Проявление патогномоничных признаков при моделировании сахарного диабета стрептозотоцином у мышей BALB/c

Relevance. Diabetes mellitus is a widespread, socially significant disease. In this regard, it is important to obtain an experimental model that precedes subsequent experiments on pharmacological screening and/or study of the mechanism of action of antidiabetic agents.The aim of this work was a comparative assessment of the manifestation of hyperglycemia, DNA damage, and morphology of internal organs in BALB/c mice in the modeling of diabetes mellitus by a single administration of streptozotocin at a dose of 200 mg/kg and its fractional, five-day administration at a rate of 40 mg/kg per day.Methods. Streptozotocin was used as an inducer of diabetes. The drug was administered to mice once at a dose of 200 mg/kg or 5 times daily at a dose of 40 mg/kg. We monitored hyperglycemia, DNA damage in the cells of the brain, liver, kidneys, pancreas and testes, and also assessed the microscopic picture of individual internal organs, including the pancreas.Results. In both variants of the experiment, the reproduction of pathognomonic signs of diabetes mellitus is traced. They are somewhat more clearly seen in the variant of the experiment with a fractional, five-day administration of streptozotocin in single doses of 40 mg/kg.Актуальность. Сахарный диабет является широко распространённым, социально-значимым заболеванием. В связи с этим важно получить экспериментальную модель, предваряющую последующие эксперименты по фармакологическому скринингу и/или изучению механизма действия антидиабетических средств.Целью настоящей работы явилась сравнительная оценка проявления гипергликемии, повреждений ДНК и морфологии внутренних органов у мышей BALB/c при моделировании сахарного диабета однократным введением стрептозотоцина в дозе 200 мг/кг и его дробным, пятидневным введением из расчёта 40 мг/кг в сутки.Методы. В качестве индуктора диабета применяли стрептозотоцин. Препарат вводили мышам однократно в дозе 200 мг/кг или 5-кратно ежедневно в дозе 40 мг/кг. Осуществляли контроль гипергликемии, повреждённости ДНК в клетках мозга, печени, почек, поджелудочной железы и семенников, а также оценивали микроскопическую картину отдельных внутренних органов, включая поджелудочную железу.Результаты. В обоих вариантах эксперимента прослеживается воспроизведение патогномонических признаков сахарного диабета. Несколько более отчётливо они прослеживаются в варианте эксперимента с дробным, пятидневном введением стрептозотоцина в разовых дозах 40 мг/кг

Комбинированное воздействие фабомотизола и соединения АЛМ-802 на деполяризацию предсердий в условиях трансляционной модели алкогольной кардиомиопатии у крыс

Relevance. Alcoholic cardiomyopathy (ACMP) is the leading cause of mortality in chronic disease, which is largely associated with an increased risk of developing malignant diseases of the cardiovascular disease. Search for new drugs, including those exhibiting pronounced antiarrhythmic activity, supposed relevance. Objective. To study the effect of combination therapy with fabomotizole and ALM-802 on atrial depolarization in a translational model of alcoholic cardiomyopathy in rats. Methods. The sequence of depolarization of the atrial epicardium was studied in rats in a translational model of alcoholic cardiomyopathy, which received a combination of fabomotizole and compound ALM-802 daily for 28 days after the end of 24 weeks of alcoholization, or pyrogen-free water intraperitoneally. Results. As a result of the 28-day combined action of fabomotizole and the compound ALM-802 in animals with alcoholic cardiomyopathy, additional areas of early activation in the area of lacunae of the pulmonary veins that form during the 24-week period of alcoholization disappear, the risk of atrial arrhythmias is minimized, and sequential propagation.Актуальность. Алкогольная кардиомиопатия (АКМП) является основной причиной летальности при хроническом алкоголизме, что во многом связано с высоким риском развития злокачественных нарушений сердечного ритма. Поиск новых лекарственных средств, в том числе обладающих выраженной антиаритмической активностью, представляется актуальным. Цель исследования: изучение влияния комбинированной терапии фабомотизолом и соединением АЛМ-802 на деполяризацию предсердий в условиях трансляционной модели алкогольной кардиомиопатии у крыс. Методы. Изучена последовательность деполяризации эпикарда предсердий у крыс в условиях трансляционной модели алкогольной кардиомиопатии, получавших после окончания 24-недельной алкоголизации ежедневно в течение 28 дней комбинацию фабомотизола и соединения АЛМ-802 или апирогенную воду внутрибрюшинно. Результаты. В результате 28-дневного комбинированного действия фабомотизола и соединения АЛМ-802 у животных с алкогольной кардиомиопатией исчезают дополнительные области ранней активации в области лакун лёгочных вен, формирующиеся в период 24-недельной алкоголизации, риск предсердных аритмий минимизирован, восстанавливается последовательное распространение волны деполяризации от области синусно-предсердного узла, близкое к таковому у контрольных животных

Изучение острой токсичности ГИЖ-298 на беспородных белых мышах при пероральном введении

Relevance. Assay of acute toxicity is a mandatory step in a preclinical safety study of medicines and pharmaceutical substances. The purpose of this study was to determine the parameters of acute toxicity of the substance GIZH-298. Methods. GIZH-298 was administered once orally to outbred mice of both sexes at doses of 350–550 mg/kg. Control mice received 0.5 ml of 1 % starch solution under the same conditions. During the experiment, the death of animals, signs of intoxication were observed, and the clinical picture was recorded. Pathological anatomical autopsy of the dead mice was performed as they died. Surviving mice were autopsied 14 days after the start of the experiment, immediately after their euthanasia. Results. The average lethal doses of the GIZh-298 substance when administered orally to mice were determined: LD50 in females was 356 mg/kg, LD50 in males was 438 mg/kg. Conclusion. Compound GIZH-298 for oral administration according to the classification of Sidorov K.K. (1973) is a moderately toxic substance and can be assigned to the 3rd class of toxicity, and in accordance with GOST 12.1.007-76 — to the 3rd hazard class.Актуальность. Оценка острой токсичности — обязательный этап доклинического исследования безопасности лекарственных средств и фармацевтических субстанций. Целью настоящего исследования было определение параметров острой токсичности субстанции ГИЖ-298. Методы. ГИЖ-298 вводили однократно перорально аутбредным мышам обоего пола в дозах 350–550 мг/кг. Контрольные мыши получали в тех же условиях 0,5 мл 1 % раствора крахмала. В ходе эксперимента наблюдали за гибелью животных, признаками интоксикации, регистрировали клиническую картину. Патологоанатомическое вскрытие павших мышей проводили по мере их гибели. Выживших мышей вскрывали спустя 14 суток от начала эксперимента, сразу после их эвтаназии. Результаты. Определены среднесмертельные дозы субстанции ГИЖ-298 при пероральном введении мышам: LD50 у самок составила 356 мг/кг, LD50 у самцов — 438 мг/кг. Заключение. Соединение ГИЖ-298 при пероральном введении по классификации Сидорова К.К. (1973 г.) является умеренно токсичным веществом и может быть отнесено к 3 классу токсичности, а в соответствии с ГОСТом 12.1.007-76 — к 3 классу опасности

Яворский Александр Николаевич: к 75-летию со дня рождения

.

Сопоставление приёмов расчёта фармакокинетических параметров в исследованиях с дизайном «животное-точка»

In pharmacokinetics (PK) studies of medicinal products with small laboratory animals models, primarily rodents, the design of the animal-point experiment is often used, involves the selection of biological material after euthanasia of the animal. The question of experimental data processing and the PK parameters calculation method in a situation where all concentration values  are obtained from different individuals is relevant.Purpose of the study. Comparison of pharmacokinetic parameters calculation methods in studies with the animal-point design.Materials and methods. For a number of previously conducted studies with male outbred rats test systems, a retrospective data analysis was performed and PK parameters were calculated in three different ways: from the average concentration values at each time point (method 1): from data obtained for animals with the same sequence numbers in subgroups corresponding to time points (method 2); using resempling based on modeling of individual PK profiles (method 3). Pharmacokinetic parameters (maximum concentration — Cmax, time to reach maximum concentration — Tmax, area under the curve "concentration-time" — AUC0-t, average time to stay in the body — MRT, half-life — T1/2) were calculated by non-compartment method of statistical moments using the validated PKSolver application for Microsoft Office Excel.Results. The comparison of the obtained results did not reveal any patterns and preferences for the use of a particular method of calculating PK parameters depending on the studied drugs, route and administration way. For all evaluated PK parameters (Cmax, Tmax, AUC0-t, MRT, T1/2), similar values and/or intervals were obtained, which indicated the correctness of all considered calculation methods.Conclusion. Based on advantages and disadvantages of the calculation methods comparison it is shown that it is optimal to use method 2, which is a special case of reception (method 3) with a minimum number of replications. It is important to emphasis the method of PK parameters calculation when describing the methodology of studies to improve their quality.При исследовании фармакокинетики (ФК) лекарственных средств с применением мелких лабораторных животных, прежде всего грызунов, часто используют дизайн эксперимента «животное-точка», предполагающий отбор биологического материала после эвтаназии животного. Актуальным является вопрос обработки экспериментальных данных и способ расчёта ФК параметров, в ситуации, когда все значения концентраций получены от разных особей.Цель исследования. Сопоставление приёмов расчёта фармакокинетических параметров в исследованиях фармакокинетики с дизайном «животное-точка».Материалы и методы. Для ряда исследований, проведённых нами ранее с использованием в качестве тест-систем самцов аутбредных крыс, был выполнен ретроспективный анализ данных и расчёт ФК параметров тремя различными способами: по средним значениям концентраций на каждой временной точке (способ 1): по данным, полученным для животных с одинаковыми порядковыми номерами в подгруппах, соответствующих временным точкам (способ 2); с применением ресемплинга, основанного на моделировании индивидуальных ФК-профилей (способ 3). Параметры фармакокинетики (максимальная концентрация — Сmax, время достижения максимальной концентрации — Тmax, площадь под кривой «концентрация—время» — AUC0–t, среднее время пребывания в организме — MRT, период полувыведения — T1/2) рассчитаны внемодельным методом статистических моментов с использованием валидированного приложения PKSolver для Microsoft Office Excel.Результаты. Сопоставление полученных результатов не позволило выявить какие-либо закономерности и предпочтения применения того или иного способа расчёта ФК параметров в зависимости от исследованных препаратов, пути и кратности введения. Для всех оценённых ФК параметров (Сmax, Тmax, AUC0–t, MRT, T1/2) получены близкие значения и/или интервалы, что свидетельствовало о корректности применения рассмотренных способов расчёта.Заключение. На основании сопоставления преимуществ и недостатков рассматриваемых способов расчёта, показано, что оптимально применение способа 2, являющегося частным случаем ресеплинга (способа 3) с минимальным количеством репликаций. Акцентирование использованного способа расчёта ФК параметров при описании методологии исследований важно для совершенствования их качества

Сравнительная оценка эхокардиографических и морфометрических характеристик левого желудочка сердца крыс

Purpose of the study. Comparative evaluation of echocardiographic and morphometric dimensions of the rat heart left ventricle. Materials and methods. The study included 10 outbred male rats weighing 160–180 g. The size of the heart left ventricle was assessed using echocardiography and morphometry. The measurements were carried out according to standard protocols. To perform morphometric measurements, hearts were stopped in systole with a lethal dose (1.0 mg/kg) of 0.025 % strophanthin K solution, and in diastole, by immersing the hearts in a chilled physiological solution (calcium-free medium). Results. It was shown that the systolic size of the left ventricle of the heart according to echocardiography is 1.79Ѓ}0.10 mm, and morphometry 1.64Ѓ}0.09 mm (p = 0,302); diastolic size of the left ventricle, respectively, 3.42Ѓ}0.16 mm and 3.66Ѓ}0.17 mm (р = 0,318). The detected discrepancies do not exceed 10 % and, apparently, are due to the fact that the physiological dimensions of the heart left ventricle are measured by a non-invasive echocardiographic method, and for morphometric measurements of the dimensions in the systole, the heart was stopped by injection of strophanthin K, which entails an overload of heart cells with Ca2+ ions and as a result, contracture of cardiomyocytes; post-mortem cardiac arrest in diastole, in a calcium-free environment, is accompanied by a loss of cardiac muscle tone and, therefore, dilatation of the left ventricle will naturally be greater than physiological. Conclusion. Noninvasive echocardiographic measurement of the size of the heart left ventricle fully reflects the actual size of the left ventricle of the rat heart (the difference does not exceed 10 %), i. e. echocardiographic measurements are valid.Цель исследования. Сравнительная оценка эхокардиографических и морфометрических размеров левого желудочка сердца крыс. Материалы и методы. В исследование было включено 10 беспородных крыс-самцов массой 160–180 г. Размеры левого желудочка сердца оценивали при помощи эхокардиографии и морфометрии. Измерения проводили согласно стандартным протоколам. Для проведения морфометрических измерений сердца останавливали в систолу летальной дозой (1,0 мг/кг) 0,025 % раствора строфантина К, а в диастолу — погружением сердец в охлаждённый физиологический раствор (бескальциевая среда). Результаты. Показано, что систолический размер левого желудочка сердца, согласно данным эхокардиографии, равняется 1,79Ѓ}0,10 мм, а морфометрии — 1,64Ѓ}0,09 мм (p = 0,302); диастолический размер левого желудочка, соответственно, 3,42Ѓ}0,16 мм и 3,66Ѓ}0,17 мм (р = 0,318). Выявленные расхождения не превышают 10 % и, по всей видимости, связаны с тем, что неинвазивным эхокардиографическим методом измеряются физиологические размеры левого желудочка сердца, а для морфометрических измерений размеров в систолу сердца останавливали инъекцией строфантина К, что влечёт за собой перегрузку клеток сердца ионами Са2+ и вследствие этого контрактуру кардиомиоцитов; посмертная остановка сердца в диастолу, в бескальциевой среде, сопровождается потерей тонуса сердечной мышцы и, следовательно, дилатация левого желудочка будет, естественно, больше, чем физиологическая. Заключение. Неинвазивное эхокардиографическое измерение размеров левого желудочка сердца достаточно в полной мере отражает фактические размеры левого желудочка сердца крысы (расхождение не превышает 10 %), т. е. эхокардиографические измерения валидны

Исследование взаимодействия дипептидного миметика нейротрофина BDNF ГСБ-106 с тирозинкиназным рецептором TrkB с помощью технологии поверхностного плазмонного резонанса

The interaction of the neurotrophin BDNF dipeptide mimetic, compound GSB-106, with the tyrosine kinase TrkB receptor specific for the fullsized neurotrophin was studied using surface plasmon resonance. The significant decrease in the binding of BDNF to TrkB, which was preincubated with GSB-106, was shown. The obtained data indicate the interaction of GSB-106 with the TrkB receptor.Методом поверхностного плазмонного резонанса изучено взаимодействие дипептидного миметика нейротрофина BDNF ГСБ-106 со специфическим для полноразмерного нейротрофина тирозинкиназным TrkB рецептором. Показано достоверное снижение связывания BDNF с TrkB, который был предварительно проинкубирован с ГСБ-106. Полученные данные указывают на взаимодействие ГСБ-106 с TrkB-рецептором

Антидепрессивная активность производного пиррола [1,2a] [1,4] диазепина ГМАЛ-24 в тесте вынужденного плавания у мышей

The antidepressant activity of pyrrolo[1,2a][1,4]diazepines (GMAL-24, GMAL-27, GMAL-31, GMAL-32 and GMAL-33) synthesized at the V.V. Zakusov Research Institute of Pharmacology in a forced swimming test on male outbred mice was studied. The compounds were tested in the dose range from 1.5 mg/kg to 20 mg/kg, the reference group received tricyclic antidepressant amitriptyline at a dose of 10 mg/kg, and the control group received 0.5 ml of saline solution. All injections were performed intraperitoneally. After GMAL-27 administration immobilization time was decreased of 1.78, 1.64 and 1.74 times, respectively, compared with the control in all three studied doses (1.5 mg/kg, 5 mg/kg and 10 mg/kg), without significant differences from the control (p = 0.1340; p = 0.2748; p = 0.2214, respectively). The compound GMAL-31 in doses from 1.5 mg/kg to 20 mg/kg had no effect on the duration of immobilization compared to the control group of mice. It was established that the compound GMAL-24 at doses of 5 mg/kg and 10 mg/kg significantly reduced the periods of immobilization compared to the control group and did not differ in this parameter from the comparison drug, which indicates an antidepressant effect comparable to the effect of amitriptyline.Изучена антидепрессивная активность синтезированных в ФГБНУ «НИИ фармакологии им. В.В. Закусова» производных пирроло[1,2a][1,4] диазепинов (ГМАЛ-24, ГМАЛ-27, ГМАЛ-31, ГМАЛ-32 и ГМАЛ-33) в тесте вынужденного плавания на самцах беспородных мышей. Соединения тестировали в диапазоне доз от 1,5 мг/кг до 20 мг/кг, группа сравнения получала трициклический антидепрессант амитриптилин в дозе 10 мг/кг, контрольная группа получала 0,5 мл физиологического раствора. Все инъекции проводились внутрибрюшинно. При введении ГМАЛ-27 наблюдали снижение времени иммобилизации в 1,78; 1,64 и 1,74 раз, соответственно, по сравнению с контролем во всех трёх изученных дозах (1,5 мг/кг, 5 мг/кг и 10 мг/кг), без значимых отличий от контроля (p = 0,1340; p = 0,2748; p = 0,2214, соответственно). Соединение ГМАЛ-31 в дозах от 1,5 мг/кг до 20 мг/кг не оказывало влияния на длительность иммобилизации по сравнению с контрольной группой мышей. Установлено, что соединение ГМАЛ-24 в дозах 5 мг/кг и 10 мг/кг достоверно уменьшал периоды иммобилизации по сравнению с группой контроля и не отличался по данному параметру от препарата сравнения, что указывает на антидепрессивный эффект, сопоставимый с действием амитриптилина

Применение метода AlphaScreen и AlphaLisa в разработке лекарственных препаратов и фармакокинетических исследованиях

   Drug development requires high-tech, simple, and sensitive methods. AlphaLISA method was announced as a universal method that would fit the listed criteria. However, research of other works on the pharmacokinetics of drugs related to this method showed a small number of pharmacokinetic studies in clinical trials. In this review, we focused on not only the positive aspects of the Alpha method, but also its disadvantages.   Разработка лекарственных препаратов нуждается в высокотехнологичных, простых и чувствительных методах. Метод AlphaLISA является универсальным методом, который подходил бы под перечисленные критерии. Однако анализ работ по фармакокинетике лекарственных препаратов, имеющих отношение к данному методу, демонстрирует незначительное количество фармакокинетических исследований при клинических испытаниях. В данной статье мы раскрываем не только положительные стороны метода Alpha, но и его недостатки

Влияние селанка на морфин-индуцированную анальгезию в опытах in vivo

   Background. The endogenous opioid system is involved in neuroadaptation produced by exogenous opioids. Synthesized on the basis of the regulatory peptide tuftsin, the anxiolytic selank inhibits the activity of enkephalin-degrading enzymes, increasing the level of leu-enkephalins in blood plasma.   The aim of the work was to evaluate the effect of selank (0,3 and 0,9 mg/kg, i. p.) on morphine-induced analgesia in animal models. Methods. The experiments were performed in inbred male mice C57Bl/6 (n = 77). The “hot plate” test was used to evaluate the analgesic effect during thermal stimulation of nociceptors when mice were placed on a metal plate heated to 55 ± 0,5 °C, followed by registration of the latent period of the reaction 30, 60, 90, and 120 minutes after the administration of morphine.   Results. Morphine at a dose of 3,0 mg/kg, i. p., caused antinociception with the maximum possible effect (MBE) of 9 %, selank at a dose of 0,9 mg/kg, without antinociception per se, when pretreated with the morphine, increased the latent reaction time, causing antinociception of 29,9 % MBE.   Conclusion. For the first time the data obtained on the synergistic effect of selank and morphine in attenuation of acute somatic pain.   Актуальность. Эндогенная опиоидная система вовлечена в процессы нейроадаптации при действии экзогенных опиоидов. Синтезированный на основе регуляторного пептида тафтсина анксиолитик селанк угнетает активность энкефалин-деградирующих ферментов, повышая содержание лей-энкефалинов в плазме крови.   Цель работы. Оценить влияние селанка (0,3 и 0,9 мг/кг, в/б) на морфин-индуцированную анальгезию в опытах in vivo.   Методы. Эксперименты выполнены на инбредных мышах-самцах линии С57Bl/6 (n = 77). Тест «горячая пластина» использовали для оценки анальгетического действия препаратов при термической стимуляции ноцицепторов при помещении мышей на нагретую до 55 ± 0,5 °С металлическую пластину с последующей регистрацией латентного периода реакции через 30, 60, 90 и 120 мин после введения морфина.   Результаты. Морфин в дозе 3,0 мг/кг, в/б, вызывал антиноцицепцию с максимально возможным эффектом (MВЭ) 9 %, селанк в дозе 0,9 мг/кг, не обладая антиноцицептивными свойствами per se, при предварительном введении с морфином увеличивал латентный период реакции, вызывая антиноцицепцию с МВЭ 29,9 %.   Заключение. Впервые получены данные о синергическом эффекте селанка и морфина в ослаблении острой соматической боли