Hepatitis E Virus infection in HIV-infected patients with elevated serum transaminases levels

Increases in aminotransferases levels are frequently encountered in HIV-positive patients and often remain unexplained. The role in this setting and natural history of hepatitis E in HIV-infected patients are unknown. The aim of the study was to assess HEV infection in HIV-infected patients attending a Parisian hospital, with a current or previous cryptogenic hepatitis.191 plasma samples collected from 108 HIV-infected patients with elevated aminotransferases levels were retrospectively tested for the presence of hepatitis E virus (HEV) infection markers: anti-HEV IgM antibodies, anti-HEV IgG antibodies, anti-HEV IgG avidity index and plasma HEV RNA.One acute infection, documented by positive tests for anti-HEV IgM antibody, low anti-HEV IgG avidity index and plasma HEV RNA (genotype 3e), and three past infections were diagnosed, without any observed case of persistent infection. The acute hepatitis was benign and resolved spontaneously within two weeks. This infection was probably contracted locally. Acute HEV hepatitis can occur in HIV-infected patients but rarely explains cryptogenic hepatitis, at least in an urban HIV population, regardless geographic origin and CD4 counts

Réponse au traitement antiviral lors des réactivations de l'infection à cytomégalovirus chez les receveurs d'allogreffes de cellules souches hématopoïétiques en fonction du statut sérologique du donneur.

Les infections à cytomégalovirus (CMVH) restent une cause majeure de morbidité et de mortalité chez les receveurs d allogreffes de cellules souches hématopoïétiques (CSH). Le traitement anticipé dit préemptif prévient efficacement l apparition de la maladie à CMVH. Cependant, certains patients ont des épisodes répétés et prolongés d infections à CMV. Le but de l étude était de déterminer si le statut sérologique du donneur vis-à-vis du CMVH, la cinétique de charge d ADN dans le sang total et le type de donneur étaient des facteurs prédictifs de la réponse au traitement anti-CMVH. Au total, 147 receveurs de CSH consécutifs, séropositifs pour le CMVH, ont été suivis pendant 6 mois. Cent-onze receveurs ont fait au moins un épisode de réactivation. Le statut du donneur n influençait pas l incidence de la réactivation, en revanche la séronégativité du donneur était associée à des épisodes de réactivation plus précoces et plus prolongés. En analyse univariée, à la fois le statut du donneur et la parenté donneur/receveur influençaient la réponse au traitement. Cependant, ajustée sur le lien de parenté, seule une sérologie positive du donneur était associée à une probabilité plus importante de réponse complète au traitement. La résistance du CMVH aux antiviraux n a été détectée que chez deux patients soit 2,2% des patients traités. La cinétique d apparition des mutations de résistance a été étudiée chez l un d eux.CHATENAY M.-PARIS 11-BU Pharma. (920192101) / SudocSudocFranceF

RETENTISSEMENT DE MUTATIONS DU GENE DE L'ADN POLYMERASE DU CYTOMEGALOVIRUS HUMAIN SUR L'ACTIVITE ENZYMATIQUE DE LA POLYMERASE ET SUR LA SENSIBILITE DU VIRUS AUX ANTIVIRAUX (DES BIOL. MED.)

PARIS-BIUM (751062103) / SudocCentre Technique Livre Ens. Sup. (774682301) / SudocSudocFranceF

ADN polymérase du cytomégalovirus humain (activité enzymatique et sensibilité aux entiviraux)

Le foscarnet, utilisé pour traiter les infections sévères à cytomégalovirus, est un inhibiteur de l'ADN polymérase, codé par le gène UL54. Le but du travail était d'étudier le retentissement de mutations introduites dans UL54 sur l'activité de l'enzyme et la résistance au foscarnet. Une méthode originale, reposant sur la mesure de l'incorporation de nucléotides trisphosphates marqués à la digoxigénénine dans le brin d'ADN en formation, a été mise au point pour mesurer l'activité d'ADN polymérases sauvages et mutées, et leur comportement en présence de foscarnet. L 'implication de l'extrémité N-terminale du domaine conservé delta-C dans le mode d'action du foscarnet a été démontrée pour la première fois. Le rôle d'association de mutations a été confirmé. L'étude des phénotypes de polymérases portant des mutations dans le domaine IV a permis de préciser leur rôle dans la fonction exonucléasique de l'enzyme viralePARIS5-BU-Necker : Fermée (751152101) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Traitement des infections à cytomégalovirus humain (CMV)

International audienceLe cytomégalovirus humain (CMV), virus de la famille des Herpesviridae, est un virus ubiquitaire, infectant 50 à 100 % de la population adulte dans le monde. La primo-infection est le plus souvent asymptomatique chez l'immunocompétent mais il demeure un pathogène opportuniste majeur chez l'immunodéprimé, patient au stade SIDA ou greffé d'organes ou de cellules souches hématopoïétiques. Il est aussi la première cause des infections virales congénitales dans le monde. La prise en charge de l'infection à CMV repose sur un nombre limité de molécules, toutes inhibitrices de l'ADN polymérase virale pUL54. Des stratégies de prévention sont mises en œuvre chez les patients à risque de développer une maladie sévère comme les receveurs d'allogreffe, basées sur une prophylaxie ou un traitement anticipé. En cas de maladie à CMV, un traitement curatif est nécessaire suivi d'un traitement d'entretien selon l'atteinte viscérale. La durée de ces traitements conjuguée à d'autres facteurs de risque peut conduire à l'émergence de mutants résistants, ce qui rend la prise en charge de ces patients encore plus difficile. Du fait de la toxicité de ces molécules, le traitement de l'infection congénitale n'est pas codifié et ne peut s'envisager qu'au cas par cas. Des molécules sont en cours de développement avec une meilleure biodisponibilité orale et une moindre toxicité. La prévention de l'infection à CMV par une vaccination n'est pas encore réalisable à ce jour mais les résultats des essais de vaccin anti-CMV sous-unitaires à base de glycoprotéine B sont encourageants

Development and validation of a non-radioactive DNA polymerase assay for studying cytomegalovirus resistance to foscarnet

International audiencePhenotypic characterisation of the human cytomegalovirus (HCMV) pUL54 DNA polymerase is a useful tool for testing for mutations in the UL54 gene thought to render HCMV resistant to foscarnet. In this study, an in-house non-isotopic method for assessing polymerase enzymatic activity in the presence and absence of foscarnet was developed and its utility for HCMV polymerase phenotyping evaluated. Polymerase activity was assessed by monitoring the incorporation of digoxigenin-labelled nucleotides into the growing DNA chain and foscarnet concentrations inhibiting enzymatic activity by 50% were determined. HCMV DNA polymerases were synthesised in vitro by expression of UL54 under the control of the T7 promoter. Mutations of interest were introduced into the wild-type UL54 gene by site-directed mutagenesis. Mutated polymerases and polymerases from HCMV reference strains were studied. The activity of polymerases containing mutations known to confer resistance to foscarnet (V715M, T700A and N495K) was inhibited by concentrations of foscarnet eight to 14 times higher than those required to inhibit wild-type polymerases. Our in-house non-radioactive phenotypic assay was sensitive and reproducible. It is also easy to perform and could provide a convenient method for characterising mutations conferring resistance to foscarnet in HCMV

A novel mutation in the UL54 gene of human cytomegalovirus isolates that confers resistance to foscarnet

International audienceFoscarnet is currently licensed for the treatment of human cytomegalovirus (HCMV) infection. Mutations proven to confer resistance to foscarnet have mostly been mapped to regions II, III and VI of the HCMV UL54-encoded DNA polymerase. We previously showed that sequential foscarnet-resistant HCMV isolates recovered from a patient with lymphoma had change N495K in region delta-C of the DNA polymerase. To evaluate the impact of change N495K on HCMV sensitivity to foscarnet, a recombinant HCMV strain carrying the mutation was produced by homologous recombination. The recombinant virus showed a 3.4-fold increase in foscarnet resistance, and remained sensitive to ganciclovir and cidofovir. In addition, the recombinant strain showed a reduction of infectious virus yield compared with its parent strain. Change N495K should be added to the list of mutations conferring resistance to foscarnet and be taken into account in the genotypic diagnosis of antiviral resistance

Rapid determination of antiviral drug susceptibility of human cytomegalovirus by real-time PCR

International audienceA quantitative real-time PCR-based assay was developed for determination of cytomegalovirus (HCMV) susceptibility to antiviral drugs. After HCMV isolate-growth for 4 days, antiviral drug susceptibility was determined by measuring the reduction of intracellular HCMV DNA in the presence of increasing concentrations of either ganciclovir, or foscarnet or cidofovir. The 50% inhibitory concentration (IC(50)) was the drug concentration that reduced the number of HCMV genome copies by 50%. The IC(50) values were measured for seven HCMV reference strains sensitive or resistant to one or more antiviral drugs. The antiviral susceptibility of 21 HCMV isolates was then tested and the results were consistent with prior determination of their phenotype and/or genotype by plaque reduction assay and sequencing. The real-time PCR susceptibility assay reported here was found to be highly reproducible, simpler to perform than the plaque reduction assay, and amenable to use in the routine diagnostic virology laboratory

Cytomegalovirus infection in patients with active inflammatory bowel disease

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