Development of novel insecticidal nanoformulations for plant protection

Tese de Doutoramento, Biologia, 11 de dezembro de 2023, Universidade dos Açores.Durante vários anos, as pragas foram responsáveis por perdas nos produtos hortícolas, o que, consequentemente, teve um impacto significativo na oferta e qualidade dos alimentos e na evolução da sociedade humana. Embora os recentes avanços na ciência e na tecnologia tenham reduzido consideravelmente a incidência e a severidade causadas por pragas, uma grande parte da produção real ainda é perdida todos os anos. Por esta razão, a proteção das culturas agrícolas exige o controle de vários insetos praga de forma segura, eficaz e de baixo custo. Esse desafio pode ser uma oportunidade para os agentes de controle biológico uma vez que são alternativas mais seguras do que os pesticidas químicos usados atualmente. Desta forma, o objetivo desta tese foi produzir e formular moléculas biológicas conhecidas como fatores de virulência do nematode entomopatogénico da espécie Steinernema carpocapsae, para avaliar seu potencial uso como novos bioinseticidas contra insetos-praga. Esta investigação iniciou-se com a clonagem e a expressão heteróloga de duas proteínas putativas tóxicas do nematode, conduzidas em Escherichia coli, sendo estas um domínio proteico, designado de péptido ScK1 e a proteína Sc-CAP. A primeira referida assemelha-se aos bloqueadores de canais de potássio das anémonas do mar e a segunda faz parte de uma extensa família de proteínas que recebe o nome de CAP (Proteínas secretoras ricas em cisteína, antígeno 5 e proteínas 1 relacionadas à patogénese). Devido à complexidade dessas proteínas ricas em cisteína, só foi possível a produção bem-sucedida das recombinantes em fusão com a proteína chaperone designada por isomerase de ligação dissulfeto (DsbC). A estrutura secundária do péptido ScK1 que apresentou um tamanho molecular de 5.7-kDa, cujo a purificação indicou ser redox-sensível, exibiu um espectro de dicroísmo circular far-UV consistente com uma estrutura secundária alfa-helicoidal. A desnaturação térmica do péptido ScK1 permitiu estimar uma temperatura de desnaturação de 59,2 ± 0,1 ºC. A análise de interação proteína-proteína in silico revelou uma forte afinidade para com os canais de potássio dos insetos. Os resultados dos ensaios de toxicidade usando Drosophila melanogaster como modelo mostraram que a injeção deste péptido é letal contra insetos de forma dose-dependente, com uma dose letal média (LD50) de 52,29 ng por adulto. A administração oral da proteína de fusão reduziu significativamente a atividade locomotora dos insetos tratados após 48 horas do ensaio. A estrutura terciária predita da proteína Sc-CAP revelou uma conformação de alfa-beta-alfa com grande homologia com proteínas de outros nematodes parasitas de vertebrados, conhecidos por terem capacidade de ligação a esteróis. A versão recombinante apresentou um tamanho molecular estimado de 50 kDa e apesar da proteína não apresentar toxicidade por injeção ou administração oral, os experimentos de interação revelaram uma forte capacidade de ligação de esteróis. A análise de interação ligandoproteína mostrou uma alta afinidade do colesterol e do palmitato para diferentes motivos de ligação da proteína com uma energia de ligação de -6,3 e -4,5 kcal/mol, respetivamente. Estes resultados foram confirmados pelo ensaio in vitro, onde a proteína recombinante apresentou, de forma dose-dependente, grande afinidade de ligação ao colesterol. A Nanoencapsulação destas duas proteínas toxicas foi conseguida através da preparação de nanopartículas de quitosano pelo método de gelificação iónica. A caracterização geral das nanopartículas revelou um tamanho nanométrico para as formulações NanoScK e NanoCAP, com um tamanho médio de 182,0 e 676,9 nm, respetivamente, e uma liberação rápida inicial seguida por um perfil de liberação mais lento para ambas as formulações. Estas nanoformulações permitiram a libertação destas proteínas em insetos. Além disso, foi notável a acumulação dessas moléculas em diferentes tecidos do inseto, nomeadamente, no sistema digestivo e no sistema nervoso. A formulação NanoScK causou efeitos imediatos em insetos, induzindo uma evidente redução da atividade locomotora, paralisia e mortalidade, ao contrário do NanoCAP, onde se observou baixa mortalidade. Por fim, foram avaliados os efeitos dessas formulações sobre a progenia do inseto. NanoScK desencadeou uma redução significativa no número de ovos depositados por insetos tratados, enquanto o NanoCAP causou uma redução significativa na taxa de emergência de adultos. Os resultados desta tese conferem um estatuto de prova de conceito em relação ao uso de proteínas do secretado do nematode para o desenvolvimento de novas formulações inseticidas. Esta nova classe de biomoléculas pode dar origem à próxima geração de inseticidas biológicos visto que são específicos para as pragas alvo, biodegradáveis, não tóxicos, amigos do ambiente e de baixo custo de produção.ABSTRACT: For several years, crop losses due to pests had a significant impact on the evolution of human society and food supply. Although recent advances in science and technology have considerably reduced the incidence and severity caused by plant pests, a big portion of actual production is still lost each year. For this reason, plant protection in agriculture demands the control of several insect pests in a safe, effective, and low-cost way. This challenge can be an opportunity for biological control agents since they are much safer alternatives than several chemical pesticides. Therefore, the purpose of this thesis was to produce and formulate biological molecules known as the virulence factors of entomopathogenic nematodes to evaluate their potential use as bioinsecticides against insect pests. This thesis started with the cloning and heterologous expression of two putative toxic proteins from Steinernema carpocapsae conducted in Escherichia coli. A small protein domain, named ScK1 peptide, which resembles a potassium channel blocker from a sea anemone, and a second larger protein, named Sc-CAP, from the cysteine-rich secretory protein/antigen 5/pathogenesis related-1 superfamily. Due to the complexity of these cysteine-rich proteins, the successful production of the recombinant proteins was only possible in fusion with the chaperone protein called disulfide bond isomerase. The secondary structure of the purified 5.7-kDa ScK1 peptide after proteolytic cleavage of the fusion protein appeared to be redox-sensitive, exhibiting a far-UV circular dichroism spectrum consistent with alpha-helical secondary structure. ScK1 thermal denaturation allowed estimating a melting temperature of 59.2 ± 0.1 °C. In silico proteinprotein interaction analysis revealed a strong affinity towards insect potassium channels. The results from toxicity assays using Drosophila melanogaster as a model show that injection of this peptide can kill insects in a dose-dependent manner with an LD50 of 52.29 ng per adult within 24 hours. Oral administration of the fusion protein significantly reduced the locomotor activity of the treated insects after 48 hours of the assay. The predicted tertiary structure of the Sc-CAP protein revealed a unique alphabeta-alpha sandwich with high structural homology to sterol-binding proteins from other parasitic nematodes. The recombinant version had an estimated molecular weight of 50 kDa and despite the protein did not show toxicity by injection or oral administration, the interaction experiments revealed a strong sterol binding capability. Docking analysis showed a high affinity of cholesterol and the palmitate to different binding motifs of the protein with an energy binding of -6.3 and -4.5 kcal/mol, respectively. These results were confirmed by the In vitro assay, where the recombinant protein showed increasing binding affinity to the cholesterol in a dose-response manner. The Nano-encapsulation of these two venom proteins was achieved by the preparation of chitosan nanoparticles via the ionic gelation method. The overall characterization of chitosan nanoparticles revealed a nanometric size for both NanoScK and NanoCAP formulations, with a mean size of 182.0 and 676.9 nm, respectively, and an initial rapid release followed by a slower release profile in both formulations. These nanoformulations allowed the delivery of the venom proteins into insects. Furthermore, it was notable the increase of these molecules in different insect tissues, such as the gut and nervous system. The NanoScK formulation caused immediate effects in treated insects with an evident reduced locomotor activity, paralysis, and mortality, contrary to the NanoCAP, where low mortality occurred later in the assay. Lastly, the effects of these formulations on the insect progeny were assessed. NanoScK triggered a significant reduction in the number of eggs laid by treated insects, while the NanoCAP caused a significant reduction in adult emergence. The outputs of this thesis confer a proof-of-concept status regarding the use of nematode venom proteins for the development of new insecticidal formulations. This new class of nanoinsecticides may soon become the next generation of insecticides because they are cost-effective, non-toxic, biodegradable, and beneficial to the environment

Unveiling the role of methylation prone (MP) and untranslated (UTRs) regions in the clinical variability of Spinocerebellar Ataxia Type 3(SCA3) /Machado-Joseph Disease (MJD): a genome-wide approach

Tese de Doutoramento, Biologia, 22 de junho de 2023, Universidade dos Açores.A Ataxia espinocerebelosa do tipo 3 (SCA3), também conhecida como doença de Machado-Joseph (MJD), é uma doença neurodegenerativa rara de manifestação tardia e pertencente ao grupo das doenças de poliglutamina (poliQ). O gene causal desta doença, ATXN3, apresenta como mutação causal a expansão do motivo repetitivo CAG. Este gene codifica a proteína ATXN3, uma proteína ubíqua que pode estar envolvida nos mecanismos de transcrição. As regiões não traduzidas (UTRs), 5’ e 3’ UTRs, juntamente com elementos cis-acting (tais como os promotores dos genes), são essenciais para a regulação da expressão génica. Além disso, também a metilação do ADN tem um papel importante na referida regulação. O principal objetivo desta tese de doutoramento foi analisar o impacto das regiões não traduzidas e das regiões propensas à metilação, na variabilidade clínica da SCA3. Para este efeito, estudámos a variação encontrada em 3'UTR do gene ATXN3 e analisámos o impacto destas variantes na variação da idade de início da doença nos doentes com SCA3. Reportámos nove variantes presentes em 3'UTR do gene ATXN3 que podem ter um papel na sua própria regulação génica. Na coorte Açoriana, composta por doentes com SCA3, nenhuma das variantes que foram identificadas apresentou um efeito modulador significativo na variação da idade de início da doença, e não fomos capazes de replicar os resultados para a variante rs709930 (e rs910369) obtidos por outro grupo de investigadores. Neste estudo, conseguimos identificar haplótipos associados à doença e que podem fazer a discriminação dos alelos expandidos; este facto pode ser relevante para o desenvolvimento de novas estratégias de allele-specific silencing. Estudámos também a variação encontrada nas UTRs de diferentes genes que foi obtida através da sequenciação alargada do exoma e efetuámos correlações genótipo- fenótipo para avaliar o impacto de tais variantes/genes na variação da idade de início dos doentes com SCA3. Neste estudo identificámos quatro genes candidatos a modificadores da variação da idade de início da doença: GLI4, TGFA, ERBB4 e MPHOSPH9. Os alelos alternativos das variantes no gene GLI4, apresentaram uma modificação prevista nos locais de ligação dos factores de transcrição e nos factores de transcrição, que se ligam a esses locais; este gene apresentou ainda uma variação na idade de início da SCA3 de três anos (a idade de início é mais tardia). Os restantes genes modificadores (TGFA, ERBBB4 e MPHOSPH9) identificados neste estudo, apresentam variantes em 3’UTRs, são conhecidos como interatores do gene ATXN3, e influenciam significativamente a variação na idade de início da doença. Também conseguimos obter oito pathways estatisticamente enriquecidas, duas delas contendo genes com efeito modificador (TGFA e ERBBB4): HIF1α Signaling e Neuregulin Signaling. Estas pathways podem ser importantes para outras aplicações terapêuticas nesta doença. Por fim, efetuámos um estudo piloto de metilação genome-wide. Tanto quanto nos é possível saber, este é o primeiro estudo que investiga as alterações de metilação do ADN em doentes com SCA3 e em controlos emparelhados. Como o tamanho da amostra foi pequeno, não esperávamos a ocorrência de CpGs diferencialmente metiladas, entre doentes e controlos. A análise de enriquecimento da lista de 1279 genes que obtivemos, mostrou um enriquecimento para pathways envolvidas em doenças neurodegenerativas, tais como a Calcium signaling pathway. Também realizámos uma análise com epigenetic clocks (Hannum e Horvath) para doentes com SCA3 e controlos emparelhados. Não conseguimos encontrar diferenças entre doentes e controlos para a idade de metilação do ADN, para ambos epigenetic clocks . No caso da diferença da idade de metilação do ADN e a diferença da idade de metilação residual do ADN, também não fomos capazes de encontrar diferenças entre os dois grupos para ambos os epigenetic clocks. Estes resultados podem ser explicados pelo tamanho da amostra e pelo poder limitado deste estudo. Esta tese de doutoramento tentou contribuir para a descoberta do papel das regiões não traduzidas e às regiões propensas à metilação na variabilidade clínica da SCA3. Para este efeito, obtivemos: a) variantes com impacto previsto em 3'UTR do gene ATXN3; b) genes candidatos a modificadores, com variantes em UTRs; c) nenhum resultado significativo para o primeiro estudo a nível do genoma sobre a metilação do ADN, comparando doentes e controlos; serão necessários mais estudos, num número maior de doentes e controlos para obter um perfil de metilação para a SCA3.ABSTRACT: Spinocerebellar ataxia type 3 (SCA3), also known as Machado-Joseph disease (MJD) is a rare late-onset neurodegenerative disorder, which belongs to the polyglutamine (polyQ) group of diseases. The causal gene of this disease, ATXN3, presents CAG repeat expansion as the causative mutation. This gene encodes the protein ATXN3 an ubiquitous protein that can be involved in transcription mechanisms. Untranslated regions (UTRs), 5’ and 3’ UTRs, along with cis-acting elements (such as gene promoters), are essential for the regulation of gene expression. Also, DNA methylation has an important role in such regulation. The main goal of this thesis was to analyse the impact of untranslated and methylation prone regions in the clinical variability of SCA3. For this purpose, we studied the variation found in 3’UTR of ATXN3 and analysed the impact of these variants in the variance of the onset of SCA3 patients. We reported nine variants present in the 3’UTR of ATXN3 that can have a role in its own expression regulation. In the Azorean SCA3 cohort studied, none of the variants that were identified presented a significant modulatory effect on the disease onset and we were not able to replicate results for rs709930 (and rs910369) obtained by other group of researchers. In this study, we were able to identify disease-associated haplotypes that can discriminate expanded allele; this fact can be relevant for the design of new allele-specific silencing strategies. We also studied the variation found in the UTRs of different genes that was obtained through an extended exome sequencing and performed genotype-phenotype correlations to evaluate the impact of such variants/genes in the onset of SCA3 patients. In this study we identified four candidate modifier genes of the disease onset: GLI4, TGFA, ERBB4 and MPHOSPH9. The alternative alleles of the variants in GLI4, presented a predicted modification in transcription factors binding sites and in transcription factors, that bind to those sites; this gene showed a delay of three years in SCA3 onset. The remaining modifier genes (TGFA, ERBB4 and MPHOSPH9) identified in this study, are known ATXN3 interactors, and significantly influence the onset of the disease. These genes presented variants in the 3’UTRs. We were also able to obtain eight statistically enriched pathways, two of them containing genes with a modifier effect on the onset (TGFA and ERBB4): HIF1α Signaling and Neuregulin Signaling. These pathways can be important for further therapeutic applications in this disease. Finally, we performed an epigenome-wide pilot study. As far as we are aware, is the first study investigating genome-wide DNA methylation changes in SCA3 patients compared to matched controls. As the sample size was small, we were not expecting genome-wide significant differentially methylated CpG sites, between patients and controls. Enrichment analysis of the obtained list of 1279 genes showed an enrichment for pathways involved in neurodegenerative diseases such as Calcium signaling pathway. We also performed an analysis of epigenetic clocks (Hannum and Horvath) for SCA3 patients and matched healthy controls. We were not able to find differences between patients and controls for DNA methylation age for both epigenetic clocks. For DNA methylation age acceleration difference and DNA methylation age acceleration difference residuals we were not able to find differences between the two groups for both clocks. These results can be explained by sample size and the limited power of this study. This PhD thesis tried to contribute to the unveiling the role of untranslated and methylation prone regions in the clinical variability of SCA3. For this purpose, we obtained: a) variants with predicted impact in 3’UTR of ATXN3 gene; b) candidate modifier genes, with variants in UTRs; c) no significant results for the first genome-wide study on DNA methylation comparing patients and controls; further studies in a higher number of patients and controls are required to obtain a methylation profile for SCA3

Filosofia da História em Teófilo Braga

Compreendemos a relevância da história no pensamento de Teófilo pela sua ligação às ciências sociais. Para que os fenómenos sociais não sejam considerados um agregado de casos isolados, compete à filosofia da história destrinçar o fio condutor que os torna parte de um jogo de dependências recíprocas. Avançamos também com alguns exemplos em que esta conceção se reflete na obra de Teófilo, nomeadamente na produção poética, na análise literária e no pensamento político.ABSTRACT: We understand the relevance of history in Teófilo’s thought through its connection to the social sciences. In order to ensure that social phenomena are not considered an aggregate of isolated cases, the philosophy of history must unravel the common thread that makes them part of a game of reciprocal dependences. We also present some examples in which this conception is reflected in Teófilo’s Work, namely in his poetic production, literary analysis and political thought

Tesla e Tesla: Da Corrente Elétrica ao Carro Elétrico

Já ouviste falar dos carros Tesla, certo? Aqueles elétricos, modernos, super-rápidos e cheios de tecnologia? Mas sabias que o nome ¯Tesla° não foi escolhido por acaso? É uma homenagem a Nikola Tesla, um inventor do século XIX, cujas ideias, muitas delas à frente do seu tempo, só agora estão a tornar-se realidade

Play with History: o lúdico no ensino de História no 3.º Ciclo do Ensino Básico e no Secundário

Dissertação de Mestrado, Ensino da História no 3.º Ciclo do Ensino Básico e no Ensino Secundário, 13 de março de 2025, Universidade dos Açores.O presente Relatório tem como principal objetivo apresentar, analisar e refletir sobre a ação educativa desenvolvida no âmbito do Estágio Pedagógico, integrado no Mestrado em Ensino de História no 3.º Ciclo do Ensino Básico e no Secundário, da Universidade dos Açores. Em paralelo com a nossa reflexão em redor da globalidade das ações desenvolvidas no nosso Estágio, entendemos aprofundar um tema em específico, face àquele que consideramos ser o potencial do lúdico no ensino de História. Trata-se de uma disciplina que vem sofrendo com o crescente desinteresse dos alunos, sendo um dos desafios enfrentados pelos professores torná-la interessante. Assim, intitulamos este Relatório de “Play with History: o lúdico no ensino de História no 3.º Ciclo do Ensino Básico e no Secundário”. Desta forma, para além de darmos a conhecer todo o trabalho realizado durante o nosso Estágio, apresentamos também os desafios do ensino de História e de que forma podemos, ou devemos, enquanto futuros docentes da disciplina, cativar os nossos alunos e tornar o processo ensino-aprendizagem mais interessante e eficiente, dando ênfase ao papel que os recursos lúdicos podem exercer neste contexto. De modo a cumprir os nossos propósitos, e para além da análise que fazemos à nossa ação educativa, recorremos ao inquérito por questionário para recolher as informações e conceções pretendidas. Foram questionados vinte docentes do 3.º Ciclo do Ensino Básico e/ou do Secundário de diversas escolas dos Açores. Numa fase em que é urgente repensar as estratégias e recursos utilizados em sala de aula, concluímos que o lúdico apresenta imensas potencialidades no ensino de História, tornando-se num valioso aliado para o professor, na procura por um processo ensino-aprendizagem mais eficiente. Em 1845, o célebre Almeida Garrett escreveu a peça “Falar verdade a mentir”. Pois bem, nós acreditamos que é possível “Ensinar História a brincar”.ABSTRACT: The main objective of this Report is to present, analyze and reflect on the educational action developed within the scope of the Pedagogical Internship, integrated in the Master's Degree in History Teaching in the 3rd Cycle of Basic and Secondary Education, at the University of the Azores. In parallel with our reflection on the globality of the actions developed in our Internship, we intend to deepen a specific theme, in view of what we consider to be the potential of play in the teaching of History. It is a discipline that has been suffering from the growing disinterest of students, and one of the challenges faced by teachers is to make it interesting. Thus, we title this Report "Play with History: the ludic in the teaching of History in the 3rd Cycle of Basic and Secondary Education". In this way, in addition to making known all the work done during our Internship, we also present the challenges of teaching History and how we can, or should, as future teachers of the discipline, captivate our students and make the teaching-learning process more interesting and efficient, emphasizing the role that playful resources can play in this context. In order to fulfill our purposes, and in addition to the analysis we make of our educational action, we use the questionnaire survey to collect the desired information and conceptions. Twenty teachers of the 3rd Cycle of Basic Education and/or Secondary Education from various schools in the Azores were questioned. At a time when it is urgent to rethink the strategies and resources used in the classroom, we conclude that playfulness has immense potential in the teaching of History, becoming a valuable ally for the teacher, in the search for a more efficient teaching-learning process. In 1845, the famous Almeida Garrett wrote the play "Speaking truth to lie". Well, we believe that it is possible to "Teach History through play"

Potential factors promoting university student motivation and satisfaction in a blended learning context

ABSTRACT: Blended learning has gained prominence in higher education in response to the growing integration of technology in society, aiming to enhance student engagement by combining face-to-face instruction with online components. This pedagogical approach supports autonomy, encourages active participation, and promotes critical thinking by enabling students to apply theoretical concepts to practical situations through digital tools and interactive platforms. This study investigates the key factors influencing student motivation and satisfaction in blended learning environments. It draws on two theoretical frameworks: Self-Determination Theory (SDT), which highlights the psychological needs of autonomy, relatedness, and competence as essential for intrinsic motivation; and the Technology Acceptance Model (TAM), which focuses on Perceived Usefulness (PU) and Perceived Ease of use (PEOU) as predictors of technology acceptance. The research was conducted at a Portuguese university with a sample of 444 students, who completed a questionnaire comprising 38 items distributed across seven constructs (namely, Autonomy, Relatedness, Competence, PU, PEOU, Learning Motivation (LM), and Learning Satisfaction (LS)), along with sociodemographic data. The analysis employed Partial Least Squares Structural Equation Modelling (PLS-SEM), evaluating both the measurement model and the structural model, using bootstrapping to assess the significance of the path coefficients. The results confirmed most of the formulated hypotheses. Perceived ease of use and perceived usefulness were the strongest predictors of learning motivation, which, in turn, significantly influenced learning satisfaction. Additionally, PU and PEOU mediated the relationship between the SDT factors and learning motivation. However, PEOU did not mediate the relationship between competence and PU. These findings offer valuable insights for university leaders, educators, and student organisations, highlighting the importance of aligning blended learning strategies with students’ psychological and technological needs to enhance their motivation and overall satisfaction

Descoberta de conhecimento em dados de mobilidade urbana: um exemplo de inteligência urbana

Coordenação e edição de Armindo Rodrigues (FCT-UAc).Nos Açores, tal como em Portugal Continental, as cidades inteligentes (as conhecidas smart-cities) continuam a enfrentar enormes desafios. Estes incluem a melhoria da infraestrutura tecnológica e da sua governança, que visa aumentar o envolvimento e a inclusão dos cidadãos e das instituições. Um dos principais desafios é a promoção da mobilidade dos cidadãos para melhorar a sua qualidade de vida e fomentar o seu desenvolvimento social, económico e cultural.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Suzanne Noël, uma vanguardista – I

Suzanne Gross nasceu em Laon, França, em 1878. Casou aos 19 anos com Henri Pertat, um médico dermatologista a exercer em Paris. Posteriormente, também ela começou a estudar medicina, terminando o curso em 1908. Durante a 1.ª Guerra Mundial (1914-1918), Suzanne juntou-se à equipa do cirurgião e professor de anatomia Moréstin no Hôpital Militaire Val-de-Grâce, em Paris, para tratar soldados feridos

Processos identitários no ensino: o caso das artes cênicas na ilha de S. Vicente (Brasil)

Tese de Doutoramento, Literaturas e Culturas Insulares, 13 de maio de 2025, Universidade dos Açores.A presente tese propõe uma investigação sobre processos cênicos escolares num espaço insular. O estudo pretende uma análise da construção de uma identidade cultural através de práticas culturais imbricadas em atividades artísticas de adolescentes estudantes do Ensino Médio de uma escola da Ilha de São Vicente, no litoral de São Paulo, que abriga dois municípios brasileiros: São Vicente e Santos. O recorte da pesquisa aborda o modo como tais práticas se organizam e produzem identidades vinculadas às artes da cena e às ações culturais. O aporte teórico-metodológico da pesquisa se situa no campo dos Estudos da Cultura, elencando narrativas e identidades em suas articulações com a Pedagogia do Teatro. Os referenciais teóricos utilizados partem, dentre outros, dos estudos de Richard Hoggart (1971, 1973), intelectual inglês que se dedicou aos Estudos Culturais, Stuart Hall (2014b), Francisco Varela, Eleanor Rosch e Evan Thompson (1993), e Theodor Adorno e Max Horkheimer ([1944] 1985). A investigação permite estudar experiências educativas que contribuem para a construção identitária da Ilha de São Vicente.ABSTRACT: This thesis proposes an investigation of educational scenic processes in a school on an island space. The study aims to analyze the construction of a cultural identity through cultural practices embedded in the artistic activities of teenagers high school students in a school on the island of São Vicente, south Brazilian coast of the state of São Paulo. In the island, there are two Brazilian cities called São Vicente and Santos. The focus of the research is the way in which such practices are organized and produce identities linked to the performing arts and cultural actions. The theoretical-methodological contribution of the research is in the area of Culture on narratives and identities in its articulation with the theater pedagogy. The theoretical references used are Richard Hoggart (1971, 1973), an English intellectual who dedicated his life to Cultural Studies, Stuart Hall (2014b), Francisco Varela, Eleanor Rosch and Evan Thompson (1993) and Theodor Adorno and Max Horkheimer ([1944] 1985), among others. This investigation will allow studying educational experiences that contribute to the construction of the identity of the island of São Vicente

Uso de ferramentas OMIC em cianobactérias para a bioprospecção de metabolitos secundários com atividade antitrombótica

Dissertação de Mestrado, Ciências Biomédicas, 14 de fevereiro de 2025, Universidade dos Açores.As cianobactérias são microrganismos fotossintéticos capazes de produzir metabolitos com bioatividades relevantes para a saúde, incluindo propriedades anticoagulantes. Compostos como anabaenopeptinas (Aps), microviridinas (Mvs) e micropeptinas (Mps) demonstram efeitos antitrombóticos, com destaque para as Ap, que inibem o inibidor de fibrinólise ativado por Trombina na sua forma ativada (TAFIa). Neste estudo, utilizou-se 50 estirpes do Banco de Algas e Cianobactérias dos Açores (BACA), para investigar o potencial de síntese de compostos anticoagulantes utilizando uma abordagem OMIC. Esta abordagem inclui a sequenciação do genoma (Illumina), a pesquisa de clusters de genes responsáveis pela biossíntese dos compostos de interesse (Gene Mining), identificação destes compostos por HR-ESI-LC-MS/MS e a realização de um ensaio de bioatividade trombótica, relativo à ação de TAFIa. Das 50 estirpes isoladas, sete demonstraram a capacidade de sintetizar os compostos de interesse, ainda que não tenham sido os análogos diretamente responsáveis pela atividade anticoagulante. Entre estas estirpes, as Aphanizomenonaceae BACA0025, Aphanizomenonaceae BACA0031, Aphanizomenonaceae BACA0109 e Dulcicalothrix sp. BACA0344 foram identificadas como putativamente produtoras de Ap, tendo a Aphanizomenonaceae BACA0025 demonstrado capacidade para sintetizar Ap T. Além destas, a Tolypothrix cf. helicophila BACA0056 também mostrou potencial para sintetizar a Mv A, enquanto as Pseudoaliinostoc sp. BACA0057 e Purpureonostoc sp. BACA0751 apresentaram capacidade para produzir Mp 1120. Foi também identificado um quarto composto, a Vacarina (Vc), possivelmente sintetizada pela Aphanizomenonaceae BACA0025 e Aphanizomenonaceae BACA0031. Em suma, apesar de não terem sido encontrados análogos com atividade anticoagulante, os compostos identificados revelaram outras bioatividades relevantes, tais como a inibição de tirosinase, a inibição de quimotripsina e a promoção da proliferação de células endoteliais. Além disso, surgiram também descobertas científicas igualmente significativas, nomeadamente no que diz respeito à produção de compostos por géneros cuja relação ainda não havia sido descrita. Embora não estejam diretamente relacionados com a coagulação, estes resultados podem representar um avanço promissor no desenvolvimento de fármacos de origem natural.ABSTRACT: Cyanobacteria are photosynthetic microorganisms capable of producing metabolites with relevant bioactivities to human health, including anticoagulant properties. Compounds such as anabaenopeptins (Aps), microviridins (Mvs), and micropeptins (Mps) demonstrate antithrombotic effects, with particular emphasis on Ap, which inhibits the Thrombin-Activatable Fibrinolysis Inhibitor in its active form (TAFIa). This study, using 50 strains from the Bank of Algae and Cyanobacteria of the Azores (BACA), investigated the potential for the synthesis of anticoagulant compounds using an OMIC approach. This approach includes genome sequencing (Illumina), searching for gene clusters responsible for the biosynthesis of the compounds of interest (Gene Mining), identifying these compounds by HR-ESI-LC-MS/MS, and conducting a thrombotic bioactivity assay related to TAFIa action. Seven of the 50 isolated strains demonstrated the ability to synthesise the compounds of interest, although they were not the direct analogues responsible for anticoagulant activity. Among these strains, Aphanizomenonaceae BACA0025, Aphanizomenonaceae BACA0031, Aphanizomenonaceae BACA0109 and Dulcicalothrix sp. BACA0344 were identified as putative producers of Ap, with Aphanizomenonaceae BACA0025 showing the ability to synthesise Ap T. Additionally, Tolypothrix cf. helicophila BACA0056 also showed potential to synthesise Mv A, while Pseudoaliinostoc sp. BACA0057 and Purpureonostoc sp. BACA0751 exhibited the capacity to produce Mp 1120. A fourth compound, Vaccarin (Vc), possibly synthesised by Aphanizomenonaceae BACA0025 and Aphanizomenonaceae BACA0031, was also identified. In summary, although no analogues with anticoagulant activity were found, the identified compounds revealed other relevant bioactivities, such as tyrosinase inhibition, chymotrypsin inhibition, and promotion of endothelial cell proliferation. Furthermore, significant scientific discoveries emerged, particularly regarding the production of compounds by genera that had not been previously described. While not directly related to coagulation, these results may represent a promising advance in developing naturally derived pharmaceuticals