Chronic myeloid Leukemia (cml) : study of the autophagy role in the erythroleuceic cells chemotherapy resistance

Alteraciones en un proceso normal de diferenciación y maduración, como es la hematopoyesis, pueden conducir a situaciones de sobreproducción de células hematopoyéticas, como las leucemias. La autofagia, es considerada como un mecanismo por el cual macromoléculas citosólicas e incluso organelas enteras, son secuestradas en estructuras membranosas que son transportadas a los lisosomas para su degradación. La autofagia ha sido asociada a la diferenciación de algunos tipos celulares, como los reticulocitos, ya que es necesario el remodelamiento y la eliminación de ciertas estructuras internas. Además, las células leucémicas poseen altos niveles de autofagia basal, lo que le permite sobrevivir en condiciones adversas e incluso generar resistencia a las drogas quimioterápicas. Resultados recientes, han demostrado que la estimulación de los mecanismos de maduración eritroide, por un compuesto natural como es la hemina, es capaz de estimular tanto la síntesis de hemoglobina, como así también la expresión de proteínas autofágicas, induciendo la autofagia en células K562 (línea celular eritroleucémica). La proteína LRP1, es un receptor transmembrana asociado principalmente con ligandos extracelulares. Su estímulo desencadena la endocitosis dependiente de clatrina, estando implicado en diferentes procesos celulares. Se ha demostrado que LRP1 es responsable de la eliminación del complejo hemina-hemopexina. Los niveles de LRP1 varía en los distintos tipos celulares, siendo prácticamente indetectables en el glóbulo rojo maduro, a diferencia de sus progenitores más inmaduros o incluso en células leucémicas. Nuestros resultados muestran que la incubación de eritroblastos leucémicos (células k562) en presencia de hemina o resveratrol (inductor farmacológico de la autofagia) producen un marcado aumento de los niveles de expresión de la proteína LRP1. Esto nos estaría sugiriendo fuertemente que LRP1 podría estar involucrado en la estimulación de la autofagia, por hemina, en células eritroleucémicas. Nuestro proyecto, busca establecer los mecanismos celulares y moleculares de la vía autofágica mediada por LRP1 que participan durante el proceso de maduración eritroide y la sobrevida de células leucémicas.Alterations in a normal process of differentiation and maturation, such as hematopoiesis, can lead to situations of overproduction of hematopoietic cells, such as leukemia. Autophagy is considered as a mechanism by which macromolecules and even whole organelles are sequestered in membranous structures which can fuse to lysosomes for degradation. Autophagy has been associated with the differentiation of some cell types, such as reticulocytes, which requires the remodeling and elimination of certain internal structures. In addition, leukemic cells are associated with high levels of autophagy, which allow them to survive in adverse conditions and even generate resistance to chemotherapeutic drugs. New results have shown that the stimulation of the mechanisms of maturation, by a natural compound such as hemin, is able to express both the synthesis of hemoglobin, as well as the expression of autophagic proteins, inducing autophagy in K562 cells (erythroleukemic cell line) . The LRP1 protein is a transmembrane receptor associated with extracellular ligands, which is involved in different cellular processes. It has been shown that LRP1 is responsible for the elimination of the heme-hemopexin complex. The levels of LRP1 differ in the different cell types, being undetectable in the mature blood cell network, unlike their immature progenitors or even in the leukemic cells. Our results show that incubation of leukemic erythroblasts (k562 cells) in the presence of hemin or resveratrol (pharmacological inducer of autophagy) produces a marked increase in the expression levels of LRP1 protein. This means that it could be involved in the estimation of autophagy, by hemin, in erythroleukemic cells. Our project aims to establish the cellular and molecular mechanisms of the autophagic pathway, mediated by LRP1, that participate during the process of erythroid maturation and the survival of leukemic cells

Platelet rich plasma (PRP) induces autophagy in osteoblast precursor 3T3-L1

Autophagy is an essential cellular homeostatic mechanism by which intracellular components are delivered into the lysosomes for degradation and recycling. Autophagy has been related with a diversity of pathological or physiological dentary processes such as bone remodeling, skeletal aging, osteoclastogenesis, osteoblastogenesis and different types of oral cancer. Platelet-rich plasma (PRP), isolated from autologous blood, is a plasma preparation containing a higher concentration of platelets which contains numerous different growth factors and cytokines that activate several cellular signaling cascades. The purpose of this study is to investigate the effect of PRP on autophagy stimulation in both osteoblast precursor 3T3-L1 and non-related osteoblastic cells. Our results showed that PRP can increase the number of autophagic structures in 3T3-L1 and HeLa (cervical cancer cells) cells. Moreover, we have determined by Western blot a rise in the lipidated form of the autophagic protein LC3 (i.e. LC3-II) upon PRP treatment. Taken together, our results suggest that PRP is able to induce a strongly autophagy response in osteoblast precursor and, to a lesser extent, in non-related osteoblastic cells, suggesting that PRP could be a potential therapeutic tool for some autophagy-related diseases associated with bone homeostasis.Fil: Carminati, Sergio Andrés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Barbosa, María Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Fader Kaiser, Claudio Marcelo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

Methodology of umbilical cord stem cells obtention and their potential use in dentistry and hematology

Las posibles aplicaciones terapéuticas de las células madre estromales mesenquimales (MSC) han despertado un gran interés en el campo de la ingeniería biomédica como terapia regenerativa. Las MSC son células madre adultas multipotentes que poseen un alto potencial de diferenciación, baja inmunogenicidad, propiedades inmunomoduladoras y capacidad de expansión in vitro eficiente. Las células madre derivadas de cordón umbilical humano (hUC-MSC) pueden diferenciarse a otros tipos celulares y ser utilizadas con fines terapéuticos. En este trabajo mostramos la metodología a través de la cual obtuvimos hUC-MSC, con la finalidad de diferenciarlas dentro del linaje eritropoyético. Así mismo, evaluamos y discutimos el potencial de estas hUC-MSC, en la diferenciación osteoblástica y su aplicación en la práctica odontológica.The possible therapeutic applications of mesenchymal stromal stem cells (MSC) have aroused great interest in the field of biomedical engineering, such as regenerative therapy. MSC´s are multipotent adult stem cells that have a high potential for differentiation, low immunogenicity, immunomodulatory properties and efficient in vitro expandability. Stem cells derived from human umbilical cord (hUC-MSC) can be differentiated into other cell types and may be used for therapeutic purposes. In this work we show the methodology by which we obtained hUC-MSC, in order to differentiate them within the erythropoietic lineage. Likewise, we evaluate and discuss the potential of these hUC-MSC, in osteoblastic differentiation and its application in dental practice.Fil: García Sanmartino, Clara. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de OdontologíaFil: Carminati, Sergio Andrés . Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias MédicasFil: Aguilera, Milton Osmar. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histologia y Embriología Mendoza. "Dr. Mario H. Burgos"Fil: Moras, M.. Paris Diderot University (France). Integrated Biology of Red Blood CellsFil: Ostuni, M. A.. Paris Diderot University (France). Integrated Biology of Red Blood CellsFil: Fader Kaiser, Claudio. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histologia y Embriología Mendoza. "Dr. Mario H. Burgos