Uncommon pathogen in small animal practice: a case of dog splenitis caused by Clostridium novyi type B

Abstract

Clostridium novyi тип Б је Грам-позитивна, спорогена и облигатно анаеробна бактерија која узрокује обољење под називом инфективни некротични хепатитис (black disease, енгл.) код фармских животиња, посебно оваца и говеда. Обољења изазвана овом бактеријом код паса су изузетно ретка и везана су за инфекцију јетре. Ова студија описује први документовани случај спленитиса узрокованог бактеријом C. novyi тип Б код пса. Пас са симптомима спленитиса (апатија, анорексија, повраћање, грозница, тахикардија, тахипнеја и болан стомак на палпацију) примљен је у ветеринарску клинику, где је, након ултразвучне дијагностике изразите спленомегалије, извршена спленектомија, а уклоњена слезина послата је на микробиолошки преглед. Након инкубације у анаеробним условима на крвном агару израсле су бета-хемолитичне колоније неправилног облика, а бојењем по Грам-у доказано је присуство Грам-позитивних спорогених штапића. Биохемијском идентификацијом помоћу BBL Crystal ANR ID кита доказан је C. novyi са прецизношћу од 92%. Употребом multiplex PCR методе доказано је присуство fliC гена пореклом од C. novyi тип Б, а секвенцирање по Сангеру потврдило је C. novyi тип Б са 99,53% сличности са референтним сојевима. Додатна потврда идентификације извршена је филогенетском анализом, а добијена секвенца депонована је у банку гена (GenBank, идентификациони број: PP393674). Методом диск-дифузије није потврђена резистенција на испитиване антибиотике. Овај случај наглашава значај молекуларних техника, посебно PCR-а и секвенцирања, у дијагностици ретких бактеријских патогена. Имајући у виду врло ограничен број документованих инфекција C. novyi тип Б код паса, овај приказ случаја пружа важне информације о клиничкој слици, дијагнози и епидемиологији поменутог узрочника. Потребна су додатна истраживања како би се открили потенцијални предиспонирајући фактори и улога C. novyi у развоју спленитиса код паса.Clostridium novyi type B is a Gram-positive, spore-forming, and obligatory anaerobic bacterium known to cause infectious necrotic hepatitis (black disease) in large animals, particularly sheep and cattle. However, its occurrence in dogs is extremely rare and is primarily associated with liver infections. This report presents the first documented case of splenitis caused by C. novyi type B in a dog. A dog with symptoms of splenitis (apathy, anorexia, vomiting, fever, tachycardia, tachypnea, and abdominal pain on palpation) was admitted to a veterinary clinic. Аfter ultrasound diagnostics revealed marked splenomegaly, a splenectomy was performed, and the removed spleen was sent for microbiological examination. Anaerobic culture on blood agar revealed colonies with irregular shapes and beta-hemolysis and Gram staining confirmed the presence of Gram-positive rods with endospores. Biochemical identification using the BBL Crystal ANR ID kit indicated C. novyi with 92% identity. Multiplex PCR targeting the fliC gene and subsequent Sanger sequencing confirmed the isolate as C. novyi type B with 99.53% similarity to reference strains. Phylogenetic analysis supported the identification, with the sequence deposited in GenBank (accession number PP393674). Antimicrobial susceptibility testing showed no resistance to tested antibiotics. This case highlights the diagnostic value of molecular techniques, particularly PCR and sequencing, for identifying rare bacterial pathogens. Given the low number of documented C. novyi type B infections in dogs, this report contributes valuable insights into its clinical presentation, diagnosis, and epidemiology. Further research is needed to discover potential risk factors, predisposing conditions, and the role of C. novyi in canine splenitis.Zbornik kratkih sadržaj