知母皂苷元对体外培养皮层神经元树突发育的影响及信号转导机制

目的探讨知母皂苷元(Sarsasapogenin,SAR)对大脑皮层神经元树突发育的促进作用及其信号转导机制。方法选用出生0～24 h的Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠,取皮层神经元进行体外细胞培养,4 d后用于实验。倒置相差显微镜测量培养神经元树突分支总长度(TDBL)、一级树突数目(PDN)、最大分支级数(MBO)和神经元胞体面积。West-ern blot法观察神经元p-PDK1、p-Akt473及p-mTOR蛋白表达。结果形态学观察结果显示SAR(10、30、100μmol.L-1)可明显促进树突发育,表现为树突分支总长度增加、一级树突数目增多、最大分支级数增大及胞体面积增大,并呈明显浓度依赖。SAR 30+LY组、SAR 30+TCBN组、SAR 30+Rapa组的神经元树突总长度、一级树突数目、最大分支级数及胞体面积较SAR30μmol.L-1组明显降低。Westernblot结果显示SAR 30也可明显增加p-PDK1、p-Akt473及p-mTOR蛋白表达水平。SAR 30+LY组明显降低神经元p-PDK1、p-Akt473及p-mTOR的蛋白表达水平。SAR 30+TCBN组明显降低神经元p-Akt473及p-mTOR的蛋白表达水平。SAR 30+Rapa组明显降低神经元p-mTOR的蛋白表达水平。结论 SAR对体外培养皮层神经元树突的发育有促进作用,这种作用可能与PI3K/Akt/mTOR信号转导通路有关