Taz protects hematopoietic stem cells from an aging-dependent decrease in PU.1 activity

Specific functions of the immune system are essential to protect us from infections caused by pathogens such as viruses and bacteria. However, as we age, the immune system shows a functional decline that can be attributed in large part to age-associated defects in hematopoietic stem cells (HSCs)-the cells at the apex of the immune cell hierarchy. Here, we find that the Hippo pathway coactivator TAZ is potently induced in old HSCs and protects these cells from functional decline. We identify Clca3a1 as a TAZ-induced gene that allows us to trace TAZ activity in vivo. Using CLCA3A1 as a marker, we can isolate "young-like" HSCs from old mice. Mechanistically, Taz acts as coactivator of PU.1 and to some extent counteracts the gradual loss of PU.1 expression during HSC aging. Our work thus uncovers an essential role for Taz in a previously undescribed fail-safe mechanism in aging HSCs. Immune system function declines with age, a consequence of defects in hematopoietic stem cells (HSCs). Here the authors show that TAZ buffers age-related loss of PU.1 activity to maintain HSC functionality and identify the surface protein Clca3a1 as a marker of "young-like" HSCs, even in old mice

Recherche de gènes fongiques codant des facteurs de transcription liés à l'établissement de la symbiose mycorhizienne à arbuscules (identification et caractérisation du gène GintSTE de Glomus intraradices)

GintSTE, le premier facteur de transcription (FT) de type STE12 identifié chez un champignon mycorhizogène à arbuscules (MA) (Glomus intraradices), est proche des FT STE12 de champignons filamenteux et serait conservé au sein des Gloméromycètes. GintSTE est induit au cours de la germination des spores et dans les structures fongiques extraradiculaires pendant l'étape de pénétration des racines des plantes hôtes. GintSTE restaure la croissance invasive d un mutant ste12 de levure ainsi que la pénétration dans les tissus végétaux d un mutant clste12 du champignon phytopathogène hémibiotrophe Colletotrichum lindemuthianum, indiquant une possible conservation des mécanismes de colonisation des tissus végétaux chez les champignons symbiotiques et pathogènes. GintSTE pourrait donc être impliqué dans le contrôle de la morphogenèse symbiotique précoce des champignons MA, et en particulier dans l étape de pénétration dans les tissus racinaires à partir des appressoria. Des séquences cibles de GintSTE chez G. intraradices ont été identifiées par simple hybride inversé. Elles contiennent des éléments régulateurs proches de ceux reconnus par STE12 chez la levure (PRE, Pheromone Responsive Element), capables d interagir avec une protéine GintSTE recombinante in vitro. La disposition des sites de type PRE indique que GintSTE pourrait réguler simultanément l expression de plusieurs gènes via des modules de régulation distaux de types enhancers . Certains homologues de gènes régulés par STE12 chez la levure, et impliqués dans la synthèse de paroi et de membrane ainsi que la morphogenèse ou la réponse au stress, pourraient être des cibles de GintSTE.The transcription factor GintSTE, the first STE12 homologue to be identified in a mycorrhizal fungus (Glomus intraradices), is similar to other STE12 proteins from filamentous fungi and seems to be conserved among the Glomeromycota. GintSTE is induced during spore germination and its expression increases in extraradical fungal structures upon penetration of the rhizodermis. Moreover, GintSTE can restore invasive growth of an ste12 yeast mutant as well as penetration of host tissues by a clste12 mutant of the hemibiotrophic plant pathogen Colletotrichum lindemuthianum, suggesting that symbiotic and pathogenic fungi may share common determinants for invasion of plant tissues. GintSTE could thus be involved in the control of the early symbiotic morphogenesis and in particular in the process of penetration of plant tissues by AM fungi. Sequences targeted by GintSTE have been identified from reverse one-hybrid yeast experiments. They contain regulating elements closely related to those recognized by STE12 in yeast (PRE, Pheromone Responsive Element) which are able to interact with a recombinant GintSTE protein in vitro. The organization of PRE sites indicate that GintSTE may simultaneously regulate the expression of distinct genes by interacting with distal regulating modules of enhancer type. Homologues of the yeast STE12-regulated genes involved in plasma membrane and cell wall synthesis, morphogenesis control or stress responses could be regulated by GintSTE in G. intraradices.DIJON-BU Sciences Economie (212312102) / SudocSudocFranceF

Dissection of genetic cell programmes driving early arbuscular mycorrhiza interactions

Chapitre 3International audienc

Dissection of genetic cell programmes driving early arbuscular mycorrhiza interactions

Chapitre 3International audienc

Localisation de l’expression de gènes fongiques lors des différentes étapes de la mycorhization : développement de la méthode de RT-PCR in situ

National audienc

Localization of fungal gene expression at different stages of arbuscular mycorrhizal symbiosis : development of an in situ RT-PCR method

International audienc

Localisation et visualisation de transcrits fongiques in situ: Une méthode originale qui combine biologie moléculaire et microscopie confocale

National audienceLes Gloméromycètes, formant la symbiose mycorhizienne à arbuscules, sont des champignons biotrophes obligatoires qui sont intimement associés aux tissus végétaux qu’ils colonisent. Les techniques utilisées pour suivre l’expression des gènes fongiques dans les racines mycorhizées ne permettent pas de définir le profil spatio-temporel de leur activité. Afin de tracer l’activité transcriptionnelle fongique dans les racines mycorhizées, une méthode innovante, basée sur la RT-PCR in situ, a donc été développée. Cette technique permet de localiser, en microscopie optique confocale à balayage laser, des transcrits fongiques, à l’aide d’amorces spécifiques marquées par un fluorochrome. Du fait de leur importance biologique et de la facilité de leur détection, nous avons choisi les gènes ribosomaux du champignon Glomus intraradices pour mettre au point la méthode dans son intégralité. Nous avons ensuite étendu avec succès cette méthode à d’autres gènes fongiques incluant certains gènes dont le niveau d’expression est faible. Cette technique ouvre la possibilité de mieux comprendre les interactions existant entre les champignons, symbiotiques ou pathogènes, et leurs partenaires végétaux

Genes encoding transcription factors in Glomus intraradices and their expression at the appressoria stage of arbuscular mycorrhiza interactions

International audienceMolecular pathways governing the life cycle of arbuscular mycorrhizal (AM) fungi and their symbiotic interactions with root tissues are not yet fully understood. Most studies fo fungal responses to host plants have targeted developmental stages before root contact (germinating spores), or after root colonization (intraradical mycelium). We are focusing on the early cell events of appressoria contact with the root surface which are essential to the successful outcome of the AM symbiosis. Recent monitoring of Glomus intraradices gene expression at this stage has revealed differential fungal responses to roots of host and non-host (Myc- mutants) M. truncatula (Seddas et al. submitted), suggesting a fine regulation of fungal genes by the host plant. Transcription factors are central regulators of gene expression which control many physiological and developmental processes but little is known of these elements in AM fungi. We have identified seven sequences in G. intraradices with similarity to genes encoding transcription factors in other fungi, by homology searches in databases. Transcript profiling of the corresponding genes in appressoria formed on roots of wild-type or Myc- mutans of M. truncatula points to their differential expression when symbiosis-related plant genes are inactivated, suggesting that the encoded transcription factors could be implicated in regulating early events leading to root colonization. Characterisation of the corresponding genes and analysis of transcription factor function is on-going in order to obtain new insight into their role in symbiosis establishment

Localization of fungal gene expression at different stages of arbuscular mycorrhizal symbiosis : development of an in situ RT-PCR method

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Signaling in AM symbiosis establishment: influence of plant symbiotic genes

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