СОЗДАНИЕ ШТАММА-ПРОДУЦЕНТА ХИМЕРНОГО БЕЛКА, СОСТОЯЩЕГО ИЗ ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО АННЕКСИНА И БАКТЕРИАЛЬНОЙ АДЕНОЗИНДЕЗАМИНАЗЫ

Malignant tumors possess the mechanisms allowing one to evade the degradation of tumor-carrier by the immune system. One of the mechanisms is the formation of a tumor immunosuppressing microenvironment acted upon by extracellular adenosine. Earlier, we proposed the idea to eliminate a cancer protection barrier from the host cell immunity using adenosine deaminase fused with annexin A5. The conducted study resulted in the first development of the strain Escherichia coli producing the chimeric protein structurally composed of human annexin A5 and homologous adenosine deaminase. The generating capacity of the obtained microbial strain with respect to chimeric protein was 18 mg/l of culture fluid. 13 mg of highly purified chimeric protein showing the adenosine deaminase activity was produced. The adenosine deaminase productivity of the strain equaled 7.1 µmol/min/ml of culture fluid. The obtained chimeric protein is intended for a further investigation as a promising cancerostatic agent.Злокачественные опухоли обладают механизмами, позволяющими уклоняться от разрушения иммунной системой организма-опухоленосителя. Одним из таких механизмов является формирование в опухоли под влиянием внеклеточного аденозина иммуносупрессирующего микроокружения. Ранее нами была предложена идея устранения защиты рака от хозяйского клеточного иммунитета с помощью аденозиндезаминазы, слитой с аннексином-А5. В результате проведенного исследования впервые сконструирован штамм Escherichia coli, продуцирующий химерный белок, молекула которого состоит из человеческого аннексина-А5 и гомологичной аденозиндезаминазы. Продуцирующая способность полученного штамма-продуцента в отношении химерного белка составляет 18 мг/л культуральной жидкости. Наработано 13 мг высокоочищенного химерного белка, обладающего аденозиндезаминазной активностью. При этом продуцирующая способность этого штамма в отношении аденозиндезаминазы составила 7,1 мкмоль/мин/мл культуральной жидкости. Полученный химерный белок предназначен для изучения в качестве перспективного противоопухолевого средства. 

СИНТЕЗ ФОСФАТИДИЛЬНОГО ПРОИЗВОДНОГО КИНЕТИНРИБОЗИДА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ФОСФОЛИПАЗЫ D STREPTOMYCES NETROPSIS

Herein, the environmentally friendly synthesis of the earlier unknown phospholipid analog of kinetin riboside was carried out using phospholipase D of Streptomyces netropsis. Kinetin riboside and soybean lecithin served as substrates. A maximum degree of nucleoside conversion to 5′-phosphatidyl derivative of kinetin riboside at 37°С to 6 h exceeds 95%. The structure of target product was confirmed by UV and 1Н NMR spectroscopy.С помощью фосфолипазы D Streptomyces netropsis проведен экологически безопасный синтез ранее неизвестного фосфолипидного аналога кинетинрибозида. В качестве субстратов были использованы кинетин и соевый лецитин. Максимальная степень трансформации нуклеозида в 5′-фосфатидильного производного кинетинрибозид при 37 °С за 6 ч реакции превышала 95 %. Структура целевого продукта доказана УФ- и 1Н ЯМР-спектроскопией