Isolation of lytic bacteriophages of Enterococcus faecalis in wastewater samples

Antecedentes: Enterococcus faecalis está asociado al fracaso del tratamiento de endodoncia por su rol y capacidad de desarrollar una biopelícula en dentina, presentando resistencia al hipoclorito de sodio en diferentes concentraciones,sustancia utilizada en el proceso de irrigación, y al hidróxido de calcio utilizado como medicamento intraconducto; esta resistencia aumenta a medida que la biopelícula madura, contribuyendo al papel predominante Enterococcus faecalis en las infecciones periapicales persistentes. La dificultad en el tratamiento contra Enteroccocus faecalis se ha atribuido a la falta de estrategias para evitar la formación de biopelícula y erradicarla. En la búsqueda de otras estrategias de tratamiento, se han probado fagos tipo bacteriófagos capaces de incapacitar a las bacterias formadoras de biopelícula, o a la prevención de la proliferación bacteriana por medio de su lisis. Objetivo: Detectar fagos líticos contra Enterococcus faecalis en muestras de aguas del río Bogotá. Métodos: Se realizó un estudio descriptivo experimental de corte transversal y de carácter cualitativo, aplicando un muestreo por conveniencia para buscar fagos con capacidad lítica. Se utilizó el método de doble capa de agar, y se ensayaron 10 cepas de Enteroccocus faecalis de origen endodóntico provenientes de un estudio previo (cada una por triplicado), con 5 muestras de agua provenientes de la Cuenca baja fuente el Muña, y 5 muestras de agua provenientes de la cuenca media fuente el Cortijo. Además, se realizaron ensayos para evaluar la capacidad lítica frente a cepas control de la especie en estudio como:Enterococcus faecalis ATCC 29212 y Enterococcus faecalis ATCC 700802, y de otras especies que se encuentran en boca como: Staphylococcus aureus ATCC 29213, Escherichia coli ATCC 25922, Streptococcus mutans ATCC 25175, Leptotrichia bucalis ATCC 14201. Resultados: En la cuenca media, no se encontraron fagos líticos contra las muestras de Enteroccocus faecalis ni contra las cepas ATCC de control utilizadas. En la cuenca baja los ensayos permitieron observar fagos líticos contra dos de las cepas de Enteroccocus faecalis evaluadas, fagos que lisaron cepas de Staphylococcus aureus ATCC 29213, y Streptococcus mutans ATCC 25175. Conclusión: Los fagos encontrados no son específicos, se considera que son de amplio espectro, pero dado que solo lisaron bacterias Gram positivas, probablemente es un fago que actúa sobre ácido teicoico que es la molécula normal de adherencia de fagos contra bacterias Gram positivas.Background: Enteroccocus faecalis is associated with treatment failure due to its ability to develop a biofilm in dentin, presenting resistance to sodium hypochlorite in different concentrations as a substance used in the irrigation process and to calcium hydroxide used as an intracanal medication, this resistance increases as the biofilm matures, contributing to the predominant role of Enteroccocus faecalis in persistent periapical infections. The difficulty in treatment against Enteroccocus faecalis has been attributed to the lack of strategies to prevent biofilm formation and eradicate it. In the search for other treatment strategies, bacteriophages have been tested capable of incapacitating biofilm-forming bacteria, or the prevention of bacterial proliferation through its lysis. Purpose: Detect lytic phages against Enteroccocus faecalis in water samples from the Bogotá river. Methods: An experimental descriptive cross-sectional study was carried out, and of a qualitative nature, applying convenience sampling to search for phages with lytic capacity. The double agar layer 28 method was used, and 10 strains of Enteroccocus faecalis of endodontic origin from a previous study were tested (each in triplicate), with 5 water samples from the lower Muña source Basin, and 5 water samples from the El Cortijo half source basin. In addition, trials were conducted to evaluate the lytic capacity against control strains of the species under study, such as Enterococcus faecalis ATCC 29212 y Enterococcus faecalis ATCC 700802, and other species found in the mouth such as Staphylococcus aureus (ATCC 29213), Escherichia coli (ATCC 25922), Streptococcus mutans (ATCC 25175), Leptotrichia bucalis (ATCC 14201). Results: In the middle basin the tests carried out were negative for all strains tested and no lytic phage were found against the Enteroccocus faecalis samples or against the control ATCC strains used. In the lower basin the tests allowed to observe that in two of the samples of Enteroccocus faecalis evaluated lytic phages were found. Staphylococcus aureus (ATCC 29213), y Streptococcus mutans (ATCC 25175). Phage lysed ATCC strains Staphylococcus aureus (ATCC 29213), y Streptococcus mutans (ATCC 25175). Conclusion: The phages found are not specific, they are considered to be broad spectrum, but since they only lysed Gram positive bacteria, it is probably a phage that acts on teicoic acid that is the normal molecule of phage-positive phage adhesion.Especialista en EndodonciaEspecializació