Fungicidas y Bactericidas de microorganismos de suelo

114 p.El presente estudio aborda el aislamiento biodirigido de compuestos antimicrobianos provenientes del metabolismo secundario de hongos de suelo. La evaluación de la actividad fungicida y bactericida de extractos provenientes del cultivo líquido de 50 hongos obtenidos desde muestras de suelo, permitió seleccionar extractos de cuatro especies bioactivas: (Aspergillus terreus, Penicillium janckzewskii, Acremonium potronii y Penicillium novae-zeelandiae), las cuales fueron sometidas a un estudio químico biodirigido. El objetivo de esta tesis fue obtener compuestos naturales inhibidores del crecimiento de microorganismos fitopatógenos y de baja toxicidad a organismos no objetivo; con prospección a ser usados como modelo en el desarrollo de biopesticidas. Los resultados obtenidos en esta tesis muestran el aislamiento, elucidación estructural y actividad biológica de los compuestos bioactivos de Aspergillus terreus Thorn. var. terreus y Penicilliun janckzewskii K.M. Zaleski. El mismo trabajo se realizó con Acremonium potronii Vuill y Penicillium novae-zeelandiae van Beyma, sin llegar a la elucidación de la estructura de los compuestos aislados, debido a limitantes en la obtención de biomasa de extractos y compuestos. Aspergillus terreus Thorn. var. terreus, proveniente de suelo colectado en Riobamba, Ecuador; fue cultivado en medio sólido y líquido, produciendo tres compuestos bioactivos: ácido terréico, butirolactona y lovastatina. Estos productos naturales y tres derivados semisintéticos de butirolactona I fueron evaluados como inhibidores del crecimiento del hongo Botrytis cinerea y de las bacterias Erwinia carotovora y Pseudomonas syringae

Estudio químico y biológico de especies del género Azorella

143 p.El presente estudio tuvo por finalidad aislar e identificar los metabolitos mayoritarios a partir de algunas plantas del género Azorella, (A.spinosa, A. madreporica) cuyas especies forman parte de la familia Apiaceae, además de obtener derivados semisintéticos en la medida que fue posible y probar la actividad biológica de estos compuestos. Investigaciones realizadas en otros géneros de Azorella han permitido la identificación de varios compuestos diterpenicos del tipo azorellano y mulinano, algunos de estos diterpenos han sido responsables de distintas actividades biológicas, tales como antibacteriana, antiinflamatoria, inhibición de la acetilcolinesterasa, entre otras. El estudio químico de las partes aéreas de la especie A. spinosa permitió aislar diterpenos, un triterpeno, cumarina e isoflavonas. A partir del extracto etéreo fueron aislados cuatro diterpenos dos de ellos reportados previamente en literatura, en otras especies 13α-hidroxiazorellano, ácido mulinólico y dos compuestos nuevos 2-acetoxi-13-hidroxi-mulin-11-eno, 2-acetoxi-mulin-11,13-dieno, a partir de 2-acetoxi-13-hidroxi-mulin-11-eno se obtuvo el compuesto hidrolizado 2,13-dihidroxi-mulin-11-eno. Por otra parte del extracto metanólico se aisló un triterpeno, que resulto ser la lactona del ácido ursólico siendo este compuesto nuevo en esta especie pero ya reportado en otras plantas, de este mismo extracto se aisló quercetina y 7-hidroxicumarina.A partir del estudio químico de la A. madreporica fueron aisladas tres isoflavonas las cuales corresponden a alpinumisoflavona, licoisoflavona A y angustona C, compuestos reportados por primera vez en esta especie. A partir de la alpinumisoflavona se obtuvo el derivado diacetilado 4´,4´´-diacetoxi-alpinumisoflavona y de la acetilación de licoisoflavona se obtuvo el derivado monoacetilado 7-acetoxi-licoisoflavona A. Todos los compuestos aislados que resultaron ser nuevos o informados por primera vez en estas especies, como también los derivados semisintéticos preparados, fueron evaluados mediante el ensayo de microdilución en microplacas como agentes antibacterianos frente a Escherichia coli, Acinetobacter baumanni, Pseudomonas aeuroginosa y Staphilococcus aureus. Solo las isoflavonas alpinumisoflavona y licoisoflavona A fueron activas y selectivos sobre E. coli. Los diterpenos 2-acetoxi-13-hidroxi-mulin-11-eno, 2-acetoxi-mulin-11,13-dieno y el derivado 2,13-dihidroxi-mulin-11-eno, fueron evaluados en el ensayo de inhibición de la enzima acetilcolinesterasa (AChE) y la butirilcolinesterasa (BuChE) y sobre la actividad antioxidante empleando el ensayo DPPH. Por otro lado, el extracto metanólico de A. spinosa recolectada en la zona de Constitución (Región del Maule) y tres extractos metanólicos de A. monantha recolectadas en tres localidades distintas Paso Vergara y Enladrillado (Región del Maule), y Torres del Paine (Región de Magallanes) se evaluaron sobre todas las actividades biológicas anteriormente descritas, incluyendo la actividad antiplaquetaria, siendo los extractos de A. spinosa y A. monantha (Paso Vergara) las que mostraron mejores resultados./ABSTRACT: The aim of this study was to isolate and to identify the main metabolites from some plants of the Azorella (A.spinosa, A. madreporica) genre whose species are part of the Apiaceae family. Also, this study helped to obtain semisynthetic derivatives as possible as far and to test the biological activity of these compounds. Research in other Azorella genres have allowed the identification of several diterpene compounds of the mulinane and azorellane type. Some of these diterpenes have been responsible of the various biological activities such as antibacterial, anti-inflammatory, inhibition of acetylcholinesterase, and others. The chemical study of the aerial parts of the species A. spinosa allowed to isolate diterpenes, triterpenes, isoflavones and coumarin. From the ethereal extract, four diterpenes were isolated, two of them were previously reported in literature, in other species like the 13α-hydroxyazorellane and mulinolic acid, and the other two new compounds, 2-acetoxy-13-hydroxy- mulin-11-en, 2-acetoxy-mulin 11,13-diene, starting from the 2-acetoxy-13-hydroxy- mulin-11-en compound was obtained the 2,13-dihydroxy-mulin-11-en. By the other side, a triterpene was isolated from the methanol extract, which has proved to be the lactone of the ursolic acid being this a new compound in this specie but already reported in other plants. From the same extract was isolated quercetin and 7-hydroxycoumarin. From the chemical study of the A. madreprica, three isoflavones were isolated which correspond to alpinumisoflavone, angustone C and licoisoflavone A, compounds reported by the first time in this species. Starting from the alpinumisoflavone, the diacetyl derivative was obtained 4',4''-diacetoxy-alpinumisoflavoe and from the licoisoflavone acetylation, 7-acetoxy-licoisoflavone A monoacetylated derivative was obtained. All these compounds were elucidated using conventional spectroscopic techniques and by mean of the comparison with literature data. All those isolated compounds were found to be new or reported by first time in these species. Also, semisynthetic derivatives were evaluated by the microdilution in assay microplates as antibacterial against Escherichia coli, Acinetobacter baumanni, Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus. Only the alpinumisoflavone and licoisoflavone A isoflavones were active and selective over the E. coli. The diterpenes 2-acetoxy-13-hydroxy-mulin-11-en, 2-acetoxy-mulin-11,13-diene and 2,13-dihydroxy mulin-11-en derivative were evaluated in the inhibition assay of the acetylcholinesterase (AChE) enzyme and the butyrylcholinesterase (BuChE). Also, the antioxidant activity were evaluated using the DPPH assay.By the other hand, the methanolic extract of A. spinosa collected from Constitución zone (Region of Maule) and the three methanol extracts of A. monantha collected from three different locations like Paso Vergara and Enladrillado (Region of Maule), and Torres del Paine (Region of Magallanes) were evaluated on over all the biological activities described above, including antiplatelet activity, being the extracts of A. spinosa and A. monantha (Paso Vergara) that showed the best result

Determinacion de las reservas carbonadas de una esparraguera orgonica (asparagus officinalis L.) cv UC - 157 F2 con tres manejos de fertilizacion.

Resumen (Spanish, English)64 p.En el cultivo de espárragos las reservas de carbohidratos son importantes para la planta pues las utilizará para su crecimiento en la temporada siguiente. Este contenido de carbohidratos presenta fuerte variaciones en el ciclo anual del cultivo, se incrementa durante la maduración de los brotes, permanece constante durante el período de receso y disminuye hacia la cosecha. El ensayo se realizó durante la temporada 2002, en la Unidad de Producción Orgánica de Matancilla, perteneciente a la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad de Talca, ubicada en Pencahue, VII Región, Talca. Se determinaron las reservas carbonadas contenidas en los órganos de almacenaje y calidad comercial de los turiones, bajo tres manejos de fertilización orgánica utilizando el cultivar de espárragos UC-157 F2 evaluándose en dos períodos durante la temporada (receso y al terminar cosecha), en una esparraguera establecida el año 1999. En este ensayo se observó una disminución significativa en el contenido de fructanos luego de terminada la cosecha en raíces y rizomas, siendo el T2 el menor con valores de 1.5 y 4.3 g/ 100 g de materia seca respectivamente. Asimismo, el contenido de carbohidratos totales en raíces de reserva y rizoma fue menor en T2 con 13.6 y 12.8 g/ 100 g de materia seca.; además el rendimiento total y comercial fue mayor en T3 (7.32 y 6.86 ton/ha respectivamente) y T4 (6.38 y 5.88 ton/ha respectivamente). Por el contrario en brotes de descarte los tratamientos no presentaron diferencias significativas al aplicar distintos niveles de fertilización. En cuanto a la materia seca de raíces de reserva y rizomas, almidón, azúcares reductores (sacarosa, fructuosa y glucosa) no se observaron diferencias significativas entre los distintos niveles de fertilización aplicados al ensayo. Respecto a las calidades de los turiones se puede decir que en todas las categorías existieron diferencias significativas, siendo el T3 el que obtuvo los mejores resultados en los calibres jumbo, extra large, large y standard, para el calibre small no hubo diferencias significativas entre los tratamientos

Evaluacion del contenido de antioxidantes y rendimiento comercial e industrial de cultivares de brocoli (Brassica oleracea L. var. italica Plenck) producidos bajo manejo organico

Resumen (Spanish, English)La evaluación de tres cultivares de brócoli (Brassica oleracea L. var. italica Plenck), manejados de acuerdo a la Norma Internacional de Agricultura Orgánica (IFOAM), se llevó cabo en la estación experimental de Panguilemo, perteneciente a la Universidad de Talca, durante la temporada verano-otoño 2000. En el ensayo se uso un diseño de bloque completamente al azar con 4 repeticiones, utilizándose la combinación de tres variedades (Heritage, Liberty y Rainbow) y tres momentos de cosecha (1a, 2a, 3a), evaluándose el efecto entre variedad y cosecha, sobre el rendimiento comercial e industrial, desecho, parámetros de la inflorescencia central y materia seca. También, se evaluó en la inflorescencia central, después de permanecer 4 meses en almacenaje en congelado, contenido de clorofila α, β y total, β-caroteno y luteina. Los resultados se analizaron mediante el test de rango multiple Duncan al nivel de 0,05. Los resultados muestran que el cultivar Liberty es el que presento el mejor comportamiento para la agroindustria, con rendimiento comercial 9,7 ton/ha y la mejor calidad de pella, concentrándose su producción en las primeras dos cosechas. El contenido de luteina en producto congelado de brócoli, fluctuó entre 0,9 a 1,3 mg/100 g de peso fresco. Los cvs Heritage y Liberty, en producto congelado, presentaron el mayor contenido de clorofila y β-caroteno

Evaluación in vitro del efecto de metabolitos secundarios de hongos fitopatogenos y saprofitos sobre la inhibicion de la germinacion de semillas de malezas de importancia agricola

Resumen (Spanish, English)62 p.La agricultura presenta una serie de desafíos, que deben ser enfrentados a diario, para lograr una mayor productividad. Entre los problemas más serios encontramos a las malezas, las cuales por medio de una eficiente reproducción logran posicionarse en un sitial importante. Las malezas anuales presenta una gran producción de semillas, las cuales germinan dando una nueva generación, la cual daña directa o indirectamente al cultivo. El control de malezas es uno de los mayores costos dentro de los insumos usados en la agricultura, esto sin tomar en cuenta la contaminación y posible resistencia que ellos producen. Aislados de hongos fitopatógenos y saprófitos fueron cultivados en un medio líquido, los cuales fueron procesados y por medio de solventes se obtuvo una fracción soluble en acetato de etilo del medio de cultivo filtrado de cada hongo. Además se realizaron por separado bioensayos con fracciones activas obtenidas del micelio y del filtrado de cada cepa. Los extractos se evaluaron in vitro para ver el efecto de los extractos en la inhibición de las semillas de 4 malezas, además de realizar bioensayos con las fracciones activas y determinar la IC50 de las fracciones con mejores efectos. Los hongos con mejores efectos fueron la cepa 3 en Chépica Alemana (Agrostis capillaris) y Yuyo (Brassica rapa) que correspondió a Myrothecium roridum, hongo saprofito, que además de mostrar mejor efecto que el herbicida, tuvo efecto en el micelio y filtrado. Otras cepas con buenos resultados fueron la 9 (Sclerotinia sclerotiorum),10 (Trichoderma pseudokoningii), 13 (Penicillium sp), 16 (Fusarium oxysporum), 17 (Trichoderma koningii), 40 (Penicillium sp) y 43 (Botrytis cinerea) que tuvieron efecto en chépica alemana y yuyo, además de la cepa 22 (Chondrostereum purpureum) cuyo efecto dominante de inhibición abarcó las 4 malezas evaluadas

Calidad y rendimiento industrial para deshidratado de cultivares de pimenton producidos bajo manejo organico

Resumen (Spanish, English)73 p.Durante el periodo comprendido entre noviembre del 2000 y abril del 2001, en la parcela experimental de producción orgánica, perteneciente a la Universidad de Talca en la comuna de Pencahue (35° 23' lat. , 71° 50' long.), se evaluaron cuatro cultivares de pimentón Capsicum annuum var. Grossum (L. Sendt) con fines agroindustriales, para lo que se utilizo un ensayo con diseño de bloques completos al azar, con una densidad de 62500 pl/ha. Los cultivares estudiados fueron Osir F1, Correntin F1, Fyuco y Phytosun; a los que se realizaron cuatro cosechas. Las mediciones efectuadas fueron rendimiento total, comercial e industrial, color y °Brix de cada cultivar estudiado. Los resultados mostraron que Correntin F1 y Fyuco alcanzaron 69,1 y 62,4 Ton/ha de rendimiento total y 27,4 y 34,4 Ton/ha de rendimiento comercial respectivamente; en cuanto al rendimiento industrial este fluctuó entre 4,4 y 5,4%. Por otra parte, los °Brix no presentaron diferencias estadísticas entre los cultivares evaluados. Con relación al contenido de color rojo medido en unidades Lovibond, este varía de acuerdo a los momentos de cosecha, evidenciándose aumentos en los cultivares a partir de la segunda fecha de cosecha. El contenido total de pigmentos carotenoides expresados en µg/g, no vario en los cultivares estudiados. Se produjo un aumento de los rendimientos totales promedio, pero también de los desechos encontrados, concluyendo que los cultivares evaluados presentan características productivas e industriales para la zona de estudio

Contenidos de pigmentos y vitaminas C en dos momentos de siembra en cultivares de espinaca (Spinacea oleracea L.) bajo manejo organico en invernadero

Resumen (Spanish, English)61 p.La espinaca (Spinacea oleracea L.), pertenece a la familia Chenopodiaceae. En una primera fase la planta forma una roseta de hojas de duración variable según las condiciones climáticas y posteriormente emite el tallo. De las axilas de las hojas o directamente del cuello surgen pequeños tallos laterales que dan lugar a ramificaciones secundarias, en las que pueden desarrollarse flores. Existen plantas masculinas, femeninas e incluso hermafroditas En el presente estudio se evaluó el contenido de carotenoides en dos fecha de siembra en cuatro cultivares de espinacas cultivadas en invernadero bajo manejo orgánico, sembradas en Abril - mayo y cosechadas en julio y Agosto 2003 respectivamente. Las variables evaluadas corresponden rendimiento peso fresco, rendimiento materia seca, contenido de Pi-caroteno, luteina, vitamina C, clorofila a, b y total. Registrando )as temperaturas diarias promedio, máxima y mínimas de los respectivos meses. Existieron diferencias significativas para ambas fechas de siembra en cuanto a rendimiento peso fresco, destacando el cultivar Marimba con 34.8 y 53.8 ton/ha. Igual situación se observó en el rendimiento peso seco, destacando la variedad Limbo con los contenidos mas altos en las dos épocas de cultivo, con 10.7 y 8.9% respectivamente. Con relación al contenido de pigmentos, existieron diferencias significativas entre las variedades, solamente para el caso de clorofila total, fluctuando entre, 92.4 y 108.5 mg/100g M.F. para primera época de siembra, mientras que para la segunda fecha los resultados variaron entre 63.1 y 98 mg/100g M.F. destacando el cultivar Viroflay por su bajo contenido respeto de las demás variedades. EI contenido de B-caroteno, varió entre 4.0 y 4.3 mg/100Gr M.F, para primera época de cosecha, mientras que para la segunda época de cosecha los resultados variaron entre 3.4 y 3.7mg/10Ogr M. F, destacando en ambas fechas por sus contenidos los cultivares Bolero y Marimba con los contenidos más altos. EI contenido de luteína varió entre 4.1 y 4.5mg/10Ogr MF, para primera época de cosecha, mientras que para la segunda época los resultados variaron entre 1.2 y 1.5mg/100gr M. F. AI analizar los contenidos de vitamina C no se encontraron diferencias significativas entre los cultivares variando entre 31. 1 y 57.5 mg/100gr MF, para primera época de cosecha, mientras que para la segunda época los resultados variaron entre 35.49 y 52.27 mg/100gr MF, destacando las variedades Viroffay y Marimba con los mayores contenidos de vitamin

Comportamiento productivo y fluctuaciones varietales de carotenoides, azufre y proteinas en brocoli (Brassica oleracea L. var. italica Plenck) bajo manejo organico

Resumen (Spanish, English)68 p.Se realizó una investigación en brócoli (Brassica oleracea L. var. italica Plenck) bajo manejo orgánico desde el 10 de Febrero hasta el 14 de Mayo de 2001 en la comuna de Pencahue, VII región, Chile (35° 23’ Latitud Sur, 71° 50’ Longitud Oeste), con el objetivo de evaluar el rendimiento comercial, industrial, contenidos de -caroteno, luteína, azufre y proteínas en los floretes comerciales de los cultivares Green Belt, Heritage y Triathlon, en un diseño de bloques al azar, con cuatro repeticiones. Los manejos agronómicos realizados están de acuerdo a lo establecido en las Normas de Producción Orgánica (IFOAM, Federación Internacional de Agricultura Orgánica), Norma Chilena Oficial de producción orgánica Nch 2439 y las Normas de la CEE 2092/91. Los rendimientos comerciales obtenidos no se diferenciaron significativamente entre los cultivares fluctuando entre 22,2 y 26,6 t ha-1, estos rendimientos son altos comparado con los obtenidos tanto en producción convencional como orgánica en la zona. En cuanto al rendimiento industrial, los cultivares Green Belt y Triathlon se destacaron por presentar los mayores rendimientos con 57,9% y 60,3%, respectivamente. Cabe destacar que gran parte del rendimiento industrial estaba dado por los floretes de primera. Con respecto a los antioxidantes evaluados después de almacenaje congelado, se tiene que el contenido de -caroteno fluctuó entre 3,2 y 4,7 mg 100 g-1 peso seco, diferenciándose significativamente Green Belt por presentar el mayor contenido, mientras que en luteína no se observó diferencia entre los cultivares fluctuando entre 4,7 y 6,4 mg 100 g-1 peso seco. No se observaron variaciones en los contenidos de -caroteno respecto a las cosechas estudiadas, mientras que en la luteína se observó diferencia solamente en la primera cosecha. El contenido de azufre varió significativamente entre los cultivares donde Heritage y Triathlon se destacaron por presentar los mayores contenidos con 328,6 y 369,4 mg 100 g-1 peso seco, respectivamente. En el contenido de proteínas no se observó diferencia significativa entre los cultivares fluctuando entre 31,4 y 32,4 mg 100 g-1 peso seco

Evaluacion in vitro de extractos de hongos fitopatogenos sobre la germinacion de cinco especies de malezas

Resumen (Spanish, English)Existen en la naturaleza una variedad de hongos fitopatógenos los cuales ejercen su acción sobre plantas y también sobre otros microorganismos inhibiendo su crecimiento. Esta acción es conducida específicamente por numerosos metabolitos secundarios los que les permiten desarrollarse y a su vez colonizar nuevos hospederos. Con el conocimiento de la existencia de estos metabolitos secundarios con distintos efectos sobre las plantas se cultivaron aislados de hongos fitopatógenos en medio líquido papa-glucosa los que una vez consumida toda la fuente de carbohidratos por parte del patógeno se procedió a obtener, mediante partición de solventes, los extractos correspondientes a la fracción soluble en acetato de etilo del medio de cultivo de cada hongo. A este extracto se le denominó extracto crudo del hongo. Por separado se realizaron bioensayos con los extractos provenientes de la porción micelio y filtrado de los crudos que presentaron mayor actividad. Finalizado estos ensayos se logró saber si la actividad biológica se encontraba en la fracción micelio o filtrado o bien en ambas, para proceder a fraccionar este extracto mediante cromatografía en columna de silica gel. Los extractos fueron evaluados in vitro para lograr determinar su efecto herbicida sobre varias especies de malezas. Como parte final de esta investigación se determinó la concentracción inhibitoria 50 (IC50) de las fracciones activas de aquellos extractos que presentaron acción herbicida de manera de precisar su potencial uso como bioherbicida. Se evaluó inicialmente el efecto de 25 extractos de aislados de hongos fitopatógenos sobre 4 especies de malezas (Portulaca oleracea, Raphanus sativus, Lolium multiflorum y Chenopodium album) presentes en el país. Luego de determinados los extractos más activos se trabajó en ellos mediante bioensayos apropiados de manera de lograr establecer la o las fracciones que causaban el efecto herbicida. Los extractos más activos correspondieron a las cepas 3 y 4 de Botrytis cinerea. ; cepa 5 de Fusarium oxysporum ; cepa 9 de Sclerotium sp. ; cepas 10 y 17 de Trichoderma pseudokoningii y Trichoderma koningii, respectivamente, cepa 22 de Chondrostereum purpureum y cepa 25 de Penicillium sp. La mayoría de ellas ejercieron su acción sobre Portulaca oleracea, Raphanus sativus y Chenopodium album, ninguna sobre Lolium multiflorum. De todas estas cepas se determinaron sus IC50, siendo la fracción 5 de la cepa 3 de Botrytis cinerea sobre Raphanus sativus la que presentó un valor más bajo de concentración inhibitoria 50

Fungicidal and bactericidal compounds from micoendophytes isolated Chilean native gymnosperms

129 p.A partir de 8 especies de gimnospermas nativas recolectadas en el sur de Chile (Regiones VIII-XI) se aislaron 38 hongos endófitos, identificándose taxonómicamente 23 de ellos. Los hongos se cultivaron en medio líquido papaglucosa (PG) y los extraíbles en acetato de etilo se evaluaron como antimicrobianos mediante el ensayo de difusión en agar (100 µg/disco) y por microdilución a partir de una concentración de 1000 µg/ml. Los extractos más activos sobre los hongos fitopatógenos Alternaria alternata y Botrytis cinerea fueron los aislados E-3, Penicillium janczewskii y Microsphaeropsis olivacea. Estos microorganismos se cultivaron a escala preparativa en medio líquido PG y extracto de levaduraextracto de malta-glucosa (YMG). P. janczewskii y M. olivacea también se cultivaron sobre medio sólido para comparar la producción de metabolitos. De estos tres microorganismos, se aislaron e identificaron por métodos espectroscópicos 13 compuestos. Del cultivo liquido PG de E-3 se obtuvo tirosol (1), p-hidroxibenzaldehido (2) y meleina (3) mientras de P. janczewskii en medio PG se aislaron peniprequinolona (4) y gliovictina (5) y del cultivo en YMG pseurotina A (6). Del cultivo de M. olivacea en medio sólido y medio liquido (PG e YMG) se obtuvieron butirolactona I (7), ulocladol (8), grafislactona A (9), botralina (10), 2,5-diacetilfenol (11), 7-hidroxi-2,4- dimetil-3(2H)- benzofuranona (12) y enalina (13). Por acetilación de los compuestos 5, 8, 9 y 10 se prepararon sus acetatos