Interferon gamma based tests as a new tool in diagnosis of latent tuberculosis

Despite increasing advances in the diagnostics and treatment of tuberculosis (TB) [...

The immunological and molecular diagnostics of respiratory tract infections

Diagnostyka laboratoryjna zakażeń górnych i dolnych dróg oddechowych opiera się na metodach konwencjonalnych oraz nowoczesnych metodach biologii molekularnej. Serologia odgrywa ważną rolę w rozpoznawaniu niektórych zakażeń o etiologii wirusowej i w diagnostyce zakażeń drobnoustrojami atypowymi. Metody serologiczne nie są jednak przydatne w diagnostyce zakażeń u małych dzieci oraz u osób w immunosupresji. W przypadku patogenów niewykrywalnych metodami konwencjonalnymi oraz zakażeń o ciężkim przebiegu, zagrażających życiu, metody molekularne mają duże znaczenie. Pneumonol. Alergol. Pol. 2011; 79, 6: 446–453Diagnostic strategies in upper and lower respiratory tract infections include conventional procedures and the new molecular tools. Serology plays a role in certain viral and atypical infections of lower respiratory track but is not reliable in small children and in immunocompromised subjects. Antigen detection can be also carried out. If a potential pathogen is non detectable by simply assay or in severe or complicated lower respiratory tract infections, the use of molecular tools is highly indicated. Pneumonol. Alergol. Pol. 2011; 79, 6: 446–45

Immunopathogenesis of idiopathic pulmonary fibrosis

Praca jest przeglądem nowoczesnej wiedzy dotyczącej patogenezy samoistnego włóknienia płuc (IPF). Zarówno przyczyna jak i patogeneza IPF są niewyjaśnione, nie istnieje spójna teoria tłumacząca przyczynę choroby. Kluczowymi elementami patogenezy IPF są: uszkodzenie komórek nabłonka pęcherzyków płucnych i dysregulacja lub zmiana fenotypu fibroblastów Obecnie uznana hipoteza głosi, że samoistne włóknienie płuc jest niezależne od zjawiska zapalenia i jest wynikiem nieprawidłowej interakcji pomiędzy komórkami nabłonka a mezenchymą oraz zaburzonego gojenia przewlekłych uszkodzeń nabłonka pęcherzyków. Nieprawidłowa jest również funkcja oddechowych komórek macierzystych i innych komórek progenitorowych rezydujących w dystalnych częściach płuc. Sugeruje się, że u chorych na IPF istnieje defekt genetyczny powodujący szybsze skracanie długości telomerów, co jest przyczyną ograniczonych zdolności tkanki płucnej do odnowy. W myśl współczesnej wiedzy IPF jest chorobą o bardzo złożonej, wieloczynnikowej etiopatogenezie i jest zainicjowane przez cykl urazów i patologicznej odnowy powtarzających się wielokrotnie.The paper presents the state of the art in the pathogenesis of idiopathic pulmonary fibrosis (IPF). Both, etiology and pathogenesis of IPF are unclear. The key elements in the pathogenesis of the disease are epithelial destruction and dysregulation of the phenotype of lung fibroblasts. Currently accepted hypothesis claims that IPF is not related to underlying inflammatory state but it is rather a result of pathological interaction between pulmonary epithelium and mesenchyme followed by disturbed healing of damaged alveolar epithelial cells. The function of lung progenitor cells residing in distant lung structures is also impaired. Some scientists claim that genetic defect causes fast shortening of telomeres reducing lung properties of regeneration. According to the current knowledge, IFP is a multifactorial disease resulting from a repeated cycle of injuries followed by pathological regeneration

The influence of sublingual immunotherapy on several parameters of immunological response in children suffering from atopic asthma and allergic rhinitis depending on asthma features

Wstęp: Kliniczna skuteczność immunoterapii podjęzykowej została już gruntowanie potwierdzona i udokumentowana. Badano również jej wpływ na układ odpornościowy chorych na astmę oskrzelową. J ednak do tej pory nie wyjaśniono zależności pomiędzy występowaniem alergii wieloważnej, współwystępowaniem innych chorób alergicznych i stopniem terapii astmy a wpływem prowadzonej alergenowo-swoistej immunoterapii podjęzykowej. Celem niniejszej pracy była ocena wpływu rocznej immunoterapii podjęzykowej na wybrane parametry odpowiedzi immunologicznej w zależności od cech osobniczych i klinicznych cech choroby u pacjentów chorych na astmę i alergiczny nieżyt nosa.Materiał i metody: Do badania zakwalifikowano 25 dzieci w wieku 8,1 ± 3,1 roku (5–15 lat), 21 chłopców i 4 dziewczynki, chorych na astmę oskrzelową i alergiczny nieżyt nosa z alergiami poliwalentnymi sezonowymi i niesezonowymi, które były zakwalifikowane do alergenowo-swoistej immunoterapii podjęzykowej. Odsetek limfocytów pomocniczych Th1 i Th2, ekspresję antygenu Bcl-2 w limfocytach T oraz aktywację bazofilów pod wpływem swoistych alergenów (zawiesiny antygenów roztoczy kurzu domowego i/lub pyłków traw do testów skórnych) badano metodą cytometrii przepływowej. Z ależności pomiędzy badanymi parametrami oceniano dokładnym testem Fishera.Wyniki: Nie zaobserwowano istotnych zależności pomiędzy wpływem immunoterapii podjęzykowej na układ odpornościowy pacjentów a wiekiem, występowaniem alergii wieloważnej, stopniem terapii astmy i współwystępowaniem innych chorób alergicznych. Wzrost odsetka limfocytów pomocniczych Th1 pod wpływem immunoterapii podjęzykowej obserwowano nieco częściej u dzieci uczulonych na więcej niż 3 alergeny niż u pozostałych.Wnioski: Na podstawie badań przeprowadzonych przez autorów pracy nie można wskazać żadnej grupy pacjentów, u których można się spodziewać silniejszej mobilizacji układu odpornościowego jako odpowiedzi na prowadzoną immunoterapię podjęzykową u dzieci chorych na astmę i alergiczny nieżyt nosa. Wzrost odsetka limfocytów pomocniczych Th1 może występować częściej u dzieci z alergią poliwalentną.Introduction: The clinical efficacy of sublingual immunotherapy (SLIT) has already been proven and is known to be high. Its influence on the immunological system of patients suffering from bronchial asthma was also examined. However, it is still unclear how the polysensitisation, coexistence of other atopic disease and asthma treatment step influence the response to treatment with specific immunotherapy. Herein we evaluate the impact of one-year SLIT on selected markers of immunological response depending on different individual and clinical factors of children suffering from atopic asthma and allergic rhinitis.Material and methods: Twenty-five patients aged 8.1 ± 3.1 years (range 5–15 years), 21 boys and 4 girls, suffering from asthma and allergic rhinitis with polysensitisation to seasonal and non-seasonal allergens, shortlisted for SLIT, were included in the study. Th1 cell and Th2 cell percentages, Bcl-2 expression in T cells, and basophil activation after allergen challenge (house dust mite and/or grass pollen antigen in solution used for skin prick tests) in peripheral blood were measured using flow cytometry. The association between clinical features of asthma and the influence of SLIT on immunological parameters was evaluated with exact Fisher test.Results: No association between the influence of one-year sublingual immunotherapy on immunological system and patients’ age, polysensitisation, asthma treatment step, or coexistence of any other atopic diseases was observed. However, an increase of the Th1 percentage in children sensitised against more than three allergens was found more often (at the limit of statistical significance) than in the group of children sensitised against three or less allergens.Conclusions: Based on our results, we cannot point to any subgroup isolated in the study, in which the response of the immunological system to sublingual immunotherapy is more satisfactory than any other. Nevertheless, the increase of Th1 cells may be more specific for polysensitised children

Cytometryczna ocena aktywacji bazofilów w diagnostyce chorób alergicznych

W ciągu ostatnich lat znacznie wzrosła zapadalność na choroby alergiczne. "Złotym standardem" w diagnostyce tych chorób są testy skórne, jednak podczas ich wykonywania zdarzają się przypadki zagrażających życiu odczynów anafilaktycznych. W niektórych więc sytuacjach alternatywą dla badań tradycyjnych są metody diagnostyki alergii in vitro, w tym cytometria przepływowa. U osoby z atopią po kontakcie z alergenem dochodzi do aktywacji bazofilów i wzrostu ekspresji na ich powierzchni antygenów CD63 i CD203c. Markery te można oznaczać metodą cytometrii przepływowej za pomocą skierowanych przeciwko nim przeciwciał monoklonalnych sprzężonych z fluorochromami po stymulacji in vitro komórek krwi obwodowej. Chociaż metoda ta jest kosztowna i wymaga użycia specjalistycznego sprzętu, to jest jednak dobrym narzędziem diagnostycznym w przypadku tych chorych, u których wykonanie testów skórnych wiąże się z dużym ryzykiem wystąpienia powikłań.For several years the incidences of allergic diseases and anaphylactic reactions have been increasing dramatically. Classical method of allergy diagnosis - skin prick test in some situations can provoke life-threatening reactions. Detection of allergen-induced basophil activation by flow cytometry has been shown to be a useful tool for allergy diagnosis in those patients. CD 63 and CD203c have recently been demonstrated as a specific activation markers of basophils that are rapidly up-regulated after allergen challenge in sensitized patients. Although flow-cytometry methods are quite sophisticated and expensive, it could be a good alternative in patients at risk of severe anaphylactic reactions or with contradictory test results

The activity of granulocytes in children with recurrent infections of respiratory tract

Acute upper respiratory tract infection (URTI) is a common disease in young children. URTI contributes to approximately 20% of mortality in children younger than 5 years of age. Infections of the upper respiratory tract are the most common cause of viral morbidity in children. They represent the most frequent problem in general pediatric practice and are responsible for more than one third of school absences. On the other hand respiratory tract infections through MALT system play a positive role in maturation and development of immune system. Many different immunologic disturbances can occur during the development of respiratory infections. Disorders of granulocyte functions are the principal cause of inflammation in the upper respiratory tract. Chemiluminescence of granulocytes is a renowned method for the estimation their overall activity as measured by the production of reactive oxygen species. The goal of the study was to evaluate chemiluminescent activity of granulocytes from 41 children with recurrent infections of the respiratory tract compared to 30 healthy children. Chemiluminescent response to all the examined stimuli in children with recurrent infections was significantly lower compared to control. In the examined group of 41 children depressed response to at least 1 stimulus was detected in 32 (78%) cases. The use of both fMLP and opsonised zymosan allowed to detect defect of granulocyte function in 93,75% cases. This defect may be related to delayed maturation of the immune system in certain children or may be induced by intensive therapy with antibiotics. Pneumonol. Alergol. Pol. 2005, 73, 160-166

Methods of estimating concentration of the D-dimers used in venous thromboembolism diagnosis

D-dimery (DD) to produkty degradacji stabilnej fibryny. Podwyższone stężenie DD wskazuje na wzmożoną aktywację procesów krzepnięcia i fibrynolizy. Jako parametr diagnostyczny znalazły zastosowanie między innymi w diagnostyce zakrzepicy żył głębokich oraz zatorowości płucnej. Wszystkie metody oznaczania DD bazują na wykorzystaniu przeciwciał przeciwko D-dimerom. Można wyróżnić trzy podstawowe zasady oznaczania, które opierają się na: metodach lateksowych, metodach aglutynacji pełnej krwi, oraz najpowszechniej stosowanych metodach immunoenzymatycznych. Obecnie w fazie badań jest metoda posługująca się D-dimerami w diagnostyce in vivo, wykorzystująca przeciwciała przeciwko D-dimerom znakowane izotopem technetu.D-dimers (DD) are final products of stabilized fibrin degradation process. Elevated level of DD indicates parallel activation of both coagulation and fibrinolysis. D-dimers play important role in the diagnosis of deep vein thrombosis and pulmonary embolism. All diagnostic methods detecting DD are based on monoclonal antibodies. There are three basic techniques used to measure DD: latex agglutination, full blood agglutination and immunoenzymatic methods. Nowadays new methods based on in vivo detection of DD using antibodies labeled with technetium are under clinical evaluation

Lymphocytes sensitivity to Fas stimulation in healthy and asthmatic children.

The T cell hypothesis of asthma is based on the concept that the disease is driven and maintained by the persistence of a specialized subset of chronically activated T memory cells sensitized against an array of allergenic, occupational or viral antigens. Overreaction of CD4+ T cells in the peripheral blood and airway tissues is an invariant feature of asthma; therefore a potent mechanism for augmenting the number of activated T cells in this disease would be the resistance to the normally programmed pathway for cell death. The aim of the study was to evaluate the presence of apoptotic markers on peripheral blood lymphocytes from healthy and asthmatic children before and after stimulation with antiCD95 antibodies. The blood was collected from 21 children with atopic asthma suffering from allergic rhinitis because of house dust mite and/or grass pollen allergens and 8 healthy children matched for their age and sex. Blood was mixed with purified monoclonal antibody antiCD95 (Beckman Coulter), incubated for 24 hours and than stained with Annexin V andPI (Becton Dickinson). Prepared suspensions were analyzed with Cytomics FC 500 (Beckman Coulter) flow cytometer. Annexin V(+)/PI(-) cells were characterized as early apoptotic, Annexin V(+)/PI(+) as late apoptotic and Annexin V(-)/PI(+) as dead. In unstimulated sample from asthmatic children 21.09+/-11.20% cells were characterized as Annexin V positive/PI negative. After stimulation with antiCD95 Annexin V positive/PI negative cells constituted 18.72+/-9.42% of cells, p=0.1. In unstimulated sample from healthy children 11.69+/-6.70% cells were characterized as Annexin V positive/PI negative. In the sample stimulated with antiCD95 16.54+/-2.98% of cells were Annexin V positive/PI negative, p=0.02. There were no differences between results of late apoptotic and necrotic lymphocytes from healthy and asthmatic children. Performed research indicates that lymphocytes from asthmatic children are resistant to Fas mediated apoptosis