Modelling an XRF method for determining gilding thickness in silver cultural heritage objects without sample collection: case studies on 16th century Portuguese silverware

In situ X-ray fluorescence is a non-invasive technique that is widely used in historical objects, namely in pieces of gilded silver, to determine the composition of the alloy and gilding. In the case of gilded silver, fire gilding was a mercury-based historical technique that is no longer practiced. Moreover, with traditional XRF analysis is possible to determine the thickness of the gilding by using given intensity ratios of the characteristic lines of silver. However, this requires the analysis of the substrate, for the calculation of the intensity ratio without gilding, which is not always accessible. This study presents and validates a methodology for the calculation of the thickness of fire gilding silver pieces using XRF analysis with a commercial spectrometer and without the need to analyse the isolated substrate. Six silver alloy mock-up samples were produced following historical techniques and generic intensity ratio for K? and K? lines of silver in the alloy was calculated (6.35 ± 0.05), to be used in any alloy with a silver composition over 75 %. Since attenuation of the silver's characteristic lines depends on the gilding composition, different Hg concentrations (5 %–20 %) were tested. The results obtained with this approach for the mock-ups was compared with SEM-EDS measurements for gauging uncertainty and the methodology was then applied to three pieces of 16th century Portuguese silverware. This adaptation of previously established principles, proved to be effective to calculate the thickness of fire gilding on silver and was validated to be applied, in situ, in real museum artworks without the need for sample collection

New mRNA - nanoemulsions vaccine platform: application for Tuberculosis vaccine development

Background: Tuberculosis (TB) is a deadly infectious disease caused by the airborne bacterium Mycobacterium Tuberculosis (M.tb), killing 1.6 million people every year, especially in low- and middle-income countries. The only licensed TB vaccine, a live attenuated strain of M. bovis (BCG), has variable efficacy, does not prevent transmission and is not safe in immunocompromised patients, particularly AIDS patients, who are at high risk of developing TB disease. Thus, the development of an efficient, safe and cost-effective tuberculosis vaccine remains a research priority. mRNA vaccine technology, which proved its potential during the COVID-19 pandemic, could represent a valuable alternative to conventional vaccines against TB. Objectives: We aim to establish a novel vaccine platform against TB, combining antigen identification by immunopeptidomics, mRNA design and production using advanced techniques, and a patented technology of lipid nanoemulsion (NE) adapted to efficiently deliver mRNA to target cells. Methods: Using a prototype mRNA encoding the fluorescent protein EGFP, we assessed in vitro the safety and transfection efficiency of different NE formulations on human alveolar basal epithelial cells (A549) and primary human monocyte-derived macrophages and dendritic cells. Results: Here we show that NEs can efficiently deliver mRNA to different cell types without significant cytotoxicity, and the formulation can be tailored to increase uptake by specific cells relevant for vaccination applications. Conclusion: Lipid NEs appear to be safe, easily adaptable and efficient transporters for mRNA. We will use selected NE formulations as carriers for mRNA vaccine candidates encoding relevant antigenic peptides from M.tb and other Mycobacterium species. Safety and immunogenicity studies will be performed in mice and the vaccination schedule will be optimized to generate a sustained humoral and cellular immune response against TB. This vaccine platform could be adapted to develop vaccines against other infectious diseases, particularly to quickly respond to emerging pathogens.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Peer feedback : modelo de avaliação e desenvolvimento de competências metacognitivas nos estudantes de enfermagem : contributos para a supervisão clínica

Em resposta às elevadas expectativas da sociedade, as Instituições de Ensino Superior (IES) deparam-se com a necessidade permanente de desenvolverem mecanismos que garantam a aquisição pelos estudantes de competências que permitam uma adequada integração na vida ativa, em resposta aos contextos profissionais em permanente mudança. Sendo o estudante o elemento central e nuclear no processo de ensino, aprendizagem e avaliação, torna-se necessário e fundamental refletir e analisar os processos educativos ao nível do ensino superior com vista a desenvolver e implementar um conjunto de métodos e estratégias que favoreçam o papel ativo do estudante para que possa autorregular o processo de aprendizagem. Neste sentido, o peer feedback no ensino superior tem sido definido como um dos métodos colaborativos onde o estudante assume um papel dinâmico, quer nos processos de ensino, aprendizagem, quer de avaliação, favorecendo o desenvolvimento de competências. Neste estudo, pretende-se aprender e analisar um modelo pedagógico com recurso ao peer feedback, pedagogicamente sustentado e que potencie a participação ativa do estudante quer na aprendizagem, quer na avaliação, identificando os contributos no desenvolvimento de competências metacognitivas nos estudantes de enfermagem em ensino clínico. Trata-se de um estudo de caso construtivista com recurso a multi- métodos em duas fases distintas: Fase 1 (F1) – Desenvolver e Modelar, relativos aos resultantes do 1o e 2o ciclos da Pesquisa-ação Participativa - PaP, seguida da Fase 2 (F2) – Validade/Viabilidade, relativos ao estudo quasi-experimental (Antes e Depois) de forma a validar os requisitos do modelo, a recetividade e possível compliance ao modelo pelos docentes e estudantes. Este estudo realizou-se nos anos de 2018 a 2021, numa Escola Superior de Saúde da Região Norte de Portugal Continental, integrando as unidades curriculares de Ensino Clínico dos 3o e 4o anos, do 1o Ciclo de Estudos do Curso de Licencatura em Enfermagem. O estudo integra os estudantes e docentes/supervisores clínicos das unidades curriculares em análise. Os resultados obtidos permitem apresentar um modelo de avaliação dos estudantes de enfermagem em ensino clínico, com recurso ao peer feedback, relevantes para o seu exercício profissional futuro, com foco nos mecanismos de autoconhecimento, autorreflexão e autorregulação, de comunicação e relação interpessoal promotores do trabalho em equipa. Foram identificadas características requeridas na implementação do peer feedback das quais se destacam a capacitação de estudantes e docentes/supervisores clínicos, e a “Guideline de Implementação: Peer feedback” enquanto recurso de suporte e apoio. Foi ainda evidente o envolvimento das estruturas cientifico-pedagógicas na orientação para políticas educativas alinhadas com o paradigma de ensino centrado no estudante, através de um elevado grau de compromisso da comunidade académica na implementação do modelo. Em síntese, evidencia-se que a adoção de um modelo centrado no estudante e no seu processo de aprendizagem e avaliação na formação de enfermagem em contexto clínico, favorece um percurso académico de sucesso, possibilita o alinhamento das metodologias pedagógicas com os referenciais nacionais e internacionais na garantia da qualidade do ensino superior, e contribui de forma significativa para o conhecimento em enfermagem.In response to society's high expectations, Higher Education Institutions (HEIs) are faced with the permanent need to develop mechanisms that guarantee the acquisition by students of skills that allow an adequate integration into active life, in response to professional contexts in permanent change. Since the student is the central and core element in the teaching, learning and assessment process, it is necessary and fundamental to reflect and analyze the educational processes at the higher education level in order to develop and implement a set of methods and strategies that promote the active role of student's in order to self-regulate the learning process. In this sense, peer feedback in higher education has been defined as one of the collaborative methods in which the student assumes a dynamic role, whether in the teaching, learning or assessment processes, favoring the development of competences. In this study, we intend to learn and analyze a pedagogical model using peer feedback, pedagogically supported and that enhances the active participation of the student in both learning and assessment, identifying the contributions to the development of metacognitive skills in nursing students in clinical training context. This is a constructivist case study using multi-methods in two distinct phases: Phase 1 (F1) – Develop and Model, related to the results of the 1st and 2nd cycles of Participatory Action Research - PaP, followed by Phase 2 (F2) – Validity/Viability, related to the quasi-experimental study (Before and After) in order to validate the model requirements, receptivity and possible compliance with the model by teachers and students. This study was carried out in the years 2018 to 2021, at a Health Higher School in North of Portugal, integranting the curricular units of Clinical Training at 3rd and 4th years of the 1st Cycle of Studies of the Nursing Degree. The study integrates students and clinical professors/supervisors of the curricular units under analysis. The results obtained allow us to present a model of assessment for nursing students in clinical training, using peer feedback, relevant to their future professional practice, focusing on the mechanisms of self-knowledge, self-reflection and self-regulation, communication and interpersonal relationship promoters of teamwork. Characteristics required in the implementation of peer feedback were identified, including the capacity buinding training of students and professors/ clinical supervisors, and the “Implementation Guide: Peer feedback” as a support and support resource. It was also evident the involvement of scientific-pedagogical structures in guiding educational policies in line with the student-centered teaching paradigm, through a high level of commitment from the academic community in the implementation of the model. In summary, it is evident that the adoption of a model centered on the student and on his/her learning and assessment process in nursing training in a clinical context, promotes a successful academic path, allows the alignment of pedagogical methodologies with national and international references of quality assurance in higher education, and contributes significantly to nursing knowledge

A (in)explicável falta de protecção dos sócios minoritário aquando da derrogação por fusão nas OPA's obrigatórias

A presente dissertação foca-se no regime da oferta pública de aquisição obrigatória estabelecido nos artigos 187.º e ss. do Código dos Valores Mobiliários. Após uma densificação dos pressupostos de aplicação do dever de lançamento da OPA, é feita uma análise dos fundamentos do dever de lançamento da OPA apontados pela doutrina, bem como um balanço aos princípios enunciados pela Diretiva 2004/25/CE. No seguimento, procedeu-se a uma análise dos mecanismos de afastamento do dever de lançamento da OPA obrigatória, com especial enfoque na derrogação do dever aquando da aquisição do domínio e ultrapassagem dos limiares estabelecidos no art. 187.º do CVM resultantes da fusão de sociedades. Por fim, é realizada uma análise crítica a essa mesma derrogação, com o objetivo de concluir pela conformidade – ou inconformidade – da mesma para com os objetivos da OPA obrigatória e princípios enunciados na Diretiva 2004/25/CE

Formalização de um sistema de controlo de gestão numa PME no setor do transporte de mercadorias : estudo de caso da Transportes Matos

Kaplan e Norton (Kaplan & Norton, 2008) conceberam o modelo Execution Premium como uma abordagem que integra diversas ferramentas estratégicas e operacionais, garantindo o alinhamento entre a estratégia e as operações dentro das organizações, simultaneamente facilitando a execução estratégica e o planeamento, culminando na excelência operacional ao longo de um processo de seis etapas. O presente trabalho, teve como objetivo descrever as ferramentas de controlo de gestão utilizadas pela Transportes Matos & Filhos, S.A, e proceder a sugestão de implementação de um modelo Execution Premium, tendo em consideração as características da empresa. Para responder à questão de investigação foi adotado o método estudo de caso, concebido com recurso a entrevistas informais, a documentos internos e informação pública. Com a análise efetuada foi possível perceber que não existe uma estratégia formal implementada na empresa. No entanto, já estão em vigor várias ferramentas de controlo de gestão que permitem orientar os comportamentos dos colaboradores. Neste contexto, através da sugestão implementação de um Execution Premium, acreditamos ser possível formalizar um sistema que integre todas as ferramentas estratégicas e operacionais, bem como garantir o alinhamento dos colaboradores da Transportes Matos & Filhos, S.A.Kaplan and Norton (Kaplan & Norton, 2008) conceived the Execution Premium model as an approach that integrates various strategic and operational tools, ensuring alignment between strategy and operations within organizations, while simultaneously facilitating strategic execution and planning, culminating in operational excellence over a six-step process. The present study aimed to describe the management control tools used by Transportes Matos & Filhos, S.A., and to suggest the implementation of an Execution Premium model, considering the characteristics of the company. To address the research question, a case study method was adopted, utilizing informal interviews, internal documents, and public information. Through the analysis conducted, it was possible to perceive that there is no formal strategy implemented in the company. However, several management control tools are already in place, allowing for the guidance of employee behaviors. In this context, through the suggested implementation of an Execution Premium, we believe it is possible to formalize a system that integrates all strategic and operational tools, as well as ensuring alignment of Transportes Matos & Filhos, S.A. employees

Comparative studies of different signal acquisition systems in microfluidic paper-based analytical devices developed for accurate point-of-care analysis

The exponential growth of small, on-hand devices/sensors has been aligned with the increasing use of smartphones as detectors. However, smartphone detection may result in high variability of signal acquisition, due to differences in lighting conditions, consequently compromising accurate and reliable quantification. The use of smartphones for qualitative assessment (“yes/no” response) has been widely employed; however, their use in quantitative assessment has been less reported. For point of care (POC) analysis, the use of smartphones as detectors can be an exceptional advantage; however, it is crucial to ensure that the accuracy of the analysis is not compromised. A critical and structured evaluation of image acquisition systems was performed to evaluate the impact on POC biomarkers quantification with microfluidic paper-based devices (?PADs). Different image acquisition systems were tested for a ?PAD to properly evaluate the impact of lighting conditions when using a smartphone in a specially designed box. The decrease in intensity counts was about 30% from the scanner to the smartphone, but it did not affect the calculated absorbance. We proved that smartphones can be used as reliable detection systems, providing accurate and precise quantification when appropriate attention is given to exterior lighting conditions. When quantifying iodide and nitrite in a sample, a relative error of 5% was observed for both image-acquiring systems, a scanner and a smartphone

Family policy transformation in Portugal : assessing its relation to female labour market participation and gender equality

Family policies play a crucial role in society as they influence several aspects of it, including social reproduction activities, women’s employment and gender equality. While there has been a notable shift in societal attitudes towards women's roles in both the workplace and the family, persistent gender inequalities highlight the need for additional or alternative transformations in family policies to achieve social justice for all women. The main purpose of this dissertation is to assess whether the policy transformations identified by Ferragina (2022) and its effects on female employment and gender equality have happened in the Portuguese case. To achieve this, Ferragina’s analysis was recreated and updated with the latest data available and other relevant information, namely about unpaid work, was also added to the analysis. This dissertation concludes that the major policy transformation identified by Ferragina (2022) have happened in the Portuguese case and, also, that the family policy transformations in Portugal seem to have contributed to an increase in female employment and also a reduction in the gaps between women and men, as Ferragina (2022) had established. Disparities, however, have not disappeared.As políticas de família desempenham um papel crucial na sociedade uma vez que influenciam vários aspetos da mesma, incluindo as atividades de reprodução social, a empregabilidade da mulher e a igualdade de género. Embora tenha havido uma mudança notável nas atitudes da sociedade em relação aos papéis das mulheres, no local de trabalho e na família, as desigualdades de género destacam a necessidade de transformações adicionais ou alternativas nas políticas de família para alcançar a justiça social para todas as mulheres. O objetivo principal desta dissertação é avaliar se as transformações políticas identificadas por Ferragina (2022) e os respetivos efeitos na empregabilidade feminina e igualdade de género aconteceram no caso português. Para tal, a análise de Ferragina (2022) foi recriada e atualizada com os dados disponíveis mais recentes e outra informação relevante, nomeadamente sobre trabalho não remunerado, foi adicionada à análise. Esta dissertação conclui que as principais transformações políticas identificadas por Ferragina (2022) aconteceram, de facto, no caso português e que as transformações das políticas da família em Portugal contribuíram para um aumento da empregabilidade feminina e também para uma redução das disparidades entre mulheres e homens, tal como Ferragina (2022) havia estabelecido. No entanto, as disparidades não desapareceram

O papel da inteligência artificial na mitigação de viés cognitivo na tomada de decisão gerencial : uma análise qualitativa

The rapid development in integrating artificial intelligence (AI) into decision-making processes within organizations generated a wider interest in its potential to improve managerial decision quality by minimizing the effect of cognitive biases on the outcome. This thesis explores how AI tools can reduce the impact of two biases that are present in this context: confirmation bias and availability bias. Through the insights of 12 interviews with professionals working across different industries, the study provides a deep analysis of the effectiveness and limitations of AI in debiasing organizational decisions. The findings show that AI shows high potential in challenging availability bias through its ability to make data-driven decisions, its potential to minimize the effect of confirmation bias is still highly dependent on an effective human-AI collaboration. Furthermore, the study reveals several challenges connected to the process, such as over-reliance on AI advice, data quality concerns, and the impact of AI being not sufficiently aligned with organizational objectives. This research provides recommendations for managers who utilize AI to leverage its capabilities while maintaining a balance between AI-driven insights and human judgment.O rápido desenvolvimento da integração da inteligência artificial (IA) nos processos de tomada de decisão nas organizações gerou um maior interesse em seu potencial para melhorar a qualidade das decisões gerenciais, minimizando o efeito dos vieses cognitivos nos resultados. Esta tese explora como as ferramentas de IA podem reduzir o impacto de dois vieses presentes neste contexto: o viés de confirmação e o viés de disponibilidade. Através de insights obtidos em 12 entrevistas com profissionais de diferentes indústrias, o estudo fornece uma análise profunda da eficácia e das limitações da IA na mitigação dos vieses nas decisões organizacionais. Os resultados mostram que a IA demonstra um grande potencial para desafiar o viés de disponibilidade através de sua capacidade de tomar decisões baseadas em dados, mas seu potencial para minimizar o efeito do viés de confirmação ainda depende fortemente de uma colaboração eficaz entre humanos e IA. Além disso, o estudo revela uma série de desafios associados ao processo, como a dependência excessiva dos conselhos da IA, preocupações com a qualidade dos dados e o impacto de a IA não estar suficientemente alinhada com os objetivos organizacionais. Esta pesquisa fornece recomendações para gestores que utilizam IA para aproveitar suas capacidades enquanto mantêm um equilíbrio entre os insights fornecidos pela IA e o julgamento humano

Measurement of the impact of antibiotic resistance discharge in wastewater and in soil : ecological aspects

Antibiotic resistance represents a serious threat to human health and a relevant environmental contaminant. Antibiotic-resistant bacteria (ARB) and harboured antibiotic resistance genes (ARGs) were described in different settings, mainly in clinical contexts, but also in wastewater treatment plants or agricultural soil. In the environment, the general pollution context may favour the persistence or proliferation of ARB due to multiple genetic characteristics. Monitoring of ARGs and ARB in the environment plays an important role in unveiling sources and paths of dissemination. To address these issues this thesis explored three topics based on antibiotic resistant Pseudomonas aeruginosa and on soil: i) the biases that may be imposed by the high limits of quantification of ARGs in soil; ii) the survival of an exogenous ubiquitous bacterial strain (blaVIM+ P. aeruginosa) in soil and the possible effects of metal salts; and iii) the inferred interplay between phylogeny and accessory genome in distinct genotypes of carbapenem resistance (blaVIM+ or blaNDM+ P. aeruginosa). The first work (chapter 3) aimed to assess the limit of quantification (LOQ) for ARGs (vanA, qnrS, blaTEM, blaOXA, blaIMP, blaVIM) in soil, based on the hypothesis that low doses of ARB and ARGs in soil are not quantifiable with current qPCR techniques, mainly due to DNA extraction procedures. To determine the LOQ, microcosms (10 g of agricultural soil, potting soil, sand, fallow soil and compost) were spiked with wastewater isolated ARB doses ranging from 102 to 107 CFU/g of dry soil. These spiked ARB harboured respectively the vancomycin resistance gene vanA (E. faecalis), quinolone resistance gene qnrS (Escherichia coli), and β-lactam resistance genes blaTEM (E. coli), blaOXA (E. coli, Acinetobacter johnsonii), blaIMP (A. johnsonii), blaVIM (P. aeruginosa) based on which the LOQs were determined. The microcosms were sampled to enumerate bacterial colony forming units (CFU), and extract DNA for ARGs quantification by qPCR. The LOQ was determined to be 104 copies of ARG per g of dry soil, independently of the soil type. Below this limit, it was not possible to quantify ARGs even when the respective host ARB could be cultivated. The results support the hypothesis that LOQ values are relatively high and may suggest the absence of ARGs in situations in which these may represent a threat. The second work (chapter 4) aimed at assessing the metal impact on the survival of a hospital effluent blaVIM+ P. aeruginosa and on the soil microbial community’s diversity. Microcosms were prepared with agricultural soil non-amended or amended with copper and zinc sulfate or nitrate aged for one month, and spiked with known doses of blaVIM+ P. aeruginosa. The ARB survival was monitored based on CFU enumeration and quantification of selected genes - extracytoplasmic function sigma factor, ecf, Verona Integron–encoded Metallo-β-Lactamase, blaVIM, class 1 integron- integrase gene, intl1, over 30 days. In addition, the microbial community composition (V3-V4 16S rRNA gene amplicon sequencing) was analysed. Over this period, the P. aeruginosa content (CFUs/g dry soil) and ecf and blaVIM (copy number/g dry soil) decreased in all the tested conditions but was still quantifiable after 30 days. This confirms the ARB persistence in soil along the 30 days, excluding the hypothesis of ARG loss during this period. Microbiome analysis revealed a clear influence of metals in the bacterial community diversity, independent of the metal type and salts nature. This study permitted to conclude that the metal amendment affects the soil microbial quality but has a negligible impact on the exogenous bacteria survival. These results highlight the importance of considering microbial interaction and characteristics, such as metal tolerance, in the assessment of ARB persistence in the environment. In chapter 5 the genomes of blaVIM-2+ or blaNDM-1+ P. aeruginosa strains were compared. The ARG blaVIM-2 is mostly observed in Pseudomonas species, while blaNDM-1 is distributed among distinct genera and orders. The work focused on phylogenetic distribution and genomic features of a dataset of 116 blaVIM-2+ and 27 blaNDM-1+ genomes, from 38 countries. The selected genomes were annotated and the core sequence multilocus sequence typing (MLST) were determined. The blaVIM-2+ and blaNDM-1+ genomes were analysed using a comparative genome approach to assess the core and accessory genes, later used to determine the bacteria antibiotic resistance and functional profile. To describe the blaVIM-2 and blaNDM-1 genomic environment, the flanking regions were annotated through sequence comparison. The phylogenetic and geographic distribution analyses suggested a worldwide distribution of the strains belonging to several STs with cases of endemism. The blaVIM-2 + and blaNDM-1 + accessory genomes presented different antibiotic resistance and functional profiles, regardless the majority of the ARGs and proteins families were shared. Interestingly, the copresence of blaVIM-2 and blaNDM-1 and other carbapenems resistance genes in different genomes was observed. The genomic environments of the two ARGs were different, being blaVIM-2 associated with distinct transposons structures (Tn21, Tn402-like mostly) and blaNDM-1 to different elements (ISAba125 and bleMBL and IS91). This work emphasized the importance of considering different approaches to tackle the spread of carbapenem resistant bacteria evaluating the phylogeny, and geographical distribution but mostly the genomic characteristics of the strains. Our works aimed to indicate possible weaknesses to be improved in antibiotic resistance monitoring and highlight the ARB phylogenetic role and genetic characteristics favouring the ARGs spread. In particular, the experimental work evidences the possible survival of ARB in soil, mostly in extremely polluted conditions. Moreover, the survival and presence of these ARB in soil could avoid the quantification by molecular biology methods due to their high LOQ. The study of the ARB genomic characteristics may be useful to prevent the adaptation to environments and to find additional biomarkers for their monitoring.A resistência a antibióticos representa uma séria ameaça para a saúde humana e um contaminante ambiental relevante. As bactérias resistentes a antibióticos (ARB) e os genes de resistência a antibióticos (ARGs) foram descritos em diferentes contextos, principalmente em casos clínicos, mas também em estações de tratamento de águas residuais ou solos agrícolas. No ambiente, o contexto geral da poluição pode favorecer a persistência ou a proliferação de ARB devido a múltiplas características genéticas. A monitorização de ARGs e de ARB no ambiente pode ter um papel importante na identificação de fontes e vias de disseminação. Para abordar estas questões, esta tese explorou três temas baseados em Pseudomonas aeruginosa resistente a antibióticos e em solo: i) as limitações que podem existir devido aos elevados limites de quantificação de ARGs no solo; ii) a sobrevivência de uma estirpe bacteriana exógena ubíqua (blaVIM+ P. aeruginosa) no solo e os possíveis efeitos de sais de metais; e iii) a relação que poderá existir entre a filogenia e o genoma acessório em diferentes genótipos de resistência a carbapenemos (blaVIM+ ou blaNDM+ P. aeruginosa). O primeiro trabalho (capítulo 3) visou avaliar o limite de quantificação (LOQ) de ARGs (vanA, qnrS, blaTEM, blaOXA, blaIMP, blaVIM) em solo, baseado na hipótese de que doses baixas de ARB e ARGs no solo não são quantificáveis com as atuais técnicas de qPCR, principalmente devido aos procedimentos de extração de DNA. Para determinar o LOQ, microcosmos (10 g de solo agrícola, substrato, areia, solo pousio e composto) foram inoculados com ARB isoladas de águas residuais em doses que variam de 102 a 107 CFU/g de solo seco. As ARB usadas como inóculo continham respetivamente o gene de resistência a vancomicina vanA (E. faecalis), o gene de resistência a quinolonas qnrS (Escherichia coli), e os genes de resistência a β-lactâmicos blaTEM (E. coli), blaOXA (E. coli, Acinetobacter johnsonii), blaIMP (A. johnsonii), blaVIM (P. aeruginosa) com base nos quail os LOQs foram determinados. Os microcosmos foram amostrados para enumerar unidades de formação de colónias bacterianas (CFU), e extrair DNA para quantificação de ARGs por qPCR. O LOQ foi determinado como sendo de 104 cópias de ARG por g de solo seco, independentemente do tipo de solo. Abaixo deste limite, não foi possível quantificar os ARGs mesmo quando o respetivo hospedeiro ARB foi detetado por cultivo. Os resultados apoiam a hipótese de que os valores de LOQ são relativamente elevados e podem sugerir a ausência de ARGs em situações em que estes possam representar um perigo. O segundo trabalho (capítulo 4) visou avaliar o impacto de metais na sobrevivência de um isolado de P. aeruginosa proveniente de efluente hospitalar blaVIM+ e na diversidade da comunidade microbiana do solo. Microcosmos foram preparados com solo agrícola ou neste suplementado com sulfato ou nitrato de cobre e zinco envelhecidos durante um mês, e inoculados com doses conhecidas de P. aeruginosa blaVIM+. A sobrevivência da ARB foi monitorizada com base na enumeração das CFU e quantificação de genes selecionados - extracytoplasmic function sigma factor, ecf, Verona Integron–encoded Metallo-β-Lactamase, blaVIM, class 1 integron-integrase gene, intl1, ao longo de 30 dias. Além disso, foi analisada a composição da comunidade microbiana (sequenciação de amplicão V3-V4 do gene 16S rRNA). Durante este período, a abundância de P. aeruginosa (CFUs/g solo seco) e ecf e blaVIM-2 (número de cópia/g de solo seco) diminuiu em todas as condições testadas, mas foi ainda assim quantificável após 30 dias. Estes resultados confirmam a persistência da ARB no solo ao longo dos 30 dias, excluindo a hipótese de perda do ARG durante este período. A análise do microbioma revelou uma clara influência dos metais na diversidade da comunidade bacteriana, independentemente do tipo de metal ou sal. Este estudo permitiu concluir que a suplementação com metais afeta a qualidade microbiana do solo, mas tem um impacto negligenciável na sobrevivência das bactérias exógenas. Estes resultados destacam a importância de considerar a interação e características microbianas, como a tolerância a metais, na avaliação da persistência da ARB no ambiente. No capítulo 5 foram comparados os genomas de estirpes de P. aeruginosa blaVIM-2+ ou blaNDM-1+. O ARG blaVIM-2 é observado principalmente em espécies de Pseudomonas, enquanto blaNDM-1 é distribuído entre géneros e ordens distintos. O trabalho centrou-se na distribuição filogenética e características genómicas de um conjunto de 116 genomas blaVIM-2+ e 27 genomas blaNDM-1+, de 38 países. Os genomas selecionados foram anotados e as sequências do core genome multilocus sequence type (MLST) foram determinadas. Os genomas blaVIM-2+ e blaNDM-1+ foram analisados usando uma abordagem comparativa do genoma para avaliar os genes do genoma core e acessório, mais tarde usados para determinar a resistência a antibióticos e o perfil funcional das bactérias. Para descrever o ambiente genómico de blaVIM-2 e blaNDM-1, as regiões onde se integravam foram anotadas através da comparação de sequências. As análises da distribuição filogenética e geográfica sugeriram uma distribuição mundial das estirpes pertencentes aos vários STs com casos de endemismo. Os genomas acessórios de blaVIM-2+ e blaNDM-1+ apresentaram diferentes perfis de resistência a antibióticos e funcionais, independentemente da maioria dos ARGs e das famílias de proteínas terem sido partilhados. Curiosamente, a presença simultânea de blaVIM-2 e blaNDM-1 e outros genes de resistência a carbapenemos foi observada em diferentes genomas. Os ambientes genómicos dos dois ARGs eram distintos, sendo blaVIM-2 associado a diferentes transposões (Tn21, Tn402-like na sua maioria) e blaNDM-1 a diferentes sequências de inserção (ISAba125 e bleMBL e IS91). Este trabalho enfatizou a importância de considerar diferentes abordagens para combater a propagação de bactérias resistentes a carbapenemos que avalim a filogenia, e a distribuição geográfica, mas principalmente as características genómicas das estirpes. Os nossos trabalhos visavam indicar possíveis limitações a serem melhoradas na monitorização da resistência aos antibióticos e destacar o papel da filogenia das ARB e das características genéticas que favorecem a propagação dos ARGs. Em particular, o trabalho experimental evidencia a possível sobrevivência de ARB no solo, principalmente em condições de elevada poluição. Além disso, a sobrevivência e a presença destas ARB no solo pode não ser possível de quantificar por métodos de biologia molecular devido ao seu elevado LOQ. O estudo das características genómicas das ARB pode ser útil para prevenir a adaptação aos ambientes e para encontrar mais biomarcadores para a sua monitorização

Olhar a cultura organizacional e a liderança na escola pública sob o ethos da inovação

Inovação é a palavra de ordem da sociedade globalizada do século XXI, onde múltiplas agendas geopolíticas proliferam sob a premissa da procura de soluções para os desafios sociais, ambientais e económicos mais prementes. Desde que na década de 90 do século XX se concedeu à inovação o carater de força estratégica para o progresso, o desenvolvimento humano e para a melhoria da qualidade de vida, cedo foram transpostos desafios para a educação, interpelando a escola a encetar uma transformação no sentido de se tornar mais inclusiva. Contudo, as agendas para a educação focadas na transformação dos processos de escolarização vêm esbarrando na complexidade do próprio sistema e no seu modus operandi marcado pelo presentismo, conservadorismo e individualismo. É nesta conjetura de necessidade de transformação profunda da escola que se desenhou o estudo que consubstancia esta tese de doutoramento. Assim, tomando a inovação como elemento central de um triângulo de forças e lógicas intercruzadas que implicam as lideranças e as culturas de escola, a autonomia e os processos de regulação e controlo, as práticas e o capital profissional dos professores, pretende se compreender quais são os impulsos e obstáculos que enredam a inovação nas escolas. Assumindo um plano pluri/multimetodológico, foram combinados métodos qualitativos e quantitativos, num estudo compreensivo envolvendo uma subpopulação de 60 escolas e agrupamentos de escolas portuguesas que foram avaliados no terceiro ciclo de avaliação da Inspeção, no período de 2018 a 2021. O estudo de perceções de diretores, coordenadores de departamento, professores e elementos da equipa de autoavaliação de escola, bem como, de relatórios de avaliação externa e documentos estruturantes de escola, permitiu reunir evidências, sistematizadas em sete artigos, que indiciam a existência de organizações que operam como sistemas debilmente articulados, marcados por ordens espontâneas frágeis e por existências pseudomórficas, onde a inovação assume um carater marginal. As evidências reunidas apontam para um sistema educativo que reverbera numa interdependência frágil, enredado na complexidade de gerar articulação nas realidades intrincadas dos mega-agrupamentos de escolas, com problemas de mobilização coletiva, com culturas de avaliação que servem o propósito da legitimação, com dificuldade em gerar climas de inovação profícuos e de um capital decisional que suporte a transformação da escola. Urge gerar uma outra organização de escola, uma outra liderança, um outro modo de accountability e uma outra identidade profissional docente. Por conseguinte, dilucidamos um caminho de construção de uma escola fundada no funcionamento interdependente ativado por lideranças transformadoras que operem, também de modo interdependente, para gerar envolvimento a partir da (re)construção de significados por forma a alavancar e mobilizar as vontades individuais e coletivas para, assim, gerenciar ‘estados de fluxo’ organizacional favoráveis à mudança. Neste alinhamento da construção de significados que alimentem uma cultura profissional de liberdade, de compromisso e de responsabilidade, enuncia-se um referencial analítico enquadrador da iniciativa de capital de inovação para a educação que tem como desiderato fomentar a construção de uma outra escola.Innovation is the buzzword of the globalised society of the twenty-first century, where multiple geopolitical agendas proliferate to seek solutions to the most pressing social, environmental, and economic challenges. In the 90s, innovation granted the character of a strategic force for progress, human development, and quality of life improvement, challenging education and demanding a new order to fulfil a more equitable society. The innovation agendas for education focused on transforming the schooling processes arose and faced the system's complexity and its modus operandi marked by presentism, conservatism, and individualism. Indeed, the school has changed little in the last century despite the impetuses for transformation that are mainly discursive. Under this conjecture of a desirable and profound transformation needed for the school, we developed a study on innovation - the central element of a triangle of intersecting forces that imply the school leaders and cultures, autonomy and processes of regulation, practices and the professional capital of teachers. Hence, we intended to understand the impulses and obstacles that entangle innovation in schools. Assuming a multi-methodological plan that combined qualitative and quantitative methods, we developed a comprehensive study involving a subpopulation of Portuguese schools and school clusters evaluated in the 3rd evaluation cycle of the Inspection from 2018 to 2021. The study mobilised principals, headteachers, teachers, and the members of the schools’ self-evaluation teams, as well as the external evaluation reports and the schools’ structuring documents. The evidence gathered indicates the existence of organisations that operate as feebly articulated systems, marked by fragile spontaneous orders and pseudomorphic existences, where innovation takes on a marginal role. The documental corpus points to an educational system that echoes a fragile interdependence, with problems of collective mobilisation, cultures of evaluation that serve the purpose of legitimation, a functional distance between leaders and those led and between the power and action centres, troubles regarding the complexity of generating articulation in the realities of the schools’ mega-clusters, and the difficulty of developing fruitful innovation climates and a decision-making capital that support the school transformation. It is urgent to generate another school organisation, another leadership, another mode of accountability, and another professional teaching identity. Hence, we present a path for a school based on interdependent functioning activated by distributed, empowering, and transforming leaderships that operate in an interdependent way. They are the forces to generate involvement for the (re)construction of meanings, leverage individual and collective wills, and manage organisational 'flow states' favourable to change. They can nurture a professional culture of freedom, commitment, and responsibility. In this alignment, we enunciate an analytical framework of the innovation capital initiative for education that aims to foster the design of a generative and transformational grammar of the school and, thus, the construction of another school