Estudos sobre o efeito glicogenolitico do dinitrofenol

Orientador : Aldo Focesi JuniorTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: O mecanismo do efeito glicogenolítico do dinitroferol foi estudado em músculo esquelético e em corações, onde este efeito pareceu bem evidente. As hipóteses do efeito indireto da droga através de seus produtos de redução no fígado ou através do aumento na produção de catecolaminas nos animais, foram afastadas. Os dados experimentais que indicaram aumento do conteúdo de fosforilase a através da maior atividade da fosforilase b quinase, bem como os níveis de denosina trifosfato e Glicose-6-fosfato, diminuídos nos primeiros minutos da ação da droga, proporcionaram uma explicação para o seu efeito nestas condições iniciais. Assim, o efeito do Dinitroferol sobre a Adenosina trifosfatase condicionava os baixos níveis de Adenosina trifosfato, que por sua vez promoviam aumento da atividade da fosfofrutoquinase e conseqüentemente baixos níveis de Glicose-6-fosfato na célula. Nestas condições a fosforilase b quinase tinha sua ação (Glicose-6-fosfato é inibidor da enzima), e os níveis de fosforilase a foram encontrados elevados. Após certo tempo de ação da droga, os níveis de Glicose-6-fosfato voltam ao normal enquanto que os níveis desta última enzima continuam aumentados. Neste caso parece, a exemplo de outros desacopladores da fosforilação oxidativa, que o Dinitroferol condiciona acúmulo de íons 'CA POT. ++' em compartimentos celulares, onde a fosforilase b quinase está preferencialmente alojada, proporcionando aumento de sua atividade... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digitalAbstract; Not informed.DoutoradoDoutor em Ciências Biológica

Transporte de Ca+t por mitocondria : caracteristicas do efluxo induzido pelo estado oxidado dos nucleotideos de piridina mitocondriais

Tese (livre docencia) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: O efluxo de 'CA POT. 2+' mitocondrial é estimulado pelo estado oxidado de NADP mitocondrial. Em mitocondria não energizada uma completa oxidação de NAD e NADP pode ser induzida por oxaloacetato ou acetoacetato enquanto que em mitocondria energizada estes substratos oxidam exclusivamente NAD. Esta diferença deve-se ao efeito do potencial protônico de membrana gerado pela respiração ou hidrólise de ATP sobre a constante de equilíbrio da reação catalizada pela enzima NAD(P)-transidrogenase. No último caso o efluxo de 'CA POT. 2+' não é estimulado pelos referidos oxidantes. O efluxo de 'CA POT. 2+' mitocondrial induzido por 'NADP POT. +' é necessariamente associado ao efluxo de 'MG POT. 2+' e nucleotídeos de adenina endógenos mediado pelo transportador especifico uma vez que "bongkrekato", inibidor especifico deste transportador, inibe tanto o efluxo de nucleotídeos de adenina como de 'CA POT. 2+'. A diminuição no título de grupamentos -SH de membrana mitocondrial que acompanha a oxidação de NADP, bem como a similaridade entre as características do efluxo de 'CA POT. 2+' induzida por 'NADP POT. +' e diamida (oxidante de grupos -SH) indicam o envolvimento destes no mecanismo. Ambos, oxidação de NADP e diamida induzem aumento de pequena amplitude no volume mitocondrial que também é sensível a "bongkrekato". Estes resultados indicam que o efluxo de 'CA POT. 2+' mitocondrial induzido por 'NADP POT. +' está associado a alterações conformacionais da mitocondria resultantes da oxidação de grupamentos -SH da membrana em equilíbrio de óxido-redução com NADP através do sistema enzimático glutationa redutase/glutationa peroxidaseAbstract: Mitochondrial 'CA POT. 2+' -efflux is stimulated by the oxidized state of mitochondrial NADP. In deenergized mitochondria either oxaloacetate or acetoacetate can induce a full oxidation of both NAD and NADP whereas in energized mitochondria these substrates oxidize NAD only. This difference is due to the effect of the membrane pH gradiente generated by respiration or ATP hydrolysis on the energy-linked NAD(P)-transhydrogenase reaction. When mitochondria are energized 'CA POT. 2+' efflux is not stimulated by oxaloacetate or acetoacetate. The mitochondrial 'CA POT. 2+' efflux induced by 'NADP POT. +' is associated to the efflux of 'MG POT. 2+' and adenine nucleotides through the adenine nucleotides translocase since the specific inhibition of this enzyme by bongkrekate blocks both adenine nucleotides and 'CA POT. 2+' efflux. The decrease in the titer of membrane bound -SH groups following NADP oxidation as well as the similarity between the characteristics of 'CA POT. 2+' efflux induced by 'NADP POT. +' and diamide (-SH oxidant) indicates the participation of thiol groups in this rnechanism. Both, NADP oxidation and diamide induce bongkrekate-sensitive low amplitude mitochondrial swelling. These results indicate that the 'NADP POT. +' -induced 'CA POT. 2+' efflux from mitochondria is correlated to mitochondrial configuration transition induced by the oxidation of membrane bound -SH groups in redox equilibrium with mitochondrial NADP through the reactions catalyzed by the enzymes glutathione reductase and glutathione peroxidaseTese (livre docencia) - UniverLivre Docente em Biologia Funcional e Molecula