Estudio de la expresión antigénica y de la respuesta inmune inducida por la mucina 1 (MUC1) en el cáncer de mama

Las mucinas son glicoproteínas de alto peso molecular, de las cuales ya se han descripto más de diez. Algunas de ellas son formadoras de geles y otro grupo se caracteriza por ser de transmembrana y no formar geles. Tienen fundamental importancia en la lubricación y protección de epitelios normales por ser expresadas por estas células en su borde apical. Sin embargo se las ha asociado a tumores porque son expresadas por las células tumorales pudiendo ser liberadas a circulación. En el caso de la Mucina 1 (MUC 1), fuertemente asociada a cáncer de mama, la expresión en la célula pierde la polarización y puede observarse su expresión en toda la membrana. La estructura normal de esta proteína de transmembrana consta de tres dominios: una cola citoplasmática de 72 aminoácidos, un dominio hidrofóbico que atraviesa la membrana y un dominio extracelular que posee un “core” proteico constituido por repeticiones en tandem de 20 aminoácidos que pueden estar O- glicosilados en serinas y treoninas , en promedio en dos de cinco sitios potenciales de glicosilación con largas cadenas de carbohidratos. Sin embargo, las mucinas tumorales tienen una glicosilación aberrante, presentando en promedio aproximadamente los cinco sitios glicosilados con cadenas cortas de oligosacáridos, lo que deja más expuesto el “core” proteico. Esta diferencia dada por las diferentes glicoformas expresadas en epitelios normales y en mucinas asociadas a tumores es la base de la inmunoterapia dado que se utilizan estas secuencias como blanco. Se están llevando a cabo ensayos clínicos, en otros países, con vacunas conformadas por péptidos de MUC 1 o glicopéptidos relacionados a esa mucina asociados a carriers y adyuvantes adecuados. El resultado estas investigaciones es sumamente útil, no sólo por la expresión de esta mucina en el sitio del tumor, sino porque se ha sugerido una activa participación de la MUC 1 y los carbohidratos asociados a ella en el desprendimiento de células tumorales del sitio primario, la adhesión al endotelio, la evasión al sistema inmune y el establecimiento de metástasis a distancia. Los objetivos planteados fueron los siguientes: - Estudio de la expresión de MUC 1 tisular en muestras benignas y malignas de mama. - Detección de MUC 1 libre y complejada en suero y su eventual correlación con la expresión sérica. - Establecer si existe correlación entre la expresión en tejidos y los estadíos de la enfermedad. - Estudio de la presencia del dominio intracitoplasmático de MUC 1 en muestras de cáncer de mama, con el anticuerpo monoclonal CT2 dirigido contra la cola citoplasmática de la glicoproteína. - Detección de micrometástasis de cáncer de mama en médula ósea. Conclusiones - MUC1 está altamente expresada en el cáncer de mama. Esta glicoproteína fue detectada tanto en especímenes de tejido como en muestras de suero; los estudios inmunohistoquímicos realizados sobre tumores malignos mamarios determinaron que más del 70% de las muestras expresaron MUC1 detectadas por los diferentes anticuerpos monoclonales reactivos con el centro proteico de la fracción extramembranosa de MUC1. El patrón, la intensidad y la extensión de la reacción positiva no varía de acuerdo al subtipo histopatológico de cáncer de mama ni al estadío de la enfermedad. Estos estudios contribuirían a la detección de diferentes glicoformas de MUC1. Por otra parte, no se halló correlación entre los niveles de expresión tisular y los niveles séricos. - Mediante el empleo de un anticuerpo monoclonal contra la cola intracitoplasmática de MUC1, las muestras de tumores malignos fueron positivas en un porcentaje mayor al 90%. Por este motivo, podemos concluir que la detección de la cola intracitoplásmica de MUC1 (MUC1-CT) podría constituir un mejor indicador de la producción de esta mucina porque no depende de la glicosilación ni es liberada al medio extracelular. El patrón, la intensidad y la extensión de la reacción positiva tampoco varían de acuerdo al subtipo histopatológico de cáncer de mama ni al estadío de la enfermedad. - Se midieron los niveles séricos de MUC1 en pacientes con cáncer de mama hallándose niveles más elevados en los estadíos más avanzados de la enfermedad. - En mujeres sin enfermedad, se encontraron valores elevados de MUC1 en embarazadas respecto del grupo de no embarazadas, mientras que no se hallaron diferencias entre las mujeres con lactancia respecto del grupo sin lactancia. Se detectó un gran aumento en MUC1 desde el segundo trimestre alcanzando el valor máximo durante la primera semana del puerperio. - En las mismas muestras de mujeres sanas se estudió la respuesta inmune humoral mediante la medición de anticuerpos anti-MUC1 libres y complejados. Se detectó un aumento moderado de los niveles de MUC1-CIC con el progreso del embarazo. Asimismo, se demostraron elevados niveles de anticuerpos libres anti-MUC1 de tipo IgM e IgG en mujeres no embarazadas versus embarazadas y de IgG en mujeres con lactancia respecto de las que carecían de ella; estos anticuerpos reaccionaron con el centro proteico de la mucina y podrían reducir el riesgo de padecer cáncer de mama. No se hallaron diferencias en los niveles de IgM e IgG anti-MUC1 libres entre los trimestres del embarazo. Por otra parte, se halló un aumento de los niveles de MUC1-CIC durante el embarazo. Se concluye que los niveles séricos de MUC1 y MUC1-CIC son aparentemente inducidos por el embarazo y no parecen estar asociados con la lactancia. - MUC1 puede circular unida a IgG o IgM formando complejos inmunes circulantes (CIC); en consecuencia, una determinación completa de la mucina debería incluir las formas libre y acomplejada de los anticuerpos anti-MUC1. - La expresión de antígenos carbohidratos es superior en células neoplásicas aisladas de la médula ósea (MO) comparado con el tumor original. Es probable que el patrón de expresión observado en células metastásicas pueda favorecer el “homing” y la supervivencia de las células en MO. Sin embargo, se halló una correlación negativa entre la presencia de células malignas en la MO versus la respuesta inmune humoral hacia MUC1 estudiada. Los epitopes carbohidratos estudiados son, usualmente, crípticos en tejidos sanos y aumentan en tejidos tumorales como resultado de la glicosilación aberrante. La alta incidencia de invasión y metástasis de los carcinomas hace necesario proseguir con el estudio de los epitopes carbohidratos, ya que podrían ser blanco de inmunoterapia.Facultad de Ciencias Exacta

Una propuesta para la enseñanza de la Biología en un contexto de masividad

En el marco de una universidad abierta, amplia y pluralista, a cien años de la Reforma Universitaria de 1918, nos enfrentamos a nuevos desafíos para preservar y defender sus principios que están plasmados en el Estatuto de la UNLP. Entre ellos se hallan: la gratuidad de la enseñanza, autonomía universitaria, libertad de cátedra, cogobierno, concursos docentes, ingreso libre y directo con igualdad de oportunidades para quienes deseen acceder a la formación superior. De acuerdo a una tendencia global, se ha producido un aumento de la matrícula que impone una reformulación de estrategias para la enseñanza en un contexto de masividad. Por otro lado, la formación previa de los estudiantes es muy heterogénea y eso genera un problema a resolver para los docentes de los primeros años. Para lograr los objetivos de aprendizaje propuestos, en este contexto, es que se propone un acercamiento previo de los estudiantes con el material didáctico y la bibliografía, así como diversas herramientas virtuales que permitan la clarificación de los contenidos y el desarrollo de un aula virtual extendida complementaria a las clases presenciales. En cuanto a la organización en clase, se propone la organización de “Comunidades de Aprendizaje” que consiste en grupos que trabajen dentro del aula y, en lo posible, también fuera de ella bajo la supervisión de los docentes, o colaboradores. Se le asignarán tareas adicionales, algunas opcionales, integradoras de conceptos para ser evaluadas durante y al finalizar la cursada. Además, se promoverá la participación de estudiantes de los cursos masivos, de 1er año, en actividades de investigación y/o ex-tensión que les amplíen los horizontes de su conocimiento sobre la carrera que han elegido y les ayude a resolver problemáticas. Las es-trategias en sí mismas serán evaluadas previo a su implementación (Ex -ante), durante su ejecución (durante) y después de su imple-mentación (Ex -post). Se espera mayor efectividad en el alcance de los objetivos propuestos luego de implementadas estas innovaciones.Trabajo publicado en Giordano, Carlos José y Morandi, Glenda (comps.). Memorias de las 2º Jornadas sobre las Prácticas Docentes en la Universidad Pública. La enseñanza universitaria a 100 años de la reforma: legados, transformaciones y compromisos. Universidad Nacional de La Plata: La Plata, 2019.Presidenci

Soberanía alimentaria y diálogo de saberes en la Universidad: la perspectiva de la cátedra de Ambiente y Nutrición (Licenciatura en Nutrición, Facultad de Ciencias Médicas, UNLP)

Presentamos la propuesta de la cátedra de Ambiente y Nutrición, que aborda sus contenidos desde el enfoque de la Soberanía Alimentaria, propiciando un diálogo de saberes, incorporando contenidos provenientes del campesinado, para permitir que sus conocimientos ingresen a la Universidad. Consideramos que la Soberanía Alimentaria, que aboga por el derecho de los pueblos a definir libremente sus políticas, prácticas, estrategias de producción, distribución y consumo de alimentos, requiere para su tratamiento de la valorización de los conocimientos que quienes producen alimentos tienen sobre la tierra, el agua y las semillas, ya que esos saberes están al servicio de una alimentación sana, segura y soberana para los pueblos. El estudiantado reconoce a la cátedra como un espacio de diálogo, de intercambio de opiniones respetuoso, crítico y de confianza, un despertar de conciencia ambiental en relación a la alimentación, y a la importancia de involucrarse activamente. Consideramos fundamental este tipo de abordaje en la formación de futuras y futuros profesionales, promoviendo la Soberanía Alimentaria, no solo en el ejercicio de su profesión, sino también en su entorno afectivo-social. La presente propuesta pone en vinculación el currículum universitario con las problemáticas socio-ambientales y refuerza el objetivo de formar ciudadanía responsable, comprometida y activa.Especialización en Docencia UniversitariaFacultad de Ciencias Médica

Invasive breast cancer in Argentine women: Association between risk and prognostic factors with antigens of a peptidic and carbohydrate nature

Objective: In breast cancer, several tumor markers have been identified. The marker most extensively associated with breast cancer is MUC1. The objective of the study was to analyze prognostic and risk factors in relation to tumor markers in order to clarify breast cancer biology. A total of 349 primary tumor samples and lymph nodes from breast cancer patients were studied. Risk and prognostic factors were considered. An immunohistochemical approach was applied and an extensive statistical analysis was performed, including frequency analysis and analysis of variance. Correlation among variables was performed with principal component analysis. Results: All the antigens showed an increased expression according to tumor size increment; moreover, sialyl Lewis x expression showed a significant increase in relation to disease stage, whereas Tn and TF presented a positive tendency. Vascular invasion was related to sialyl Lewis x expression and number of metastatic lymph nodes. Taking into account risk factors, when a patient had at least one child, Lewis antigens diminished their expression. In relation to breastfeeding, sialyl Lewis x expression diminished, although its apical expression increased. Conclusion: Associations between MUC1 and carbohydrate antigens and risk and prognostic factors show the complexity of the cellular biological behavior that these antigens modulate in breast cancer.Facultad de Ciencias Médica

Invasive breast cancer in Argentine women: Association between risk and prognostic factors with antigens of a peptidic and carbohydrate nature

Objective: In breast cancer, several tumor markers have been identified. The marker most extensively associated with breast cancer is MUC1. The objective of the study was to analyze prognostic and risk factors in relation to tumor markers in order to clarify breast cancer biology. A total of 349 primary tumor samples and lymph nodes from breast cancer patients were studied. Risk and prognostic factors were considered. An immunohistochemical approach was applied and an extensive statistical analysis was performed, including frequency analysis and analysis of variance. Correlation among variables was performed with principal component analysis. Results: All the antigens showed an increased expression according to tumor size increment; moreover, sialyl Lewis x expression showed a significant increase in relation to disease stage, whereas Tn and TF presented a positive tendency. Vascular invasion was related to sialyl Lewis x expression and number of metastatic lymph nodes. Taking into account risk factors, when a patient had at least one child, Lewis antigens diminished their expression. In relation to breastfeeding, sialyl Lewis x expression diminished, although its apical expression increased. Conclusion: Associations between MUC1 and carbohydrate antigens and risk and prognostic factors show the complexity of the cellular biological behavior that these antigens modulate in breast cancer.Facultad de Ciencias Médica

Patterns of MUC1 tissue expression defined by an Anti-MUC1 cytoplasmic tail monoclonal antibody in breast cancer

Our aim was to determine the pattern of expression of MUC1 mucin cytoplasmic tail (MUC1 CT) in breast carcinoma. A total of 98 invasive breast adenocarcinoma tumor samples were assayed by immunohistochemical (IHC) analysis. The pattern of reaction was classified as membrane, cytoplasmic, or mixed. Subcellular fractions were prepared after SDS-PAGE and Western blotting. The antibodies employed were anti-MUC1 CT (CT2 monoclonal antibody, MAb) and C595 MAb against the extracellular MUC1 core protein. With the CT2 MAb, IHC showed a high percentage of positive staining in 93% of specimens, with membrane staining the most common pattern observed. C595 MAb was reactive in 73% of specimens. Similar percentages of membrane and cytoplasmic staining were found, mainly in a mixed pattern. Western blotting showed different bands. With the CT2 MAb, the membrane fraction showed the most intense reaction; a strong band of reaction was detected at approximately <30 kD. With the C595 MAb, in most cases a double band at 200 kD was found. In breast epithelium, the pattern of MUC1 CT expression may constitute an indicator of MUC1 production because it does not depend on glycosylation. The pattern and extension of MUC1 CT positivity do not vary according to the histopathological subtype of the tumor.Facultad de Ciencias MédicasCentro de Investigaciones Inmunológicas Básicas y Aplicada

Patterns of MUC1 tissue expression defined by an Anti-MUC1 cytoplasmic tail monoclonal antibody in breast cancer

Our aim was to determine the pattern of expression of MUC1 mucin cytoplasmic tail (MUC1 CT) in breast carcinoma. A total of 98 invasive breast adenocarcinoma tumor samples were assayed by immunohistochemical (IHC) analysis. The pattern of reaction was classified as membrane, cytoplasmic, or mixed. Subcellular fractions were prepared after SDS-PAGE and Western blotting. The antibodies employed were anti-MUC1 CT (CT2 monoclonal antibody, MAb) and C595 MAb against the extracellular MUC1 core protein. With the CT2 MAb, IHC showed a high percentage of positive staining in 93% of specimens, with membrane staining the most common pattern observed. C595 MAb was reactive in 73% of specimens. Similar percentages of membrane and cytoplasmic staining were found, mainly in a mixed pattern. Western blotting showed different bands. With the CT2 MAb, the membrane fraction showed the most intense reaction; a strong band of reaction was detected at approximately <30 kD. With the C595 MAb, in most cases a double band at 200 kD was found. In breast epithelium, the pattern of MUC1 CT expression may constitute an indicator of MUC1 production because it does not depend on glycosylation. The pattern and extension of MUC1 CT positivity do not vary according to the histopathological subtype of the tumor.Facultad de Ciencias MédicasCentro de Investigaciones Inmunológicas Básicas y Aplicada

Toxocariasis encubierta autolimitada en escolares de La Plata, Argentina

Toxocariasis humana es una zoonosis parasitaria ocasionada por los estadios larvales del genero Toxocara. Los niños constituyen la población de mayor riesgo por sus hábitos lúdicos y contacto con mascotas. Esta infección puede manifestarse mediante diversos síndromes entre ellos toxocariasis encubierta que se caracteriza por evolucionar de manera oligosintomática y autolimitada, dejando anticuerpos residuales específicos.Facultad de Ciencias Médica

Toxocariasis encubierta autolimitada en escolares de La Plata, Argentina

Toxocariasis humana es una zoonosis parasitaria ocasionada por los estadios larvales del genero Toxocara. Los niños constituyen la población de mayor riesgo por sus hábitos lúdicos y contacto con mascotas. Esta infección puede manifestarse mediante diversos síndromes entre ellos toxocariasis encubierta que se caracteriza por evolucionar de manera oligosintomática y autolimitada, dejando anticuerpos residuales específicos.Facultad de Ciencias Médica

Estudio de la respuesta inmunomoduladora en el cáncer de mama

El cáncer de mama es considerado una entidad heterogénea que presenta diferencias moleculares que se relacionan con el pronóstico de las pacientes. El cáncer de mama se clasifica según la expresión de los receptores de estrógeno (RE), receptor de progesterona (RP), Her2-neu, citoqueratinas, entre otros marcadores; la mutación de p53 y el porcentaje de expresión ki67 se consideran también indicadores de pronóstico. Por otra parte, la capacidad de invasión y metástasis tumoral depende de las características propias del tumor así como de la respuesta inmune de cada paciente. Uno de los mecanismos de evasión tumoral involucra a la Indolamino-2,3- dioxigenasa (IDO), una enzima de 42-45 kD que cataliza el paso limitante de la degradación del triptofano en la vía de la quinureína. Hay evidencias que sugieren que IDO tiene un rol en la supervivencia de los tumores ya que restringe la vigilancia inmunológica del hospedador. Este efecto estaría mediado por la inhibición de las células T activadas para ejercer su efecto citotóxico sobre las células tumorales. Asimismo, IDO actúa incrementando la actividad supresora de los linfocitos T regulatorios CD4+ CD25+ Foxp3+ (Treg) ya que está implicada en su inducción.Facultad de Ciencias Médica