구는 종합병원 응급실에 근무하고 있는 의사와 간호사의 탈진 정도를 파악하고 이에 영향을 주는 요인을 개인적, 조직적, 클라이언트 측면에서 예측하고 이를 통해 탈진을 감소시킬 수 있는 방안을 모색하고자 한다. 이러한 연구 목적을 달성하기 위하여 서울에 있는 700병상 이상의 6개 대학병원 응급실에 종사하고 있는 의사와 간호사를 대상으로 2002년 4월 15일부터 15일간 구조화된 자기기입식 설문지를 이용하여 총 228명을 연구대상으로 하였다. 각 직종간 소진의 평균 차이를 분석하기 위해 T검정과 분산분석방법을 사용하였으며 독립변수와 탈진의 상관 관계를 측정하기 위하여 단순상관관계 분석을 하였다. 또한 탈진에 영향력을 주는 요인을 알아보기 위해 다중회귀분석을 실시하였다. 연구의 주요 결과는 다음과 같다. 첫째, 연구대상자는 탈진의 하위 차원 중 정서적 탈진이 가장 많았고, 클라이언트에 대한 비인간화, 개인적 성취감 감소 순이었다. 이러한 결과는 사람을 대상으로 업무를 하는 타직종의 사회복지사나 일반 간호사에 대한 연구 결과보다 높아 응급실 의사와 간호사가 경험하는 탈진 정도가 심각함을 알 수 있었다. 둘째, 전체 탈진에 영향을 주는 요인에 대한 분석결과 자아존중감이 낮을수록, 연령이 적을수록, 업무량이 많을수록, 보상에 대해 불만족할수록 클라이언트와의 관계가 나쁠수록, 탈진 경험을 많이 하였고 이 변수의 탈진에 대한 설명력은 54%로 높았다. 셋째, 의사보다는 간호사가 약간 더 탈진을 경험하게 되는데 자아존중감, 근무형태, 클라이언트와의 관계, 연령, 직원과의 관계, 보상 등이 원인이며 정서적 탈진은 간호사가, 클라이언트에 대한 비인간화는 의사가 더 경험하였다. 이 연구는 연구대상자의 주관적 답변에 의한 것으로 객관화하기에는 어느 정도 무리가 있으며 집단간에 표본수의 차이가 있어 해석하는데 한계가 있다. 그러나 이러한 제한점에도 불구하고 국내 응급실 의사와 간호사에 대한 탈진원인을 구명(究明)하는 연구가 미미한 실정에서 이 연구는 응급실 의료진의 탈진 요인을 알아보고 탈진을 예방하기 위한 기초 자료를 제시하였다는데에 연구의 의의가 있다. 본 연구 결과를 기초로 응급실 의사와 간호사의 탈진을 감소시키고 예방하기 위한 병원의 외적인 노력으로는 의료진이 적정 업무량을 담당할 수 있도록 인력과 제도 등이 개선되어야 할 것이며, 응급실 간호 업무의 질 향상을 위해 응급전문 간호사 제도를 활성화하고 법제화가 되어야 할 것으로 생각한다. 또한 내적으로는 응급실을 효율적이면서 쾌적한 근무환경에서 의사와 간호사간 관계를 원활히할 필요가 있으며, 응급실 근무형태를 개선하여 의료진의 만족도를 높이며 환자와 보호자들의 불만과 불안을 효과적으로 대처할 수 있도록 지속적인 교육과 동기부여가 필요하다고 본다. [영문] The purpose of this study was to find the factors affecting the burn out syndrome and its degree in terms of personal, organizational and clients characteristics, and then to find the ways to reduce or eliminate those factors. The 228 doctors and the nurses who worked at the emergency departments in 6 general hospitals with more than 1000 beds in Seoul were surveyed from April 15, 2002 for 15 days. A structured self-recording questionnaire was used; the t-test and anova was used to analyse the median difference between the occupation, and multiple regression was employed to find the factors affecting the burn-out syndrome. The summary of this research analysis is as follows: First, of several variables, the highest frequency of the burn-out was the emotional burn-out followed by lack in personal touch toward the patients, decrease in sense of personal achievement. These results indicate that the doctors and nurses in emergency departments experience higher degree of burn-out than the social workers and the nurses who work at other departments in heath care environment as other studies revealed. Second, the analysis of the total burn-out factors showed the lower self respect, younger age, heavier work load, higher dissatisfaction rate toward remuneration and not-so-smooth relationship with the patients and their relatives the higher burn out rate. These variables explained 54% of the total variables. Third, the nurses experienced more burn-out syndrome than the doctors. The degree of self-respect, work pattern, relationship with the clients, age and remuneration were the causes of the burn-out. The doctors recorded lack in personal touch toward the patients more, while the nurses more to emotional exhaustion. The limitations of this research are the subjective answers of the respondents to certain questions and differences in sample numbers of each hospital in which some reservation can be exercised in explaining statistical significance of the data, and generalizing the conclusion. Despite of its limitation, this research has its own merit as an unpreceded research in this field, and provision of the basic materialsto prevent and find causes of the burn-out syndrome among the doctors and nurses in the emergency departments. This study is to suggest to reorganize as follows for decreasing and preventing the burn-out of the doctors and the nurses in an emergency room. First, reducing the work load of the health care providers by reorganizing the man power management system; legalizing emergency clinical nurse specialist system; increasing satisfaction rate of the health care workers by improving work pattern at the emergency department, and finally Seventh, providing education and training to deal with the patients and their relatives'' dissatisfaction and anxiety.ope

고속 이동체에서 위성/지상 전송시스템을 위한 혼합형 복호 방식에 관한 연구

본 논문에서는 기존의 CRC 방식을 그대로 수용하되 오류능력 범위 한계에 들어오면 e-RS 복호기를 이용하여 복호하며, 오류 한계 범위를 벗어나면 삭제 시키지 않고 수신된 심볼 자체를 이용하여, RS 복호기를 이용하는 혼합형 복호 방식을 제안한다. 이는 삭제된 심볼의 개수가 오류 정정 능력을 벗어난다 할지라도 오류 없는 심볼이 삭제된 경우의 수가 있으므로, 삭제전의 수신 심볼을 이용하여 기존의 RS복호 방식을 이용하면 오류정정이 가능할 확률이 있다. 또한 기존의 표준안을 변형시키지 않으면서 적용 가능하므로 표준안 측면에서 보면 효율적이다. 또한 제안하는 방식을 사용하여 가우시안 채널환경과 Train interruption (TI)　채널환경에서 시뮬레이션을 통해 기존의 CRC 방식과 비교하였다. 또한 정확한 성능 분석을 위하여 제안한 부호화 방식에서 기차의 속도, virtual interleaver size, data rate 및 IP Packet 사이즈를 변화를 각 부호화 방식에 적용하여 시뮬레이션을 함으로써, 다양한 통신 환경에서 최적의 parameter를 도출하였다.그림 목차....................................................................................................ii 표 목차.......................................................................................................iii ABSTRACT................................................................................................iv 제 1 장 서론...............................................................................................1 제 2 장 규격서 분석...................................................................................3 제 2-1 절 DVB-H 규격서 분석.............................................................3 제 2-2 절 DVB-S2 규격서 분석..........................................................11 제 3 장 MPE-FEC 프레임 구성 및 복호 과정........................................12 제 3-1 절 CRC 기반 복호 방법...........................................................13 제 3-2 절 제안한 혼합형 복호방식.......................................................15 제 4 장 Train interruption (TI)　채널 모델링.........................................18 제 5 장 이동성 DVB-SSP에 적용할 수 있는 부호화 방식.....................21 제 5-1 절 Reed-Solomon 부호...........................................................21 제 5-2 절 Erasure Reed-Solomon 부호.............................................23 제 5-3 절 DVB-S2에 적용된 LDPC부호.............................................26 제 6 장 시뮬레이션 결과..........................................................................29 제 6-1 절 CRC 방식과 제안한 방식의 성능 비교................................29 제 6-2 절 TI 채널에서 혼합형 복호 방식 성능...................................30 제 7 장 결 론...........................................................................................37 참고문헌....................................................................................................3

Effects of retinal illuminance on visual acuity and fusion.

의과학사업단/석사[한글] 양안시 기능에 영향을 주는 요인으로는 망막에 맺히는 상의 크기와 선명도, 밝기의 차이 등이 있으며 본 연구는 상의 밝기 변화에 따른 시력과 융합의 변화를 관찰하여 상의 밝기 또는 망막의 조도 변화가 양안시 기능에 어떤 영향을 주는지 알아보고자 하였다. 양안시 기능이 정상인 성인에서 양안의 최대 교정시력과 대약시경을 이용한 최소 크기의 융합 능력을 측정한 후 중성필터 (Neutral density filter)를 이용하여 양안의 망막조도를 단계적으로 감소시킬 때에 최대교정시력과, 좌안에만 중성필터를 착용한 후 양안의 최소크기의 융합 능력을 측정하였다. 양안시 기능이 정상인 50명 100안을 대상으로 하였고 평균 연령은 31.9세였다. 중성필터를 0.1 ND (80%투과율)부터 1.0 ND(10%투과율)까지 단계적으로 착용하여 검사한 결과, 최대 교정시력과 융합능력은 중성필터를 착용하지 않은 상태와 차이가 없었으나 2.0 ND(1%투과율)에서는 최대 교정시력과 융합 능력이 의미있게 저하되었다(P＜0.01). 이러한 실험의 결과 망막의 조도 변화가 2.0 ND 이상에서 의미있게 시력과 융합에 영향을 줌 (P＜0.01)으로 90% 이하의 빛의 차단은 시력과 융합에 영향을 주지 않는 것으로 나타났으며, 심한 조도의 감소시에는 시력과 융합이 같이 감소되었다. 향후 양안시 기능에 영향을 주는 다른 요인에 대해서도 지속적인 연구가 필요하며 이러한 연구를 통해 약시의 예방과 조기 진단에 도움이 될 것이다. [영문] The normal binocular vision is known to be affected by interocular differences in retinal image size (aniseikonia), clarity (anisometropia), brightness. We examined the effects of induced retinal illuminance on visual acuity and fusion. Fifty adults, whose best corrected visual acuity were 20/20 or better with normal binocularity and fusion by major amblyoscope, were examined. Twenty eight subjects were men and twenty two subjects were women. The mean age was 31.9 years. To examine the effect of retinal illuminance on visual acuity and fusion, we used neutral density filter from 0.1 ND to 4.0 ND. While neutral density filter values were increased, we examined the best corrected visual acuity and least size fusion slide by major amblyoscope. The best corrected visual acuity and level of fusion were decreased significantly when monocular retinal illuminance was reduced to 2.0 ND (p<0.01, p<0.01, respectively) . Although the visual acuity and fusion was equally influenced by retinal illuminance, the effect on fusion was more prominent under large decrease of retinal illuminance. Further study will be needed in order to fully evaluate the influences of other factors on binocular fusion, and these studies will be of help for prevention and early detection of amblyopia.ope

The formation of ROK-US mutual security pact: control of alliance dilemma through institutionalization of alliance

학위논문(석사) --서울대학교 대학원 :외교학과,2009.2.Maste

사진 찍기를 통한 환경교육의 실행연구

학위논문(석사)--서울대학교 대학원 :협동과정 환경교육 전공,2003.Maste