Métodos alternativos para a detecção de pirogênios em produtos e ambientes sujeitos a Vigilância Sanitária: avanços e perspectivas no Brasil a partir do reconhecimento internacional do Teste de Ativação de Monócitos

Introduction: The detection of pyrogens is essential for the quality control of injectable products. The Rabbit Pyrogen Test remains widely used, despite the existence of alternative methods such as the Monocyte Activation Test (MAT). Objective: To review the use of alternative methods for pyrogen testing, pointing out advances and perspectives from the recognition of MAT by the European pharmacopoeia and its acceptance for regulatory purposes in Brazil. Method: A search was performed on the PubMed and BVS databases, with further classification, categorization by topic and critical analysis of the results. Results: Twenty-four papers were identified, addressing topics such as applications of MAT, its validation and comparisons with in vivo tests. MAT presented better results when compared to other tests, both in the evaluation of biological products and in the detection of non-endotoxin pyrogens. Limitations to diffusion include difficulties in obtaining whole human blood as a source of monocytes, for which several alternatives have been proposed. Conclusions: MAT is a promising method, with application in safety evaluation of new technologies. Its application in Brazil depends on a national implementation policy, which might include greater integration between BraCVAM, Concea and RENAMA in search for its recognition for regulatory purposes.Introdução: A detecção de pirogênios é imprescindível no controle da qualidade de produtos injetáveis. O Teste de Pirogênio em coelhos ainda tem larga aplicação, apesar da existência de métodos alternativos como o Teste de Ativação de Monócitos (MAT). Objetivo: Revisar o uso dos métodos alternativos no teste de pirogênio, apontando avanços e perspectivas a partir do reconhecimento do MAT pela Farmacopeia Europeia e sua aceitação para fins regulatórios no Brasil. Método: Uma busca foi realizada nas bases PubMed e BVS, com posterior classificação, categorização por assuntos e análise crítica dos resultados. Resultados: Foram identificados 24 trabalhos, abordando temas como as aplicações do MAT, sua validação e comparação com testes in vivo. O MAT apresentou melhores resultados quando comparado a outros testes, tanto na avaliação de produtos biológicos como na detecção de pirogênios não-endotoxinas. Limitações para sua difusão incluem a dificuldade de obtenção de sangue total humano como fonte de monócitos, para o qual diversas alternativas têm sido propostas. Conclusões: O MAT se mostra um método promissor, com aplicação na avaliação da segurança de novas tecnologias. Sua aplicação no Brasil depende de uma política nacional de implantação, que inclua maior Integração entre BraCVAM, Concea e RENAMA na busca por seu reconhecimento para fins regulatórios

Proposal of creati on of the Brazilian Center for Validation of Alternative Methods: outline, structure and operation

Submitted by Alexandre Sousa ([email protected]) on 2015-04-07T12:39:40Z No. of bitstreams: 1 Tese_Octavio_Presgrave.pdf: 1825411 bytes, checksum: a3f455d814ff29be053649af03ea8d60 (MD5)Approved for entry into archive by Alexandre Sousa ([email protected]) on 2015-04-07T12:39:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_Octavio_Presgrave.pdf: 1825411 bytes, checksum: a3f455d814ff29be053649af03ea8d60 (MD5)Approved for entry into archive by Alexandre Sousa ([email protected]) on 2015-04-07T12:40:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_Octavio_Presgrave.pdf: 1825411 bytes, checksum: a3f455d814ff29be053649af03ea8d60 (MD5)Made available in DSpace on 2015-04-07T12:40:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_Octavio_Presgrave.pdf: 1825411 bytes, checksum: a3f455d814ff29be053649af03ea8d60 (MD5) Previous issue date: 2012Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em SaúdeA experimentação animal é utilizada desde tempos remotos e tem ajudado no desenvolvimento da ciência ao longo de muitos anos. Através do uso de animais na pesquisa, não só o Homem tem se beneficiado, mas, também a Medicina Veterinária tem obtido grandes êxitos. Entretanto, a consciência ética tem obrigado pesquisadores de diversas áreas a buscarem alternativas à utilização de animais tanto na pesquisa, quanto no ensino. Apesar de filósofos demonstrarem sua preocupação com os experimentos em animais desde os anos 1700, foi somente no século XIX que novas teorias foram implementadas. A partir da introdução do princípio dos 3Rs (Replacement, Reduction and Refinement –Substituição, Redução e Refinamento), em 1959, por Russel e Burch, é que as pesquisas se intensificaram, ganhando força a partir dos anos 1980. Hoje em dia, é muito grande a pressão de grupos protecionistas contrários ao uso de animais não humanos na experimentação e na educação. Apesar de vários estudos estarem em andamento, buscando uma alternativa aos métodos clássicos que utilizam animais, o número de métodos validados ainda é bem pequeno em relação aos estudados. Para que um método possa substituir outro é necessário passar por um processo bem determinado de validação. Entretanto, no Brasil, ainda não existe uma organização no que tange o desenvolvimento e validação de testes. Tomando por base a criação e as atividades de centros internacionais já estabelecido se a crescente consciência ética sobre o uso de animais, surge, então, a necessidade de se criar um Centro Brasileiro para Validação de Métodos Alternativos, com o objetivo principal de promover pesquisas no nível nacional, bem como com a participação de laboratórios internacionais visando o aprimoramento, desenvolvimento e a validação de métodos alternativos contribuindo, dessa forma, tanto para a redução do uso de animais quanto para a inovação técnico-científica.The animal experimentation has being used for a long time and it has helped the development of Science during this time. Benefits of animal use in research are seen not only for human beings but also for Veterinary Medicine. However, the ethical thoughts oblige researchers from differentare as to search for alternatives for using animals in experimentation and education. Although phylosophers demonstrated their feelings with experimentation since the 1700 years, only in 18thcentury new theories were developed.From the introduction of the 3Rs Principles (Replacement, Reduction and Refinement), by Russel and Burchin 1959, research has been intensified up to reach a higher level in 1980’s.Nowadays, the claim of protection groups for alternatives in experimentation and education is harder.Despite of the great number of groups working on the search of alternative methods, the amount of validated tests is lower than expected. For a method to be considered as a replacement of a classic one it is necessary to pass through a weel-defined validation process. Brazil has not adopted an organizing system for validation yet.Taking into account the creation and activities of international validation centers, the need of establishing a Brazilian center for Validation of Alternative Methodsis supported. The main objective of this Center is to promote collaborative studies with national and international entities in order to validate some alternative method

O uso de animais no desenvolvimento de cosméticos e as alternativas.

Made available in DSpace on 2015-07-03T12:36:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Info_CRQ_125_12-13.pdf: 119291 bytes, checksum: 0f5f72bf3537e353efca01056c489417 (MD5) license.txt: 1914 bytes, checksum: 7d48279ffeed55da8dfe2f8e81f3b81f (MD5) Previous issue date: 2014Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Farmacologia e Toxicologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil

Metodologias alternativas à experimentação animal: aplicação no controle da qualidade de produtos sujeitos à ação da Vigilância Sanitária

Submitted by Alexandre Sousa ([email protected]) on 2015-11-30T12:37:26Z No. of bitstreams: 1 Rev_CFMV_45_15-23.pdf: 499919 bytes, checksum: cc03c4df48016c4a5773a2b749cb659f (MD5)Approved for entry into archive by Alexandre Sousa ([email protected]) on 2015-11-30T12:46:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Rev_CFMV_45_15-23.pdf: 499919 bytes, checksum: cc03c4df48016c4a5773a2b749cb659f (MD5)Made available in DSpace on 2015-11-30T12:46:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rev_CFMV_45_15-23.pdf: 499919 bytes, checksum: cc03c4df48016c4a5773a2b749cb659f (MD5) Previous issue date: 2008Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Imunologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Farmacologia e Toxicologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Imunologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil

Influência da temperatura no ciclo de vida de Triatoma melanosoma Martínez, Olmedo & Carcavallo, 1987 (Hemiptera, Reduviidae)

Submitted by Sandra Infurna ([email protected]) on 2019-10-08T16:13:32Z No. of bitstreams: 1 OtavioPresgrave_VaniaCunha_etal_IOC_1999.pdf: 49545 bytes, checksum: 62a478f106fa20831429f1bd83855a3e (MD5)Approved for entry into archive by Sandra Infurna ([email protected]) on 2019-10-08T16:24:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 OtavioPresgrave_VaniaCunha_etal_IOC_1999.pdf: 49545 bytes, checksum: 62a478f106fa20831429f1bd83855a3e (MD5)Made available in DSpace on 2019-10-08T16:24:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 OtavioPresgrave_VaniaCunha_etal_IOC_1999.pdf: 49545 bytes, checksum: 62a478f106fa20831429f1bd83855a3e (MD5) Previous issue date: 1999Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Entomologia. Laboratório Nacional e Internacional de Referência em Taxonomia de Triatomíneos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Entomologia. Laboratório Nacional e Internacional de Referência em Taxonomia de Triatomíneos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Entomologia. Laboratório Nacional e Internacional de Referência em Taxonomia de Triatomíneos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Farmacologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Entomologia. Laboratório Nacional e Internacional de Referência em Taxonomia de Triatomíneos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Entomologia. Laboratório Nacional e Internacional de Referência em Taxonomia de Triatomíneos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Authors studied the temperature influence in the life cycle of Triatoma melanosoma Martínez, Olmedo & Carcavallo, 1987. Two study groups were used, one was maintained at temperatures of 28 ± 1oC and 80 ± 5% RH, with a photophase of 12 hr, the other was kept at environmental temperature, daily recorded, and a RH varying from 70 to 90%. After hatching, insects were fed once a week on pigeons. Results were analyzed with the Mann-Whitney test, showing that a mean increase of 2oC was suficient for a significant acceleration of the embryonic development. Comparing nymphal stages of both groups, no significant differences were found, except in the second instar nymphs

Toxic potential of dentifrices: comparative evaluation between oral mucosal hamster irritation test and HET-CAM

Submitted by Alexandre Sousa ([email protected]) on 2014-11-14T10:39:57Z No. of bitstreams: 1 analytica_61_48-57.pdf: 386188 bytes, checksum: 4fd0b6090e86b13741ad99e49fee7b63 (MD5)Approved for entry into archive by Alexandre Sousa ([email protected]) on 2014-11-14T10:40:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 analytica_61_48-57.pdf: 386188 bytes, checksum: 4fd0b6090e86b13741ad99e49fee7b63 (MD5)Made available in DSpace on 2014-11-14T10:40:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 analytica_61_48-57.pdf: 386188 bytes, checksum: 4fd0b6090e86b13741ad99e49fee7b63 (MD5) Previous issue date: 2012Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Farmacologia e Toxicologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Farmacologia e Toxicologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Farmacologia e Toxicologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Farmacologia e Toxicologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Imunologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Vice Diretoria de Ensino, Pesquisa e Projetos Estratégicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Certos ensaios toxicológicos utilizados no controle de qualidade de produtos têm sido questionados por grupos defensores do bem estar animal por levarem ao sacrifício e ao sofrimento de um número significativo de animais. Além de implicações éticas, a busca por métodos alternativos é uma questão de grande relevância para os laboratórios oficiais de controle da qualidade. Neste contexto, o método HET-CAM (Hens Egg Test-Chorion Allantoic Membrane) vem sendo estudado como modelo alternativo ao teste de irritação ocular em coelhos. No entanto, estudos que busquem avaliar a relação entre os efeitos irritantes induzidos in vivo em outras mucosas, como por exemplo a mucosa oral, e o HET-CAM são ainda escassos. Assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial preditivo do modelo HET-CAM em relação ao teste de irritação de mucosa oral em hamsters preconizado pela norma ISO 10.993 – Parte 10. Foram analisados dentifrícios de uso adulto, apreendidos por Secretarias Estaduais ou Municipais de Saúde, e de uso infantil, adquiridos comercialmente no município do Rio de Janeiro, comparando os resultados obtidos em ensaio in vivo com aqueles obtidos no método HET-CAM. Os produtos testados no modelo HET-CAM foram analisados a 10% e 100%. Nossos dados demonstraram que quando testados diluídos a10%, os produtos apresentaram resultados mais próximos àqueles obtidos no teste in vivo. Nestas condições experimentais, o modelo HET-CAM apresentou precisão de 85%, sensibilidade de 100% e especificidade de 50% em relação ao ensaio in vivo. A tendência do HET-CAM em superestimar resultados quando comparado ao modelo animal foi confirmada.Animal welfare groups criticize some toxicological assays, applied in the quality control of products because of the suffering of a considerable number of animals. Apart from the ethi-cal reasons, the search for alternative methods is a matter of great relevance to the official quality control laboratories. The HET-CAM method (Hens Egg Test-Chorion Allantonic Mem-brane) is under study as an alternative for the Draize eye irritation test, which is normally performed in rabbits. However, studies that seek to evaluate the relationship between the effects induced in vivo in other mucous membranes - such as oral mucosa - and the HET-CAM are scarce. In this logic, the present study aimed to evaluate the predictive potential of the HET-CAM model in relation to the oral mucosa irritation test performed in hamsters, as established by ISO 10.993 - Part 10. Adult’s dentifrices, apprehended by the Secretary of Health from Rio de Janeiro, as well as infant’s dentifrices, commercially purchased in the municipality of Rio de Janeiro, were analysied, comparing the results obtained in vivo with those obtained in the HET-CAM assay. The products were tested in vitro pure (100%) and diluted at 10%. Our data showed that when test products were diluted at 10%, the results correlate better to those obtained in the in vivo test. At these experimental conditions, the HET-CAM model has achieved an accuracy of 85%, a sensitivity of 100% and a specificity of 50% in relation to the in vivo model. The tendency of the HET-CAM to overestimate results in comparison to the animal model was confirmed

Chorioallantoic membrane assays (HET-CAM and CAM-TBS): alternative tests for performing toxicological evaluation of productswith low potential for ocular irritation

Submitted by Alexandre Sousa ([email protected]) on 2014-11-27T17:17:36Z No. of bitstreams: 1 RIAL_71_153-159.pdf: 129645 bytes, checksum: 7e7b320195146aea08a10c3465bb8f24 (MD5)Approved for entry into archive by Alexandre Sousa ([email protected]) on 2014-11-27T17:18:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RIAL_71_153-159.pdf: 129645 bytes, checksum: 7e7b320195146aea08a10c3465bb8f24 (MD5)Made available in DSpace on 2014-11-27T17:33:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RIAL_71_153-159.pdf: 129645 bytes, checksum: 7e7b320195146aea08a10c3465bb8f24 (MD5) Previous issue date: 2012Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Programa de Pós-Graduação em Vigilância Sanitária. Departamento de Farmacologia e Toxicologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Programa de Pós-Graduação em Vigilância Sanitária. Departamento de Farmacologia e Toxicologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Programa de Pós-Graduação em Vigilância Sanitária. Departamento de Farmacologia e Toxicologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Programa de Pós-Graduação em Vigilância Sanitária. Departamento de Farmacologia e Toxicologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Programa de Pós-Graduação em Vigilância Sanitária. Departamento de Farmacologia e Toxicologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Vice-Diretoria de Pesquisa e Ensino. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.O presente estudo analisou o potencial preditivo de dois modelos que utilizam a membrana cório-alantoide de ovo embrionado de galinha (i.e. o HET-CAM e sua versão modificada, o CAM-TBS, que quantifica os danos à membrana por meio da absorção do corante azul trypan), como estratégia para a implementação de alternativas aos testes in vivo de avaliação de toxicidade ocular. Vinte colírios foram avaliados in vivo por meio do teste de irritação ocular de Draize e por ensaios in vitro utilizando-se testes HET-CAM e CAM-TBS. Todos os colírios foram classificados como não irritantes pelo teste in vivo. No ensaio HET-CAM, foram observados 4 resultados falso-positivos, e o teste apresentou especificidade e precisão de 80%. O CAM-TBS demonstrou melhor desempenho, pois a especificidade e a precisão foram de 100%. O ponto de corte adotado (cut-off = 0,9) no HET-CAM é discutido, uma vez que os resultados falso-positivos observados no presente estudo poderiam ter sido contornados caso a categoria “não irritante” englobasse produtos “não irritantes” e “irritantes leves”, à semelhança do critério preconizado para o CAM-TBS (cut-off = 7,0).This study aimed at evaluating the predictive potential of the conventional Hen’s Egg Chorionallantoic Membrane (HET-CAM) test and its version CAM-TBS, that quantifies the damage to the membrane cause by absorption of dye trypan blue, in order to propose an alternative assay for assessing the ocular toxicity. Twenty collyria were evaluated in vivo by means of Draize eye irritation test, and by in vitro HET-CAM and CAM-TBS assays. All the analyzed collyria were classified as non-irritant by in vivo testing. In HET-CAM assay, 4 false positive results were observed, and the test specificity and accuracy were of 80%. CAM-TBS showed a better performance, having specificity and accuracy of 100%. The cut-off set up for HET-CAM test (0.9) is discussed, as the false-positive results observed in this study could have been bypassed if the category “non-irritant” encompassed “non-irritant” and “mild irritant” products, in compliance with the criteria recommended for CAM-TBS (cut-off = 7.0)