Mycorrhiza-like structures in rooted microshoots of Pinus pinea L.

Pinus pinea L. (stone pine) is one of the major plantation species in Iberian Peninsula, being Portugal the largest edible seed producer in the world. The induction and improvement of in vitro rhizogenesis of microshoots of Pinus pinea was developed in our laboratory using a co-culture system with ECM fungi. In the acclimation phase in mixed substrates, or in rhizotrons, anatomical and morphological studies were done to observe the evolution of the root system in microshoots from the co-culture system vs. control plants. Extensive dichotomous and coralloid branching of lateral roots occurred spontaneously in inoculated and control plants as well. Moreover, similar branching occurred in liquid culture of excised seedling roots without the presence of ECM fungi. The striking similarity of these organs with pine ectomycorrhizas prompted their anatomical analysis; however the presence of Hartig net was not confirmed. These results suggested that the development of ECM-like structures might have occurred spontaneously

Sistema e método de cultura de plantas in vitro para análise de metabolitos libertados pelo sistema radicular

O presente invento diz respeito ao desenvolvimento de um sistema e método de cultura in vitro (1,2) constituído por duas fases, uma sólida (3,4,5) e uma líquida (6), a primeira para suporte da planta (7,8) e a segunda para permitir a análise do meio circundante das raízes (9). Este sistema foi desenhado para permitir uma fácil extracção dos compostos metabólicos libertados/difundidos na fase líquida durante o crescimento radicular, de forma a facilitar o seu posterior processamento e caracterização bioquímica. Tendo em conta que um crescimento radicular correcto é um dos factores fundamentais para o posterior fortalecimento e estabelecimento das plantas no campo, a determinação das substâncias bioquímicas responsáveis pelo melhor desempenho da planta poderá conduzir a sua síntese artificial e implementação como aditivo para adubos orgânicos. Tratando-de de um sistema fechado com variáveis conhecidas, este poderá ser aplicado em ensaios com pesticidas, herbicidas e outros produtos similare

Juniperus navicularis Gand - contributos para a sua conservação

Juniperus navicularis Gand. (piorro) é uma conífera endémica portuguesa que constitui frequentemente sub-bosque dos pinhais nas areias de transição de pliocénicas para plistocénicas da região litoral a -sul do Tejo. O objectivo deste trabalho é verificar as localizações documentadas em herbário para esta espécie, avaliando o estado de conservação através do estudo da8 populações, assim como estabelecer um protocolo laboratorial para a multiplicação in vitro. Das 12 populações identificadas, amostraram-se 4 com distintas características em termos de conservação. Medições espaciais e morfológicas dos indivíduos foram realizadas in situ. Realizaram-se ensaios de germinação de sementes e foram testadas diversas combinações meio/hormona em multiplicação e enraizamento. Diferentes estados de conservação resultam em diferentes morfótipos individuais, tanto ao nível da estrutura como em termos de distribuição sexual e recrutamento de novas plantas. Apesar das dificuldades no enraizamento, foram multiplicados rebentos desta espécie in vitro obtendo-se taxas satisfatórias para a conservação artificial da espécie. ABSTRACT: Juniperus navicularis Gand. (piorro) is a Portuguese endemic conifer that constitutes the understory of pine forests in the plisto-pliocénic transition sands of the seaside region of SW Portugal. The main objective of this work is to verify documented locations in national herbariums, examining its conservation status through individual studies, as well as establishing a laboratorial protocol for in vitro multiplication. From the 12 identified populations, 4 were sampled for their distinct characteristics in terms of conservation status. Spatial and morphological measurements were made in situ. Seed germination essays were made and several medium/hormone combinations were tested in plant multiplication and rooting. Different conservation degrees result in visible differences on individual morphotypes, both structurally and in terms of sexual distribution and new plants recruitment. Despite the rooting difficulties, juniper shoots were multiplied in vitro, achieving quite satisfactory rates for the artificial conservation of this species

A Novelty System for Biotization of Plant Microshoots and Collection of Natural Compounds

An in vitro plant microshoot culture system composed of two phases; a liquid phase overlaid by a floating solid phase, which is described in detail herein. This system is designed to enable the extraction of natural compounds released/disseminated into the liquid phase during root growth, thus facilitating their processing and biochemical characterization. The solid phase holds the plant afloat and enables the simultaneous culture of a microorganism, yet avoiding its penetration into the liquid phase, where the roots are submerged. Both phases can be independently formulated as required for growth optimization of both organisms. Considering the closed system and known variables described in this patent, applications of the described method include testing with pesticides, herbicides, and other similar products