苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)几丁质酶的分离纯化及酶学性质

以苏云金芽胞杆菌为材料 ,通过硫酸铵沉淀分级分离、DEAE - 32离子交换柱层析初步纯化 ,获得比活力为15 0 .5Umg-1的酶制剂 .研究酶催化胶体几丁质水解的反应时间和酶量对酶活力的关系 ,探讨酶催化胶体几丁质的最适条件 .温度和 pH对酶活力的影响和酶的热稳定性及酸碱稳定性的结果表明 :酶催化胶体几丁质水解的的最适pH为 5 .6、最适温度为 5 8℃ .该酶在pH 4 .5～ 6 .5区域稳定 ,而在pH >8能很快失活 ;在 5 5℃以下处理 30min ,酶活力保持不变 ;高于 5 5℃ ,酶快速失活 .图 5参 1

有机溶剂对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)几丁质酶的影响

　以苏云金芽孢杆菌(Bt)的发酵液为材料,经硫酸铵分级分离、DEAE-32离子交换柱层析分离,获得部分纯化的Bt几丁质酶(EC3. 2. 1. 14)制剂.研究了几种有机溶剂对Bt几丁质酶的影响.结果表明,甲醇、丙三醇、甲醛和戊二醛对几丁质酶有抑制作用;乙醇、丙醇、乙二醇和二甲亚砜在低浓度时对酶有激活作用,随着浓度的升高表现出抑制作用;二氧六环的浓度低于 5%时,对酶的影响不明显,而高于 5%时,对酶则有激活作用;丙酮对酶有激活作用. 图 1参 1

间充质干细胞对B细胞增殖及免疫调节功能的影响

【目的】研究观察间充质干细胞（MSC）在体外培养体系对B细胞增殖和免疫调节作用的影响。【方法】采用密度梯度离心法分离健康捐献者来源的骨髓30mL。用含100mmol/L胎牛血清的L-DMEM培养基对分离出的MSC进行贴壁培养。培养至第6代时，进行多向分化和细胞表型鉴定。获取健康供者外周血单个核细胞，并通过流式细胞仪分选出CD19+B细胞，进行荧光染料CFSE标记，然后分成单独培养组（CD19+B细胞）和共培养组（按CD19+B∶MSC：=5∶1的比例共培养），两组均采用CpG+CD40L刺激，96h后检测B细胞的增殖情况，并通过流式细胞荧光分选技术（FACS）检测CD19+CD5+B细胞的百分比及其分泌的IL-10水平；进一步观察单独培养组和共培养组的CD19+B细胞对CD4+T细胞增殖以及分泌IFN-γ的影响，最后加入IL-10中和抗体，再次验证B细胞对CD4+T细胞增殖以及分泌IFN-γ的影响。【结果】健康捐献者来源的MSC具有多向分化能力，并表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166，不表达CD45和CD34。与单独培养组比较，共培养组中的CD19+B细胞与MSC在体外共培养3d后，CD19+B细胞增殖比例明显提高，并显著抑制CD4+T细胞分泌IFN-γ的功能。进一步分析CD19+B细胞的亚群，发现与单独培养组比较，共培养组中的CD5+B细胞数量的百分比由（21.31±1.22）%增加至（31.27±0.92）%（P=0.014）；而且其IL-10的分泌水平由（1.09±0.08）%增加至（2.44±0.06）%（P<0.001）。当在共培养组中加入IL-10中和抗体后，发现与MSC共培养的B细胞抑制CD4+T细胞增殖和分泌IFN-γ的功能的能力明显减弱。【结论】MSC能促进CD19+B细胞的增殖，同时具有增强CD19+B细胞抑制CD4+T细胞分泌IFN-γ，这可能与分泌IL-10的CD19+CD5+B细胞的表达增加相关

雌性大鼠性早熟对糖脂代谢的影响

目的探究雌性大鼠性早熟对糖代谢和脂代谢的影响。方法将60只两天龄的雌性大鼠随机分为性早熟组和正常组两组，分别在5天龄时给予达那唑（300 μg/只）或溶剂大豆油进行皮下注射，从21天龄起每天观察大鼠的阴道开口状况。建模成功的两组按照阴道开口顺序分别于阴道开口后3 d、7周龄和12周龄进行处死，处死前空腹12 h。方法测量麻醉后的体重和鼻肛长，通过酶联免疫吸附试验测量葡萄糖、胰岛素、血脂、雌二醇、瘦素和脂联素的浓度，病理切片观察肾周脂肪、子宫和卵巢的变化。结果通过正常组和早熟组两组3个时间点对比，早熟组在阴道开口3 d时体质量和鼻肛长小于正常组，但是不影响后续生长发育，7周龄和12周龄时两组体质量和鼻肛长差异无统计学意义。两组的胰岛素浓度对比在阴道开口后3天内有统计学意义（P = 0.001），早熟组存在高胰岛素血症，且早熟组此时的肾周脂肪细胞增多，在7和12周龄差异无统计学意义，两组3个时间点的雌二醇、瘦素和脂联素浓度差异均无统计学意义，两组卵巢和子宫与体质量的比重差异无统计学意义。结论通过两组大鼠的对比，性早熟使机体提前跨越发育的时间窗，不能适应内环境的骤变，产生的一系列变化只是暂时性且可逆性，至成年期会恢复

塞克硝唑片治疗滴虫阴道炎的随机对照多中心临床研究

【目的】评价口服塞克硝唑片治疗滴虫阴道炎的有效性和安全性。【方法】采用多中心、随机双盲、平行对照设计，入选滴虫阴道炎患者144例，塞克硝唑片组与替硝唑片组各72例，对其临床疗效和滴虫清除率进行比较，并观察用药后不良事件和实验室检查异常的发生情况。【结果】用药后塞克硝唑片组痊愈率和有效率分别为61％和94％；替硝唑片组痊愈率和有效率分别为51％和94％，两组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。塞克硝唑片组滴虫清除率为96％；替硝唑片组滴虫清除率为97％，两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。144例病例中无不良事件与严重不良事件发生；塞克硝唑片组实验室检查异常发生率为0，替硝唑片组实验室检查异常发生率为4％，两组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。【结论】口服塞克硝唑片治疗滴虫阴道炎安全、有效

城乡链接与农民合作

2009-2010 > Academic research: refereed > Publication in refereed journalVersion of RecordPublishe