一种适合针刺活检样品的蛋白质组学分析方法(英文)

针刺活检样品是一种重要的临床组织样品,其蕴涵的蛋白质信息,对了解人类疾病极为重要.然而,由于该样品的体积极小,其研究受到很大限制.本文建立和优化了适合针刺活检样品的基于双向电泳的蛋白质组学分析平台:通过直接抽提获得针刺活检组织的蛋白质样品;用24cm固定梯度干胶条(pH3-10NL)等电聚焦及12.5%SDS-PAGE分离获得蛋白质样品;感兴趣的蛋白质点经过胰酶酶解后用MALDITOF/TOF质谱分析.运用所建立的平台对3例来自3只不同大鼠的肝脏针刺活检样品进行分析,获得了多于2500个蛋白质点的高重复性的二维凝胶银染图谱.应用该方法分析人前列腺针刺活检样品的蛋白质组,同样获得了高质量、高重复性的结果.其中随机选取的包括低丰度点在内的57个蛋白质点,经胰酶酶解后进行MALDI串联质谱分析,均获得了高确定性的鉴定结果.通过建立针刺活检样品的蛋白质组学分析方法,为研究人类疾病的分子机制提供了必要的前提保障

固定化克鲁维酵母Y-179外切菊粉酶的研究

鹰嘴豆孢克鲁维酵母（Kluveromyces cicerisporus Y-179）分泌的糖基化菊粉外切酶经高碘酸钠氧化其分子表面的糖链产生醛基，再共价结合于氨基型固定化载体ZH-HA上，固定化酶活力达到4000U／g湿载体。所制备的固定化酶在pH3．5和70℃温度下表现出最大反应活性，该固定化酶pH稳定性和热稳定性较游离酶明显提高。固定化酶在分批式反应器中重复水解菊粉50批次，活力没有明显损失，表现出良好的工作稳定性

固定化克鲁维酵母Y-179外切菊粉酶的研究

鹰嘴豆孢克鲁维酵母（Kluveromyces cicerisporus Y-179）分泌的糖基化菊粉外切酶经高碘酸钠氧化其分子表面的糖链产生醛基，再共价结合于氨基型固定化载体ZH-HA上，固定化酶活力达到4000U／g湿载体。所制备的固定化酶在pH3．5和70℃温度下表现出最大反应活性，该固定化酶pH稳定性和热稳定性较游离酶明显提高。固定化酶在分批式反应器中重复水解菊粉50批次，活力没有明显损失，表现出良好的工作稳定性