高效体积排阻色谱法定量检测口蹄疫疫苗中146s的疫苗预处理方法

旨在建立一种口蹄疫灭活病毒疫苗的处理方法,去除尺寸排阻色谱法(HPSEC)检测146S抗原过程中的杂质干扰,获得最佳的检测信号并实现146S抗原含量的准确测定。分别考察了超速离心法、PEG沉淀法、核酸酶消化法对两批疫苗样品中的HPSEC检测干扰杂质的去除效果。在优化条件下,超速离心法处理后146S检测结果分别为7.1、7.6 μg/mL,PEG沉淀法为9.7、10.4 μg/mL;酶消化法处理后的检测值最高,分别为10.5、10.4 μg/mL,且杂质去除完全、处理速度快、操作条件温和。通过响应面法确定最优酶消化处理条件如下:200 μL水相中添加终浓度421 U/mL的Benzonase,25.1 ℃下反应1.29 h。在该最优条件下,对4家企业各3种不同血清型共12批疫苗样品进行146S含量检测,结果表明建立的方法对不同疫苗均有良好适用性,且重复性好(RSD<5.3%,n=3)。通过该处理方法,解决了杂质对146S定量检测的干扰,扩大了HPSEC检测技术的应用范围,进一步确保了检测结果的准确可靠

高效体积排阻色谱法定量检测口蹄疫疫苗中146s的疫苗预处理方法

旨在建立一种口蹄疫灭活病毒疫苗的处理方法,去除尺寸排阻色谱法(HPSEC)检测146S抗原过程中的杂质干扰,获得最佳的检测信号并实现146S抗原含量的准确测定。分别考察了超速离心法、PEG沉淀法、核酸酶消化法对两批疫苗样品中的HPSEC检测干扰杂质的去除效果。在优化条件下,超速离心法处理后146S检测结果分别为7.1、7.6 μg/mL,PEG沉淀法为9.7、10.4 μg/mL;酶消化法处理后的检测值最高,分别为10.5、10.4 μg/mL,且杂质去除完全、处理速度快、操作条件温和。通过响应面法确定最优酶消化处理条件如下:200 μL水相中添加终浓度421 U/mL的Benzonase,25.1 ℃下反应1.29 h。在该最优条件下,对4家企业各3种不同血清型共12批疫苗样品进行146S含量检测,结果表明建立的方法对不同疫苗均有良好适用性,且重复性好(RSD<5.3%,n=3)。通过该处理方法,解决了杂质对146S定量检测的干扰,扩大了HPSEC检测技术的应用范围,进一步确保了检测结果的准确可靠

应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量

旨在应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量。使用TSKgel G4000SWXL(7.8 mm&times;30 cm)色谱柱,以pH 7.2的缓冲盐体系作为流动相,流速为0.6 mL/min,进样量为100&mu;L,检测波长为259 nm。以口蹄疫病毒(O型)灭活146S抗原纯化样品建立标准曲线;使用灭活抗原液配制3份口蹄疫灭活疫苗,并进行精密度、重复性、特异性、耐受性验证;应用该方法快速测定16批疫苗的146S含量。结果表明,抗原浓度在0.56&ndash;67.42&mu;g/mL范围内,其峰面积与浓度的线性关系良好(R~2=0.996,n=10),3份疫苗146S抗原测定回收率分别为93.6%(RSD=2.7%,n=3)、102.3%(RSD=2.6%,n=3)、95.5%(RSD=5.1%,n=3),方法重复性好、准确性强(RSD=0.5%,n=6),且操作简便、高效,对16批疫苗的测定结果较理想。应用该方法有望快速高效地检测口蹄疫灭活疫苗的146S抗原含量,为疫苗的质量控制提供有力支持。</p

应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量

旨在应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量。使用TSKgel G4000SWXL（7.8 mm×30 cm）色谱柱,以pH 7.2的缓冲盐体系作为流动相,流速为0.6 mL/min,进样量为100μL,检测波长为259 nm。以口蹄疫病毒（O型）灭活146S抗原纯化样品建立标准曲线;使用灭活抗原液配制3份口蹄疫灭活疫苗,并进行精密度、重复性、特异性、耐受性验证;应用该方法快速测定16批疫苗的146S含量。结果表明,抗原浓度在0.56–67.42μg/mL范围内,其峰面积与浓度的线性关系良好（R^2=0.996,n=10）,3份疫苗146S抗原测定回收率分别为93.6%（RSD=2.7%,n=3）、102.3%（RSD=2.6%,n=3）、95.5%（RSD=5.1%,n=3）,方法重复性好、准确性强（RSD=0.5%,n=6）,且操作简便、高效,对16批疫苗的测定结果较理想。应用该方法有望快速高效地检测口蹄疫灭活疫苗的146S抗原含量,为疫苗的质量控制提供有力支持

河南省大骨节病区及非病区人体硒及蛋白质的营养状态

有学者报道,我国大骨节病的地理分布呈现一条从东北到西南走向的病带,并证实了该病带为一缺硒地带。河南省大骨节病区都集中分布在我省西部丘陵地带和山区,正处在我国病带范围之内。根据地球化学生态学理论认为,环境的景观地球化学特征必定会对该环境中的生物机体产生相应的生物效应。因此由于环境的缺硒及生活条件的单一化和古老化,也必然会

应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量

旨在应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量。使用TSKgel G4000SWXL（7.8 mm×30 cm）色谱柱,以pH 7.2的缓冲盐体系作为流动相,流速为0.6 mL/min,进样量为100μL,检测波长为259 nm。以口蹄疫病毒（O型）灭活146S抗原纯化样品建立标准曲线;使用灭活抗原液配制3份口蹄疫灭活疫苗,并进行精密度、重复性、特异性、耐受性验证;应用该方法快速测定16批疫苗的146S含量。结果表明,抗原浓度在0.56–67.42μg/mL范围内,其峰面积与浓度的线性关系良好（R^2=0.996,n=10）,3份疫苗146S抗原测定回收率分别为93.6%（RSD=2.7%,n=3）、102.3%（RSD=2.6%,n=3）、95.5%（RSD=5.1%,n=3）,方法重复性好、准确性强（RSD=0.5%,n=6）,且操作简便、高效,对16批疫苗的测定结果较理想。应用该方法有望快速高效地检测口蹄疫灭活疫苗的146S抗原含量,为疫苗的质量控制提供有力支持

灭活口蹄疫病毒粒子146S抗原标准品的稳定性考察

目的考察灭活口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)粒子146S抗原标准品的稳定性。方法采用高效液相体积排阻色谱法(size-exclusion high-performance liquid chromatography,SE-HPLC)检测灭活FMDV粒子146S抗原标准品在不同保存条件下(-80及4 ℃保存0 ~ 180 d;4 ℃振荡保存0 ~ 7 d;-80 ℃保存0 ~ 150 d,每30 d冻融1次,共5次)的抗原含量变化,采用直线拟合法对监测数据进行统计学分析,考察稳定性。结果获得溯源146S抗原标准品标准曲线方程为y = 65 010 x-29 389,R~2 = 0.998 8;不同保存条件下的灭活FMDV粒子146S抗原标准品含量变化分析显示,-80 ℃保存0 ~ 180 d、4 ℃振荡保存0 ~ 7 d、-80 ℃反复冻融5次,拟合直线方程分别为y =-0.159 5 x + 63.215、y =-0.079 1 x + 63.697和y =-0.635 7 x + 63.881,| β1 |均 t0.95,(n-2)·s(β1),斜率显著,观测到不稳定性。结论制备的灭活FMDV粒子146S抗原标准品于-80 ℃条件下能满足长期贮存和冻融使用,于4 ℃条件下能满足短期冷藏运输。本文为146S抗原标准品的研制提供了技术数据支持

灭活口蹄疫病毒粒子146S抗原标准品的稳定性考察

目的考察灭活口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)粒子146S抗原标准品的稳定性。方法采用高效液相体积排阻色谱法(size-exclusion high-performance liquid chromatography,SE-HPLC)检测灭活FMDV粒子146S抗原标准品在不同保存条件下(-80及4 ℃保存0 ~ 180 d;4 ℃振荡保存0 ~ 7 d;-80 ℃保存0 ~ 150 d,每30 d冻融1次,共5次)的抗原含量变化,采用直线拟合法对监测数据进行统计学分析,考察稳定性。结果获得溯源146S抗原标准品标准曲线方程为y = 65 010 x-29 389,R~2 = 0.998 8;不同保存条件下的灭活FMDV粒子146S抗原标准品含量变化分析显示,-80 ℃保存0 ~ 180 d、4 ℃振荡保存0 ~ 7 d、-80 ℃反复冻融5次,拟合直线方程分别为y =-0.159 5 x + 63.215、y =-0.079 1 x + 63.697和y =-0.635 7 x + 63.881,| β1 |均 t0.95,(n-2)·s(β1),斜率显著,观测到不稳定性。结论制备的灭活FMDV粒子146S抗原标准品于-80 ℃条件下能满足长期贮存和冻融使用,于4 ℃条件下能满足短期冷藏运输。本文为146S抗原标准品的研制提供了技术数据支持