Tgf-b and a specific tgf-b inhibitor regulate pericentrin b and myh9 in glioma cell lines

Los gliomas malignos son tumores vasculares heterogéneos altamente invasivos. El factor de transformación de creci­miento P (TGF-P) es una citoquina multifuncional que es expresada por gliomas de grado III /IV y promueve angiogenesis de tumores, invasión y escape inmunológico. Recientemente se demostró que una pequeña molécula inhibidora (SB-431542) del receptor de TGF-P tipo I (TGF-P-RI), bloquea la señal de transducción mediada por TGF-P, la inducción del factor angiogénico de expresión y la movilidad celular. Ya que las líneas celulares de gliomas mues­tran sensitividad diferencial a TGF-P, se esperaba que también mostrarían impacto diferencial por el bloqueo de la señal de TGF-p. En el presente trabajo se usó un análisis diferencial en gel (DIGE, por sus siglas en inglés: Differential in gel electrophoresis) y espectrometría de masas para determinar los efectos sobre regulación de proteínas por TGF-(3 y SB-431542 en células de gliomas humanos. Se encontró que pericentrina B y miosina no muscular fueron expresa­das diferencialmente en fragmentos, los cuales pueden ser el resultado de la activación de proteasas por el mecanismo de crecimiento del tumor. Estos resultados sugieren que tanto pericentrina B como miosina no muscular, podrían ser usadas como bio-marcadores potenciales de gliomas. Palabras clave: DIGE, proteomica, glioma, TGF-P, espectrometría de masas, miosina no muscular, pericentrina B.Malignant gliomas are heterogeneous, highly invasive vascular tumours. The multifunctional cytokine, transforming growth factor-beta (TGF-P), is expressed by grade III/IV gliomas and promotes tumour angiogenesis, invasión and immune escape. It has been shown previously that a small TGF-P receptor type I (TGF-(3-RI) molecule inhibitor (SB-431542) blocks TGF-(3-mediated signal transduction, induction of angiogenic factor expression and cellular motility. As glioma cell lines display differential sensitivity to TGF-P, it was expected that they would also be differentially impacted by disruption of TGF-P signalling. Differential in gel expression (DIGE) analysis and mass spectrometry was used in this work for determining protein regulation effects of both TGF-P and SB-431542 on human glioma cell lines. It was found that pericentrin B and non muscle myosin were differentially expressed in fragments which likely resulted from protease activation by the tumour growth mechanism. These results suggest that both pericentrin B and non-muscle myosin might be potential glioma biomarkers. Key words: DIGE, proteomics, glioma, TGF-P, mass spectrometry, non muscle myosin, pericentrin B

SOFISTICACIÓN EPISTEMOLÓGICA Y MODELIZACIÓN ARTEFACTUAL: EL CASO DE LA TEORÍA DE LA EVOLUCIÓN

Esta investigación en curso tiene como propósito central comprender cómo interactúan la Modelización Artefactual y laSofisticación epistemológica en el aprendizaje de la Teoría de la Evolución Biológica de las especies. Con relación a los aspectosmetodológicos proponemos un estudio mixto con predominancia cualitativa con estudiantes de básica secundaria, para comprender las interacciones que ejercen la intención y la conciencia sobre los modelos de los estudiantes. Se espera con el trabajo, generar principios teóricos y metodológicos para la construcción de un modelo de aprendizaje de la Biología que haga uso de la transposición del enfoque artefactual de la modelización propuesto enlafilosofía de la ciencia a la didáctica de las ciencias

La sofisticación epistemológica como dinamizadora de la evolución de los modelos mentales artefactuales: el caso de la Teoría de la Evolución Biológica de las especies

Esta investigación en curso, tiene como propósito central comprender cómo interactúan la Modelización Multidimensional Artefactual y la Sofisticación epistemológica en el aprendizaje de la Teoría de la Evolución Biológica de las especies (en adelante TEB). Con relación a los aspectos metodológicos proponemos un estudio mixto con predominancia cualitativa con estudiantes de 9º de una institución educativa pública, para comprender las interacciones que ejercen la intención y la conciencia sobre cada una de las dimensiones del aprendizaje (modelos explicativos, lenguaje y razonamiento abductivo) estudiadas en la presente investigación. Se espera con el trabajo, generar principios teóricos y metodológicos para la construcción de un modelo de aprendizaje de la Biología que haga uso de la transposición del enfoque artefactual de la modelización propuesto en filosofía de la ciencia a la didáctica de las ciencias

Preferential Protection of Domains II and III of Bacillus thuringiensis Cry1Aa Toxin by Brush Border Membrane Vesicles

The surface exposed Leucine 371 on loop 2 of domain II, in Cry1Aa toxin, was mutated to Lysine to generate the trypsin-sensitive mutant, L371K. Upon trypsin digestion L371K is cleaved into approximately 37 and 26 kDa fragments. These are separable on SDS-PAGE, but remain as a single molecule of 65 kDa upon purification by liquid chromatography. The larger fragment is domain I and a portion of domain II (amino acid residues 1 to 371). The smaller 26-kDa polypeptide is the remainder of domain II and domain III (amino acids 372 to 609). When the mutant toxin was treated with high dose of M. sexta gut juice both fragments were degraded. However, when incubated with M. sexta BBMV, the 26 kDa fragment (domains II and III) was preferentially protected from gut juice proteases. As previously reported, wild type Cry1Aa toxin was also protected against degradation by gut juice proteases when incubated with M. sexta BBMV. On the contrary, when mouse BBMV was added to the reaction mixture neither Cry1Aa nor L371K toxins showed resistance to M. sexta gut juice proteases and were degraded. Since the whole Cry1Aa toxin and most of the domain II and domain III of L371K are protected from proteases in the presence of BBMV of the target insect, we suggest that the insertion of the toxin into the membrane is complex and involves all three domains.La superficie de la toxina Cry1Aa, en el asa 2 del dominio II contiene expuesta la leucina 371, la cual fue modificada a lisina produciendo una mutante sensible a la tripsina, L371K. Esta mutante produce dos fragmentos de 37 y 26 kDa por acción de la tripsina que son separables por SDS-PAGE, pero que a la purificación por cromatografía líquida se mantienen como una sola molécula de 65 kDa. El fragmento grande contiene al dominio I y una parte del dominio II (aminoácidos 1 al 371). El polipéptido de 26 kDa contiene la parte restante del dominio II y dominio III (aminoácidos 372 al 609). Cuando la toxina mutante fue tratada con dosis altas de jugo intestinal de Manduca sexta, ambos fragmentos fueron degradados. Sin embargo, cuando fueron incubados en VMBC de M. sexta, el fragmento de 26 kDa fue protegido preferencialmente de las proteasas intestinales. Como se ha reportado, la toxina silvestre Cry1Aa también es protegida de la degradación de las proteasas cuando es incubada en VMBC de M. sexta. Sin embargo, cuando se adicionó VMBC de ratón a la mezcla de reacción, ni la toxina Cry1Aa ni la mutante L371K mostraron resistencia a las proteasas y fueron degradadas. Dado que la toxina completa de Cry1Aa y casi todo de los dominios II y III de L371K están protegidos de proteasas en presencia de VMBC del insecto, este estudio sugiere que la inserción de la toxina en la membrana involucra los tres dominios

Uso de la herramienta tecnológica JClic para fomentar las habilidades de comprensión lectora mediante el trabajo colaborativo y el estudio de casos en los estudiantes de grado sexto del colegio Santo Tomás de Aquino.

Este proyecto se centra en el proceso investigativo llevado a cabo en el colegio Santo Tomás de Aquino, específicamente con el curso 602 que consistió en la implementación de diferentes actividades por medio del software JClic buscando reforzar los aspectos relacionados con los tres niveles de lectura (literal – inferencial – crítico) y mejorar los niveles de comprensión lectora de los estudiantes que integran dicho grupo. A su vez, se realizó la propuesta como tal, en aras de generar un mayor interés por la lectura y mostrarles a los estudiantes como las TIC o los diferentes recursos digitales pueden integrarse con las distintas áreas del conocimiento. La utilización de esta herramienta permitió identificar además una mejora en los niveles de lectura, literal, inferencial y crítico. En el primero, por la facilidad con la que los estudiantes comprendieron conceptos y características de diferentes oraciones al interior de los textos; así, como la capacidad para realizar conexión con sus presaberes. En el segundo, por la destreza con la que lograron identificar situaciones de causa y efecto que estaban implícitas en los textos. En el tercero, por la habilidad con la que pudieron extraer la intención del autor, asumiendo una postura crítica respecto al mensaje de los textos para sus vidas.MaestríaMagíster en Recursos Digitales Aplicados a la Educació

Uso de la herramienta tecnológica JClic para fomentar las habilidades de comprensión lectora mediante el trabajo colaborativo y el estudio de casos en los estudiantes de grado sexto del colegio Santo Tomás de Aquino.

Este proyecto se centra en el proceso investigativo llevado a cabo en el colegio Santo Tomás de Aquino, específicamente con el curso 602 que consistió en la implementación de diferentes actividades por medio del software JClic buscando reforzar los aspectos relacionados con los tres niveles de lectura (literal – inferencial – crítico) y mejorar los niveles de comprensión lectora de los estudiantes que integran dicho grupo. A su vez, se realizó la propuesta como tal, en aras de generar un mayor interés por la lectura y mostrarles a los estudiantes como las TIC o los diferentes recursos digitales pueden integrarse con las distintas áreas del conocimiento. La utilización de esta herramienta permitió identificar además una mejora en los niveles de lectura, literal, inferencial y crítico. En el primero, por la facilidad con la que los estudiantes comprendieron conceptos y características de diferentes oraciones al interior de los textos; así, como la capacidad para realizar conexión con sus presaberes. En el segundo, por la destreza con la que lograron identificar situaciones de causa y efecto que estaban implícitas en los textos. En el tercero, por la habilidad con la que pudieron extraer la intención del autor, asumiendo una postura crítica respecto al mensaje de los textos para sus vidas.MaestríaMagíster en Recursos Digitales Aplicados a la Educació

TGF-b y un inhibidor específico de TGF-b regulan pericentrina B y MYH9 en células de glioma

Los gliomas malignos son tumores vasculares heterogéneos altamente invasivos. El factor de transformación de creci­miento P (TGF-P) es una citoquina multifuncional que es expresada por gliomas de grado III /IV y promueve angiogenesis de tumores, invasión y escape inmunológico. Recientemente se demostró que una pequeña molécula inhibidora (SB-431542) del receptor de TGF-P tipo I (TGF-P-RI), bloquea la señal de transducción mediada por TGF-P, la inducción del factor angiogénico de expresión y la movilidad celular. Ya que las líneas celulares de gliomas mues­tran sensitividad diferencial a TGF-P, se esperaba que también mostrarían impacto diferencial por el bloqueo de la señal de TGF-p. En el presente trabajo se usó un análisis diferencial en gel (DIGE, por sus siglas en inglés: Differential in gel electrophoresis) y espectrometría de masas para determinar los efectos sobre regulación de proteínas por TGF-(3 y SB-431542 en células de gliomas humanos. Se encontró que pericentrina B y miosina no muscular fueron expresa­das diferencialmente en fragmentos, los cuales pueden ser el resultado de la activación de proteasas por el mecanismo de crecimiento del tumor. Estos resultados sugieren que tanto pericentrina B como miosina no muscular, podrían ser usadas como bio-marcadores potenciales de gliomas. Palabras clave: DIGE, proteomica, glioma, TGF-P, espectrometría de masas, miosina no muscular, pericentrina B