Identificación de un nuevo autoantigeno mediante la producción de anticuerpos monoclonales humanos

Una de las caracteristicas esenciales de las enfermedades autoinmunes es la presencia en el suero de los pacientes de anticuerpos que reaccionan frente a moleculas propias. En el presente trabajo hemos utilizado linfocitos b procendentes de una paciente con esclerodermia, para generar dos anticuerpos monclonales humanos (acmo) distintos capaces de reconocer un autoantigeno desconocido, el acmo b-24 con un patron de union como el descrito para los anticuerpos polireactivos y el acmo b-33 monoespecifico. Frente a este autoantigeno tambien reaccionaban cinco sueros procedentes de pacientes con diversas manifestaciones autoinmunes. Investigando la naturaleza del compartimento celular reconocido mediante inmunofluorescencia y microscopia electronica, pudimos asignar al endosoma tardio como diana de estos autoanticuerpos. Por otra parte, y tras la secuenciacion del extremo amino terminal del antigeno purificado por cromatografia de afinidad con el acmo b-33, se identifico mediante busqueda por homologia de secuencia en una base de datos este nuevo autoantigeno, que resulto ser el receptor de la manosa 6-fosfato independiente de calcio (ci-mpr). La generacion de anticuerpos monoclonales humanos nos permitio por tanto, no solo estudiar con todo detalle la biologia de la organela diana, sino tambien el aislamiento y purificacion de este nuevo autoantigeno para su porterior identificacion y estudio molecular