两种戊型肝炎IgG抗体检测试剂的比较

目的比较2种国产戊型肝炎IgG抗体诊断试剂(E2-IgG和X-IgG)的特异性与敏感度。方法利用2种试剂对2006年江苏省某市普通人群的流行病调查血清标本460份和经过巢式逆转录聚合酶链式反应(nest-RT-PCR)鉴定为HEV核酸阳性的临床戊型肝炎患者血清标本72份进行平行检测,并以免疫印迹实验(Westernblot,WB)和中和单抗阻断试验进行验证。结果1.460份流行病调查血清标本中WB阳性188份。2.188份WB阳性标本中E2-IgG的检测敏感度为99.5,特异度为99.6,阳性预测值99.5,阴性预测值99.6,准确性99.6;X-IgG的检测敏感度为21.3,特异度为97.4,阳性预测值85.1,阴性预测值64.1,准确性66.3。3.E2-IgG阴、阳性A450/A620值的分布在临界值附近分界明显,小于临界值的A450/A620值取对数后呈正态分布,而阳性血清A450/A620值的高低与其WB的反应强度正相关。4.E2-IgG阳性、X-IgG阴性的血清共148份,中和单抗阻断阳性率为98,WB阳性率99.3。5.经PCR鉴定为HEV核酸阳性的急性戊型肝炎患者血清中E2-IgG敏感度98.6,X-IgG敏感度80.6(χ2=10.7,P<0.01)。结论E2-IgG在不同人群中均能较好的反映体内戊型肝炎抗体存在的真实情况

传染性非典型肺炎病毒核蛋白的表达与活性检测

用PCR方法,人工合成传染性非典型肺炎病毒(SARS-CoV)核蛋白(N)全编码基因,并构建原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达。结果重组N蛋白表达产量占菌体总蛋白的40％以上,主要以可溶形式存在。用SARS患者急性期血清进行蛋白印迹检测,表明可溶形式和包含体形式均有明显活性。包含体形式的重组蛋白经纯化后纯度可达90％以上,活性与纯化前相当,可作为SARS抗体诊断试剂盒的抗原原料

一种定量检测人血清高敏C反应蛋白的化学发光免疫方法

旨在建立一种可定量检测人血清高敏CRP的化学发光检测方法(High-sensitivity C-reactive protein quantifiable chemiluminescent immunoassay,hs-CRP CLIA)。首先利用亲和层析和离子交换层析技术从肝硬化病人腹水中纯化出高纯度的天然CRP作为免疫原制备了22株CRP单克隆抗体(单抗),其中13株单抗在磷酸胆碱配体捕获ELISA中呈阳性,然后利用方正滴定法筛选出单抗10C5和10C11建立了hs-CRP CLIA。试剂盒评估结果显示:该方法对血清中干扰物质IgG、血红蛋白、甘油三酯等无非特异性反应;该方法检测灵敏度高,在0.04~20.38mg/L范围内定量检测人血清CRP标准品呈良好线性关系(R2>0.993);该方法准确性高、可重复性好,平均回收率为99%,批内差为4.2%~5.8%,批间差为9.0%~11.5%;该方法与进口商品化高敏CRP ELISA试剂盒平行比较检测90份血清标本,结果显示两者有良好的可比性(r=0.968)。综上,建立的hs-CRP CLIA是一种准确、可靠、可定量的高灵敏C反应蛋白检测方法,该方法的临床应用,有利于改善我国心脏病风险评估及肠炎性疾病预后判断

戊型肝炎诊断中血清学及核酸检测意义的研究

目的 利用恒河猴感染模型评估血清学检测和核酸检测在戊型肝炎诊断中的临床意义。 方法对86只戊型肝炎病毒(HEV)实验感染猴的系列血清和粪便标本,用反转录聚合酶链反应方法进行病毒学检测,用4种酶联免疫吸附抗体检测试剂(E2-IgM,E2-IgG,GL-IgG和YES-IgG)进行血清学检测。 结果 感染猴均产生E2-IgG抗体,除1只感染猴未检出粪便排毒和E2—IgM外,其余感染猴均出现粪便排毒和E2-IgM阳转。GL-IgG和YES-IgG的阳转率较低,而且与感染剂量相关。急性肝炎主要开始于感染后3～7周内。病毒学指标在潜伏早期即已出现,较疾病的发生约早2周,并在急性期迅速下降。E2-IgM在发病时已有约2/3阳转,并在发病后10周内完全转阴。E2—IgG几乎与E2—IgM同时阳转,在所有感染猴中持续存在,直至86周后仍无阴转。GL-IgG和YES-IgG抗体较E2抗体晚约1周,在感染后20周内已有过半数转阴。结论 E2-IgM是一个良好的戊型肝炎急性感染诊断指标,E2-IgG是一个良好的戊型肝炎既往感染诊断指标,GL-IgG和YES-IgG抗体的阳转或双份血清滴度升高可以作为辅助诊断指标,病毒核酸检测仅在发病的极早期具有诊断价值

戊型肝炎病毒中和性单克隆抗体的鉴定

阻断实验发现,用戊型肝炎病毒(HEV)衣壳蛋白重组抗原制备的8株抗HEV单克隆抗体(mAb),分别识别3个构象表位和2个线性表位。用抗体捕获反转录PCR方法证实,其中识别2个构象表位的3个mAb可以直接捕获HEV颗粒,表明这2个表位位于HEV颗粒的外表面。识别这两个表位的mAb8C11和8H3均可中和HEV对恒河猴的致病性和感染性。mAb8C11缩短排毒时间的效应较明显,而mAb8H3延迟机体抗HEV抗体阳转时间的效应较明显。二者的中和效应具有较明显的协同作用。中和单抗8C11、8H3对戊肝不同感染时期的血清均有显著阻断作用,Fab片段的阻断作用与完整抗体类似,表明这两个mAb对应的中和表位是HEV体液免疫应答的优势表位

中国超大城市空气污染和人体健康 (APHH-Beijing) 中英联合研究计划 最终报告

Chinese versio

PATHOGENICITY AND GENETIC DIVERSITY OF ALTERNARIA ALTERNATA STRAINS

对分离自紫茎泽兰的19个链格孢菌菌株的致病性进行了比较研究,并对这19个菌株和其它来源的3个菌株的5.8SrDNA及其两侧的ITS1区和ITS2区进行了序列分析.结果显示,链格孢菌菌株的致病性差异明显;21株链格孢菌菌株在5.8SrDNA及其两侧的转录间区(ITS区)的序列无差异,而与百日草链格孢菌(Alternariazinniae)的序列差异显著,表明21株链格孢菌菌株属种内变异.采用AFLP分子标记技术对21株链格孢菌的DNA扩增片段长度多态性进行了分析,结果表明,链格孢菌自然变异群体内存在很高的遗传多样性.链格孢菌菌株的相似性与菌株的地理来源有一定的相关性,但基于AFLP标记划分的AFLP类群与基于寄主病情指数划分的致病力类群间关系不相一致;起始菌株与变异菌株相似性显著,但二者和致病性的关系不显著.图2表1参18The pathogenicity of 19 strains of Alternaria alternata isolated from Eupatorium adenophorum was studied. 5.8S rDNA, ITS1 and ITS2 sequences of 22 strains from crofton weed and other plants were analyzed. The results showed that there were differences in their pathogenicity to crofton weed. The sequence analysis showed that there was no difference among 21 strains in 5.8S rDNA, ITS1 and ITS2 sequences, respectively, but the significant difference occurred between all the 21 A. alternata strains and A. zinniae. This indicated that the variance of all the 21 different strains of A. alternata was interspecific. Amplified fragment length polymorphisms (AFLP) were first used to analyze the DNA diversity of the 21 A. alternata strains. The result showed that there was a very high genetic diversity among natural and variable populations. There were some correlations between genetic similarity and geographical sources of A. alternata. The groups classified based on AFLP patterns were not associated with pathogenicity. Ancestry strains had high similarity with their original ones on genetics, but not on pathogenicity. Fig 2, Tab 1, Ref 18国家"863"项目(2001AA246012);; 国家自然科学基金(No.30170619);; 国家基础研究专项("973"项目,2002CB111402);; 江苏省自然科学基金(BK2001066);; 江苏省博士后基金8590课题资助~

The karyotypes of Plectorhinchus cinctus

1 引言 一位著名的遗传学家说过,地球的历史记载于地壳中,而生物的历史却记载在染色体上,染色体作为遗传信息的载体具有种的特异性,不同的物种有其特定的染色体组型,在很大程度上染色体的组型反映了物种的进化历史和种间的亲缘关系。因此,染色体组型研究成为细胞遗传学上一个不可缺少的部分,对种质资源的研究来说,更具有极其重要的意义。本文以我国沿海常见的经济鱼类花尾胡椒鲷为研究对象,分析了它的组型

一种波浪能装置的两点系泊特性分析

以鹰式二号波浪能装置浅水系泊为背景,研究波浪能装置两点系泊限位下的系泊受力特性以及系泊环境对其影响规律。通过采用Newman近似方法与全QTF方法计算系泊受力,分析Newman近似方法的适应性;通过改变频率、有义波高、预张力、系泊链径等环境条件研究系泊受力变化情况。研究表明:浅水情况下,Newman近似方法计算系泊受力与全QTF方法计算结果差异随频率的增加而增大,高频下Newman计算结果失真;对于来波功率恒定的不规则波,随谱峰周期的减小及有义波高的增大系泊受力增大;对于相同系泊条件,随着预张力的增加,系泊受力缓慢增加;随着系泊链径的增加,系泊刚度变大,系泊受力先增大到极值后迅速变小,当系泊链径足够大时,波频运动受到限制,低频运动引起的系泊受力占主导作用