移植免疫与器官再生的研究进展

在临床移植手术和免疫抑制取得巨大成功后的数十年间,同种移植免疫领域堪称突破的进展较少。异种移植由于排斥和感染等障碍举步维艰,令很多研究者失去兴趣。器官再生研究尽管方兴未艾,但距离解决人类的实际问题还有相当长的路要走。近年来,随着干细胞技术和基因编辑技术的发展,移植与再生领域取得了巨大发展。在此,我们对科学意义和应用前景较为突出的进展加以评述,挂一漏万乃至谬误之处,恳请同行指正。国家自然科学基金(81401318

器官获取方法研究进展

我国每年有数以万计的患者挣扎在生死线上等待器官移植,而每年器官移植手术仅约1万例[1],很多终末期器官衰竭的患者在等待中离世。器官的体外培养和组织工程器官成为解决器官短缺的重要手段[2]。1组织工程器官组织工程器官是以细胞学和材料学为基础,将细胞接种在合适的材料上培养以代替受损的组织或器官的一门学科[3]。组织工程器官构建需要具备三个必不可少的要素:（1）具有生物兼容性良好的

组织工程心脏:电生理特性及长期安全性?

背景:由于供体心脏严重短缺并受制于伦理道德,很多需要心脏移植的患者最终因缺乏供体心脏而死亡。理论上组织工程心脏是解决供体心脏不足的重要手段。目的:回顾分析组织工程心脏构建用的支架材料、种子细胞及细胞接种培养方法,为后期组织工程心脏的构建做参考。方法:由作者检索2004年至2016年Pub Med数据库及SCI(web of science)数据库关于组织工程心脏构建方法研究的文献,共检索文献2 921篇,按照纳入和排除标准进行筛选,共纳入53篇。结果与结论:器官的体外培养及组织工程心脏功能是组织工程心脏构建的难点。组织工程心脏体外培养需要提供心肌细胞增殖需要的营养、气体、温度及相应的电刺激。心肌细胞的诱导、支架材料的获取及体外培养系统的建立是组织工程心脏构建过程中不可缺少的条件。优化支架材料的脱细胞流程,整合理想的种子细胞并提高其在支架内的黏附、增殖和分化能力,通过基因调控改善组织工程心脏的电生理特性,长期的安全性分析等,每一项研究目标都任重而道远

国际儿童心脏移植现况

随着心脏移植手术技术的提高与免疫抑制剂领域的发展,儿童心脏移植的长期存活率明显提高。为评估和研究医疗机构实体器官移植状态,国际心肺移植联合会(ISHlT)每年对来自全世界的注册资料进行统计总结并发表年报。本综述主要将ISHlT年报的主要内容、统计学方法及结果进行整理,介绍国际儿童心脏移植人口分布统计结果,免疫抑制剂的应用影响及术后并发症相关因素;并分析了儿童心脏移植的存活率及相关危险因素

Effect and mechanism of TIPE3 interference plasmid on SW480 colorectal cancer growth

目的:通过TIPE3干扰质粒转染SW480结肠癌细胞,验证干扰TIPE3表达对SW480结肠癌细胞生长的影响并探讨相关机制。方法:构建TIPE3; -shRNA-pSIREN-RetroQ干扰质粒,通过脂质体转染法成功将干扰质粒导入SW480细胞,通过RT-PCR、Western; blot检测重组质粒的干扰效率。应用CCK-8方法检测SW480细胞生存率。AnnexinV-FITC/PI流式细胞法检测细胞凋亡。使用West; ern; blot检测细胞增殖、凋亡相关分子的表达情况。结果:成功设计、构建和筛选具有生物活性且干扰效率最佳的TIPE3-shRNA-pSIREN-Ret; roQ干扰质粒。CCK-8检测证实干扰SW480结肠癌细胞TIPE3表达可以抑制细胞生长。流式结果显示,TIPE3-shRNA3干扰组的凋亡率为; (27. 991. 087) %,显著高于正常细胞组(12. 102. 213) %及转染空载质粒组(11. 440. 277 0); %。证实了降低TIPE3表达可以增加SW480对aDR5ScFv所诱导的细胞凋亡敏感性。Western; blot结果显示干扰TIPE3表达可以活化caspase3蛋白,降低p-AKT、p-PDK1、PCNA等分子的表达。结论:干扰TIPE3的表达对; SW480结肠癌细胞具有促进凋亡,抑制增殖的作用。Objective: To study the effect of interference TIPE3 on the colon cancer; cell growth by transfecting SW480 colon cancer cells with the TIPE3; interference plasmid were detected. Methods: Transfecting the; constructed TIPE3-shRNA-pSIREN-RetroQ plasmid to SW480 cells. To; determine the highest interference efficiency plasmid, the mRNA and; protein levels of recombined plasmid were detected by RT-PCR and Western; blot separately and tested the cell proliferation with CCK8. Meanwhile,; apoptosis rate of SW480 cells was determined by flow cytometry assay; with AnnexinV-FITC/PI. To further determined the effects of recombined; plasmid on cell development, the level of protein involved in; proliferation and apoptosis were detected by Western blot. Results: The; most effecient interference plasmids were successfully constructed. We; found that the cell survival rate decreased when interference TIPE3 gene; expressing in colorectal cancer cells. Flow cytometry indicated that; interefering the expression of TIPE3 would increase the sensitivity of; SW480 cell to apoptosis induced by aDR5ScFv. The results of Western blot; showed that low expression of TIPE3 would activate caspase3 and; downregulate the expression of p-AKT,p-PDK1 and PCNA. Conclusion:; Interference TIPE3 could promote apoptosis and inhibit proliferation in; SW480 colon cancer cells.国家自然科学基金; 福建省属公益类科研院所基本科研专项项

肾脏-胰岛联合移植研究进展

糖尿病肾病是糖尿病最严重的并发症,可通过间质及肾小管纤维化等机制导致肾脏功能衰竭,最终进展为终末期肾脏病（end stage renal disease,ESRD）[1-2]。既往认为,糖尿病肾病及其他慢性肾病患者更容易死于心血管疾病而不是ESRD,但是据一份2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）随访统计,ESRD导致的死亡比心血管疾病更为

糖尿病细胞治疗供体细胞来源及其研究进展

据2015年国际糖尿病联盟报道,全球已确诊的糖尿病患者约有4.15亿,而中国糖尿病患者已超过1亿[1],约占全球糖尿病患者的1/4,因而,严重威胁着我国人民的健康[2]。根据发病机制不同,糖尿病可分为1型、2型糖尿病以及妊娠期糖尿病。1型糖尿病是由于免疫系统攻击自身的胰岛β-细胞,导致其数量减少,致使胰岛素合成减少而引起的糖代谢紊乱性疾病[3];而中、晚期2型福建省自然科学基金项目(2015J01541

TIPE2在T细胞介导的心脏移植急性排斥反应中的潜在作用

目的探讨作为免疫负调控因子的肿瘤诱导坏死因子-α-诱导蛋白8样因子-2(TIPE2)在T细胞介导的小鼠心脏移植急性排斥反应中的潜在作用。方法通过苏木素-伊红(HE)染色和流式细胞术确定心脏移植物中的主要免疫排斥细胞,免疫荧光染色确定TIPE2与脾细胞间的关系,实时定量荧光PCR(Real-time PCR)检测心脏移植物TIPE2及细胞因子表达量。结果小鼠心脏移植7天后心脏组织出现明显免疫细胞浸润及心肌组织的破坏,流式细胞术检测心脏移植物中CD4~+和CD8~+T细胞增高,免疫荧光显示移植小鼠脾细胞中的CD4~+和CD8~+T细胞表达TIPE2,而心脏移植物在第7天时TIPE2和细胞因子表达量均明显增高。结论 TIPE2与在T细胞介导的小鼠心脏移植急性排斥反应中可能发挥着潜在作用。国家重点科学研究计划(2012CBA01303);;国家自然科学基金(31271038

雷帕霉素衍生物对胰岛的毒性研究

目的探讨雷帕霉素及其衍生物依维莫司、地磷莫司、佐他莫司对胰岛的毒性作用。方法采用小鼠胰岛素瘤细胞(MIN6)作为体外研究胰岛细胞的对象,分别在含有依维莫司、地磷莫司、佐他莫司的培养基中孵育MIN6细胞48小时,通过Brdu检测细胞增殖、CCK8检测细胞活力、PI检测细胞周期、流式细胞术检测细胞凋亡以及ELISA检测细胞分泌胰岛素功能,观察3种雷帕霉素衍生物对MIN6细胞的影响。结果我们发现3种雷帕霉素衍生物均会对MIN6细胞的增殖和活力产生抑制作用。在细胞周期和凋亡实验中,与阴性对照组比较,3种衍生物对MIN6细胞的影响呈现抑制G1期向S期转变的趋势和促进细胞凋亡的趋势,但差异没有统计学意义。另外,3种衍生物与雷帕霉素一样,均可减少MIN6细胞分泌胰岛素,差异具有统计学意义。结论雷帕霉素及其衍生物依维莫司、地磷莫司、佐他莫司均对胰岛产生一定毒性。国家自然科学基金项目(31271038,81302546

联合应用共刺激通路阻断剂诱导小鼠记忆性心脏移植耐受的研究

目的 探索联合应用共刺激通路阻断剂诱导记忆性心脏移植耐受的方法。方法 皮肤预致敏小鼠,过继转移同种反应性记忆性T细胞(Tm),构建小鼠同种异体心脏移植模型后再联合阻断效应及Tm激活途径,通过观察各组移植物平均存活时间、移植物排斥程度,检测脾脏中CD44高表达细胞数、脾细胞增殖情况和移植物中相关基因相对表达量等指标探讨其可能的作用机制。结果 (1)未处理小鼠脾脏中Tm占6.52﹪,而预致敏小鼠脾脏中Tm占26.5﹪;(2)平均存活时间为对照组5.17d,联合应用CTLA4Ig和anti-CD40L(二联用药)组10.33d,再联合应用anti-LFA-1和anti-OX40L(四联用药)组均>100d;(3)移植物排斥对照组均为4级,二联用药组?3B级,四联用药组为0级;(4)只有对照组脾脏物中CD44高表达;(5)对照组与二联用药组脾细胞增殖程度(t=2.91,P=0.027)明显高于四联用药组;(6)治疗组的移植物中IL-2、IFN-γ和Foxp3基因的表达量明显低于对照组(t=6.51,t=9.94,t=6.15,P=0.00,P=0.00,P=0.00),并且四联用药组IL-10基因表达量明显升高(t=4.71,P=0.003)。结论 对于记忆性心脏移植模型,只有联合阻断效应和Tm才可获得移植物长期耐受,其机制可能是明显降低移植物和移植受者细胞免疫应答水平的同时,诱导移植物中表达大量IL-10分泌性Tr1细胞