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Estudio de prevalencia de infecciones del tracto urinario (ITU) en mujeres de tercera edad residentes en el hogar San Vicente de Paul, de la ciudad de Curic贸
48 p.Las infecciones del tracto urinario (ITU) constituyen una causa importante de morbilidad en el adulto y son particularmente frecuentes en el sexo femenino donde tienen una elevada tendencia a recidivar. En los 煤ltimos a帽os se han producido cambios sustanciales en los patrones de sensibilidad de los principales pat贸genos urinarios, lo que ha condicionado cambios en el tratamiento emp铆rico de las ITU. El objetivo de esta investigaci贸n fue estudiar la prevalencia de ITU y la susceptibilidad antimicrobiana de los principales uropat贸genos que las producen, en pacientes de sexo femenino de la tercera edad residentes en hogares de ancianos de la ciudad de Curic贸. El porcentaje de prevalencia de ITU fue cercano al 40%. En cuanto a la susceptibilidad antimicrobiana se encontr贸 un alto porcentaje de resistencia en cefalosporinas de primera generaci贸n, quinolonas, sulfas y penicilinas con inhibidores de betalactamasas
Estudio in vitro del efecto antimicrobiano de cationes divalentes de uso odontol贸gico frecuente sobre Streptococcus mutans con y sin glicoc谩lix
49 p.Streptococcus mutans ha sido la especie bacteriana mayormente reconocida en el proceso de la etiopatogenia de la caries. Este se encuentra dentro de la biopel铆cula oral, h谩bitat de m煤ltiples microorganismos y pol铆meros extracelulares secretados por 茅sta y otras especies que permiten a estas bacterias adherirse a los tejidos orales, tolerando condiciones desfavorables en el medio oral. Los metales son una de las materias primas m谩s utilizadas y pueden ser
encontradas en el desarrollo de diferentes actividades y disciplinas. La odontolog铆a
tambi茅n los utiliza como biomaterial para instrumental quir煤rgico, implantes,
materiales restauradores, aparatolog铆a ortod贸ncica y prot茅sica, entre otros.
Desde hace algunos se ha reportado que los cationes divalentes cuentan con propiedades antimicrobianas que no hab铆an sido descritas y que podr铆an constituir una alternativa para el uso de antibi贸ticos convencionales.
En este estudio se evalu贸 el efecto de soluciones con sales de plata, n铆quel,
magnesio y fierro, agentes frecuentemente utilizados en la pr谩ctica odontol贸gica
com煤n. Para ello se viabilizaron cepas de Streptococcus mutans, 35 de ellas con
glicoc谩lix y 35 de ellas sin 茅ste, en medios TYCS con az煤car al 30%. Se realizaron
bioensayos con pocillos para determinar las CMIs de cada agente y posteriormente la
siembra de las cepas sobre los medios con agentes disueltos con las CMIs obtenidas
en ellos durante 48 horas en condiciones anaer贸bicas. La totalidad de los agentes evaluados tuvieron efecto antimicrobiano sobre las cepas de Streptococcus mutans. Las CMIs obtenidas fueron 0,15% para plata; 0,78% para n铆quel; 7,8% para magnesio y 0,83% para el fierro. No se observ贸 asociaci贸n entre la susceptibilidad a estos agentes con la presencia de glicoc谩lix. Las
susceptibilidades evidenciadas fueron diferentes de acuerdo al agente cati贸nico
utilizad
Determinaci贸n molecular de diferentes tipos fi谩mbrales en cepas de Escherichia coli obtenidas desde mujeres con infecci贸n vaginal
49 p.Las infecciones vaginales bacterianas (IVB), durante mucho tiempo fueron un problema
de salud sin un tratamiento adecuado. El aislamiento de Escherichia coli en este tipo de patolog铆as se ha vuelto frecuente, sin embargo esta especie bacteriana ha sido considerada como parte de la microflora bacteriana normal de la vagina. Estudios recientes han logrado determinar que las cepas de E. coli no pertenecen a la microbiota vaginal y que por tanto
pueden ser consideradas como agentes etiol贸gicos de estas infecciones, entregando
informaci贸n necesaria para su tratamiento. Su llegada a la vagina puede producirse por la
cercan铆a anat贸mica existente entre el canal vaginal y anal, y adem谩s por el desarrollo de
nuevas conductas sexuales humanas.
Recientemente, se han realizado estudios tendientes a demostrar la participaci贸n
efectiva de E. coli como agente de infecci贸n vaginal, sin embargo no se han investigado
determinantes de virulencia asociados al mecanismo adherente, es por esto que el objetivo del estudio es poder determinar diferentes tipos de fimbrias encargados de realizar este mecanismo, portados por cepas de E. coli aisladas desde mujeres con diagn贸stico cl铆nico de infecci贸n vaginal, incluy茅ndose un total de 54 cepas. La metodolog铆a utilizada para la obtenci贸n de resultados fueron t茅cnicas microbiol贸gicas y de biolog铆a molecular (PCR). Entre los resultados destaca la alta frecuencia de fimbrias tipo I con 80% dentro de las
cepas, seguido de las fimbrias S/F1C (13%) y adhesina afimbrial (3%) de positividad, pili
tipo I no fue detectado dentro de las cepas, concluyendo que E. coli como agente causal de
infecci贸n vaginal posee caracter铆sticas gen茅ticas particulares conferidas por las distintas fimbrias, otorg谩ndole propiedades exclusivas para poder adaptarse a este nuevo nicho ecol贸gico. Pudiendo considerar esta especia bacteriana como un nuevo patotipo, poniendo 茅nfasis en la importancia cl铆nica que conlleva una infecci贸n vaginal causada por E. coli
Determinacion de la capacidad antimicrobiana de distintas hortalizas sobre cepas bacterianas de importancia clinica, contaminantes de alimentos y fitopatogenas
59 p.Actualmente, la b煤squeda de nuevas fuentes de agentes antimicrobianos se hace imprescindible, dado el creciente aumento de la resistencia de microorganismos a los antimicrobianos tradicionales. En este contexto, la investigaci贸n en compuestos biol贸gicamente activos de origen natural es de gran inter茅s. Las hortalizas representan una buena alternativa a investigar, pues si bien se han evidenciado muchas de sus propiedades, su potencial actividad antimicrobiana es un aspecto en el que a煤n puede profundizarse. El objetivo de este estudio fue determinar la capacidad antimicrobiana in vitro de diversas hortalizas sobre cepas bacterianas de importancia cl铆nica, contaminantes de alimentos y
fitopat贸genas. Para el estudio, se prepararon extractos acuosos de la pulpa, piel y semillas,
provenientes de trece especies de hortalizas comercializadas en la ciudad de Talca, Chile.
La capacidad antimicrobiana de los extractos fue probada sobre un total de trece cepas blanco, las cuales fueron seleccionadas por tener importancia cl铆nica, ser contaminantes de alimentos y/o fitopat贸genas. El ensayo in vitro se realiz贸 a trav茅s de la t茅cnica de difusi贸n en agar por el m茅todo de pocillos, y la capacidad antimicrobiana de los extractos fue evidenciada por la aparici贸n de halos inhibitorios en las placas sembradas con la cepa blanco. En conclusi贸n, los extractos acuosos de hortalizas en los que se evidenci贸 capacidad antimicrobiana, fueron algunos derivados de palta, pimiento, y de 贸rganos subterr谩neos (bulbos, tub茅rculos, ra铆ces). Los resultados obtenidos podr铆an contribuir al 谩rea salud en lo referido al desarrollo de nuevos agentes antimicrobianos, adem谩s de tener aplicaci贸n en la industria de alimentos y/o en el sector agron贸mico
Evaluaci贸n de la colonizaci贸n gastrointestinal de Rahnella aquatilis en infantes y adultos mayores de la comuna de Talca
64 p.Rahnella aquatilis es una bacteria Gram negativo perteneciente a la familia
Enterobacteriaceae, la cual se a铆sla generalmente de aguas y suelos. En el hombre coloniza la mucosa gastrointestinal en baja proporci贸n, y su presencia en muestras cl铆nicas se ha visto asociada a pacientes de edades extremas e inmunocomprometidos. R. aquatilis es un pat贸geno de dif铆cil diagn贸stico del que no se tiene mucha informaci贸n debido a que necesita de t茅cnicas de mayor complejidad para su identificaci贸n. En este trabajo se evalu贸 en infantes y adultos mayores la colonizaci贸n gastrointestinal de R. aquatilis, teniendo como objetivos
pesquisar esta bacteria desde ni帽os y adultos mayores de la comuna de Talca, identificar las especies aisladas desde las muestras de deposici贸n obtenidas, y determinar la susceptibilidad antimicrobiana de las cepas de R. aquatilis aisladas. La detecci贸n e identificaci贸n de la bacteria se realiz贸 a trav茅s de coprocultivo en agar MacConkey, para posteriormente inocular
dos medios MIO con aquellas colonias bacterianas Lactosa positivo, los que fueron
incubados, uno a 25掳C y otro a 37掳C durante 24 horas. Aquellas cepas m贸viles a 25 e
inm贸viles a 37掳C siguieron en estudio, junto con las que dieron resultados negativos de
ornitina e indol, a las que se les realizaron pruebas bioqu铆micas utilizando los medios Agar TSI, LIA, MIO, Citrato de Simmons, Bilis esculina y caldo Malonato. Se utiliz贸 una cepa de R. aquatilis aislada de agua del R铆o Lircay como control positivo para las pruebas de identificaci贸n realizadas. Las colonias cuyo perfil bioqu铆mico fue similar a R. aquatilis se
analizaron mediante sistema de identificaci贸n para enterobacterias API Test 20E de Biomerieux. Los resultados de portaci贸n de R. aquatilis fueron negativos en los grupos evaluados, por lo que no se pudieron realizar pruebas de susceptibilidad antimicrobiana. Finalizada la investigaci贸n se concluy贸 que los participantes de este estudio no han estado expuestos a R. aquatilis o esta bacteria no forma parte de su flora gastrointestinal, lo que resulta relevante para futuras investigaciones, ya que se deber铆a considerar utilizar otra
poblaci贸n objetivo e incluir otros factores de riesgo
Caracterizaci贸n de la diversidad gen茅tica de cepas del complejo Mycobacterium tuberculosis en la regi贸n metropolitana- Chile
57 p.La tuberculosis es una enfermedad infecto-contagiosa re-emergente en el mundo, con casi de 9 millones de nuevos casos y m谩s de un mill贸n de muertes al a帽o. En Chile, la tasa de morbilidad por tuberculosis se ha mantenido en los 煤ltimos a帽os, pero la multidrogoresistencia (MDR) ha aumentado en pacientes que han recibido tratamiento. El Instituto de Salud Publica de Chile (ISP) atribuye esta situaci贸n a pacientes cr贸nicos que se arrastran de a帽o en a帽o, pero no existen estudios que confirmen esta hip贸tesis La genotipificaci贸n del complejo Mycobacteriun tuberculosis (cMtb) permite la identificaci贸n de brotes, hacer la distinci贸n entre reinfecci贸n ex贸gena y reactivaci贸n end贸gena e identificar las posibles asociaciones entre pacientes, lo que cual es 煤til para cortar la cadena de transmisi贸n desde pacientes con MDR a pacientes nunca antes tratados. Se han descrito 2 m茅todos de PCR que en conjunto permiten remplazar el m茅todo de referencia, Se basan en la variaci贸n de las regiones de repeticiones directa en el genoma de Mycobacterium tuberculosis (Spoligotyping) y n煤mero variable de repeticiones en tandem de las unidades repetitivas de interespaciadores Mycobacterianos (MIRU-VNTRs). El objetivo de esta tesis fue determinar las variantes gen茅ticas de cepas del cMtb aisladas desde pacientes con tuberculosis entre los a帽os 2008 y 2011, pertenecientes a dos centros de salud de la Regi贸n Metropolitana (SSM Central) y comparar estas variantes con las descritas en literatura para otras zonas geogr谩ficas. Se estudiaron 43 cepas del cMtb, 7 corresponden al Hospital San Borja Arriaran y las restantes a la Red de Salud UC, se les realiz贸 PCR de los 12 MIRU-VNTRs (02,04,10,16,20,23,24,26,27,31,39 y 40) obteniendo el n煤mero de repeticiones correspondientes y Spoligotyping, para amplificar los 43 especiadores de la regi贸n de repeticiones directas y detectarlos por hibridaci贸n. El an谩lisis de resultados se realiz贸 en la base de datos SITVITWEB y MIRU-VNTRplus. Resultado: Los linajes obtenidos corresponden a LAM9 (10), LAM3 (6), T1 (9), T2 (3), LAM6 (1), H3(3), BEIJING(2), X1(1), T4-CEU1(2), hu茅rfanas (6). La frecuencia de linajes son: LAM 39.5%, T 32.5%, H 7.0%, Beijing 4,7%, X 2,3% y hu茅rfanas 14%. Los linajes predominantes en este estudio corresponden los linaje LAM y T, lo cual es comparable con lo ya descrito en Argentina, Brasil, Colombia, Venezuela y Paraguay
Asociacion del gen iucC. y produccion de sustancias antagonicas en cepas de Escherichia coli aisladas desde infecciones vaginales
36 p.Las infecciones vaginales son un problema de gran recurrencia en la mujer de edad f茅rtil. La gravedad de estas afecciones se traduce en que frente a la ausencia de tratamiento, 茅sta puede causar esterilidad permanente, salpingitis, endometritis y si la mujer esta embarazada, las infecciones podr铆an ocasionar parto prematuro, rotura de membranas, ni帽o con bajo peso al nacer y meningitis. Actualmente, existe una importante controversia respecto del rol de algunos microorganismos como agentes etiol贸gicos de infecciones vaginales. Durante mucho tiempo, la presencia de Escherichia coli en secreciones vaginales carec铆a de importancia, ya que la bacteria era considerada parte de la flora normal del tracto vaginal. Sin embargo, diferentes estudios han atribuido el potencial rol de cepas de E. coli como agente causal de esta enfermedad. E. coli es reconocida por la plasticidad gen贸mica que posee, dada la facilidad que tiene para perder o ganar genes, muchos de 茅stos, genes de virulencia, por lo que nuevos patotipos estar铆an emergiendo por las variadas combinaciones que han adquirido durante el complejo proceso evolutivo. Esta investigaci贸n asoci贸 la presencia del sider贸foro aerobactina, a partir de la detecci贸n de gen iucC, con la producci贸n de sustancias antag贸nicas, en 37 cepas de Echerichia coli aisladas de secreciones vaginales. Las cepas de este estudio fueron obtenidas de mujeres en edad f茅rtil con diagn贸stico cl铆nico de infecci贸n vaginal, descart谩ndose la participaci贸n de otros microorganismos a los que com煤nmente se les asigna la responsabilidad de esta enfermedad. Durante esta investigaci贸n fueron detectados simult谩neamente ambos factores de virulencia en 13 cepas de E. coli vaginal. La presencia de estos dos importantes factores de virulencia, demuestra el alto grado de patogenicidad de estas cepas y contribuye a caracterizar, lo que podr铆a ser, el surgimiento de un particular fenogenogrupo de E. coli con afinidad por el epitelio vaginal
Determinaci贸n de la concentraci贸n m铆nima inhibitoria (CMI) de sulfato de cobre frente a Streptococcus mutans con y sin glicoc谩lix
47 P.La caries dental es una de las patolog铆as cr贸nicas m谩s prevalentes a nivel mundial. Su aparici贸n se debe a la interacci贸n de cuatro factores: hu茅sped, microorganismos, dieta y tiempo. En el factor microbiol贸gico, el Streptococcus mutans es el principal microorganismo relacionado con el desarrollo de la caries dental. Uno de los principales mecanismos virulentos para desencadenar el proceso carioso es la producci贸n de glicoc谩lix, sin embargo, no todas las cepas son capaces de producirlo. Actualmente, no existen medicamentos antibacterianos disponibles que se enfoquen en inhibir la comunidad microbiana, para as铆 fomentar la prevenci贸n de la caries, deteniendo la colonizaci贸n de bacterias pat贸genas. El objetivo general de este estudio descriptivo, fue determinar el efecto antimicrobiano del sulfato de cobre sobre cepas de S. mutans con y sin glicoc谩lix. Se obtuvieron cepas de S. mutans provenientes del Laboratorio de Investigaci贸n Microbiol贸gica de la Universidad de Talca, 35 cepas capaces de producir glicoc谩lix y 35 cepas no productoras de glicoc谩lix. Mediante ensayos biol贸gicos, se estableci贸 la actividad antibacteriana del sulfato de cobre pentahidratado sobre S. mutans, y luego se determin贸 la concentraci贸n m铆nima inhibitoria (CMI) del agente sobre ambos grupos de cepas. Las cepas formadoras de glicoc谩lix inhibieron su crecimiento a concentraciones significativamente mayores que el resto de las cepas. Se concluye, que el cobre act煤a como antibacteriano frente a S. mutans y que las cepas productoras de glicoc谩lix presentan mayor resistencia a la inhibici贸n de su metabolism
Propiedades feno y genotipicas de cepas de Escherichia coli aisladas desde infecciones vaginales
76 p.Investigaciones realizadas durante los 煤ltimos a帽os han permitido establecer la patogenia de diversos agentes etiol贸gicos en la infecci贸n vaginal. Actualmente, existe controversia respecto del rol de nuevos agentes etiol贸gicos en esta patolog铆a. La participaci贸n de flora microbiana ex贸gena al ecosistema vaginal, presentar铆a responsabilidad en este proceso infeccioso. Escherichia coli es una especie bacteriana con una gran plasticidad g茅nica, lo cual le permite captar y perder genes con facilidad. Se han clasificado variados patotipos bacterianos de este microorganismo, capaces de colonizar diversos epitelios humanos y expresar diferentes genes de virulencia. En esta tesis fueron investigadas 46 cepas de E. coli, aisladas desde vagina de mujeres infectadas, con diagn贸stico cl铆nico de infecci贸n vaginal. La hip贸tesis propuesta se relacion贸 con la pertenencia de las cepas de Escherichia coli aisladas desde infecciones vaginales, a un particular nuevo feno-genotipo bacteriano. El objetivo general planteado, se fundament贸 en la tipificaci贸n feno-genot铆pica de cepas de E. coli aisladas desde infecciones vaginales. Las metodolog铆as utilizadas estuvieron basadas en t茅cnicas microbiol贸gicas y de biolog铆a molecular como PCR, RAPD-PCR y PFGE. De acuerdo a los resultados obtenidos, se concluye que cepas E. coli de origen vaginal presentan caracter铆sticas fenot铆picas y gen茅ticas propias, las cuales les asignan un origen filogen茅tico com煤n y las agrupan en un 煤nico linaje bacteriano. Las conclusiones logradas a partir de esta tesis, avalar铆an el reconocimiento de E. coli como un nuevo y particular fenogenotipo causante de infecciones vaginales. De modo concreto, estos resultados contribuir谩n a reconocer a E. coli como agente causal de infecciones vaginales, permitiendo implementar terapias antimicrobianas. Lo anterior, en directo beneficio de la calidad de vida de la mujer afectada, el feto y el reci茅n nacido. Desde una perspectiva de inter茅s acad茅mico, estos resultados podr铆an ser el inicio de ulteriores investigaciones, conducentes al conocimiento de aspectos microbiol贸gicos y moleculares de este potencial nuevo fenogenotipo o vaginotipo bacteriano
Efecto antimicrobiano de cepas de Escherichia coli productoras de bacteriocinas sobre cepas bacterianas resistentes
47 p.El presente trabajo tuvo por objetivo determinar el efecto antimicrobiano de cepas
de Escherichia coli productoras de bacteriocinas sobre cepas bacterianas resistentes. Para esto, se realiz贸 la recuperaci贸n e identificaci贸n de cepas bacterianas de desecho provenientes del Hospital de Constituci贸n y del Laboratorio Cl铆nico Alexander Fleming de Talca, causantes de infecci贸n del tracto urinario, las cepas testeadas no contaban con ning煤n tipo de identificaci贸n. El estudio comprendi贸 la recuperaci贸n y aislamiento de las cepas de E. coli en un medio de cultivo nutritivo. Se realizaron pruebas bioqu铆micas de identificaci贸n bacteriana, para corroborar la presencia de E. coli; pruebas de susceptibilidad antimicrobiana in vitro con el m茅todo de difusi贸n en disco; identificaci贸n de fenotipos de resistencias; y estudio de actividad antimicrobiana de cepas con mayor susceptibilidad a los antimicrobianos frente a cepas resistentes para lo cual se realizaron ensayos microbiol贸gicos que consistieron en poner a prueba la capacidad inhibitoria del crecimiento bacteriano de una cepa de E. coli productora de bacteriocina frente a cepas que presentan una alta resistencia a los antimicrobianos