双酚A与四溴联苯醚（BDE-47）暴露对紫贻贝组织病理与生殖相关基因表达的研究

近年来，海洋污染日益严重，海洋环境中的内分泌干扰物对海洋生物及海洋生态系统的影响，已成为近年来的研究热点。软体动物作为生物界第二庞大的生物类群，在生态系统中扮演着重要的角色，同时也常被用作生态健康评价的指示生物。目前，对于软体动物生殖和内分泌系统的研究甚少，虽然一些研究揭示了脊椎动物的性激素同样存在于软体动物中，但是关于这些性激素的合成通路及参与这些通路的酶类还亟待研究。17&beta;-羟基类固醇脱氢酶是一类多功能的酶，参与了性腺甾醇、脂肪酸、类视黄醇和胆汁酸等物质的代谢。卵黄蛋白原是卵黄蛋白的前体，通常只在性成熟的雌性中表达，但是在外源激素作用下，在雄性及幼体中也可能表达。本研究选取紫贻贝作为研究对象，采用RACE等方法克隆到两种类型17&beta;-羟基类固醇脱氢酶基因的全长序列与卵黄蛋白原的部分序列，并选择了典型的内分泌干扰物BPA和BDE-47作为暴露物，结合实时荧光定量PCR技术与组织病理学等技术，探讨了内分泌干扰物对紫贻贝内分泌系统的影响，从而为表征内分泌干扰效应敏感指标的筛选提供科学依据。本论文获得如下结果： ⑴基因的克隆与序列分析 10型和12型17&beta;-羟基类固醇脱氢酶的基因全长为916 bp和1196 bp，分别编码259和325个氨基酸。两种基因推断的氨基酸序列都含有保守的TGXXXGXG 结构域，催化三联体结构域（丝氨酸 - 酪氨酸 - 赖氨酸），保守的YXXXK活性结构域，其中酪氨酸作为活性催化碱基。克隆获得的卵黄蛋白原片段长为712 bp，位于保守的卵黄蛋白原结构域内。系统进化树分析结果表明，10型和12型17&beta;-HSD所处的位置与其分类学位置相符合，10型17&beta;-HSD与8型17&beta;-HSD进化上关系较近，12型17&beta;-HSD与3型17&beta;-HSD关系较近。 ⑵基因的组织分布特征 组织分布结果显示，两种类型的17&beta;-羟基类固醇脱氢酶均呈多组织分布特征，主要表达于性腺与消化腺组织，而卵黄蛋白原基因则主要表达于雌性贻贝的血细胞、消化腺和性腺，在雄性中几乎不表达。 ⑶典型内分泌干扰物的暴露下基因表达变化 急性暴露实验结果显示，BPA及BDE-47暴露均显著降低了两种类型17&beta;-HSDs基因的表达。在雌雄贻贝中，两种基因的表达量在24 h显著减少（P&lt;0.05），随着暴露时间的延长，在96 h雌性贻贝逐步恢复到对照水平，而雄性贻贝还处于显著抑制的状态。雌雄贻贝卵黄蛋白原基因在BPA及BDE-47暴露下，表达量均出现先上升后下降的趋势，各处理组的基因表达量在48 h均发生显著变化（P&lt;0.05）。亚慢性暴露实验的结果与急性暴露结果类似，受到上述污染物暴露后，17&beta;-羟基类固醇脱氢酶基因的表达量出现下降，而卵黄蛋白原基因表达量出现上升。同时，亚慢性暴露结果表明暴露剂量与检测效应之间存在一定的关系，即高浓度处理组对上述基因的诱导效果比低浓度处理组更显著。 ⑷典型内分泌干扰物的暴露下组织病理分析 组织学分析结果表明，BPA和BDE-47均能对紫贻贝的性腺、鳃和消化腺组织造成损伤，且随着浓度的升高，损伤的程度加大。造成的损伤包括使卵巢滤泡体积变小，数量减少，影响卵母细胞的发育，影响雄性贻贝的精细胞发育；鳃组织的纤毛断裂扭曲，上皮细胞肿胀，鳃叶萎缩变短，鳃丝断裂；消化腺组织的细胞肿胀严重，胞质溶解造成局部坏死，大范围内出现空泡化现象。<br /

[[alternative]]Development and thermal performance of reverse thermosyphon loop

碩士[[abstract]]本研究主要目的為不使用任何閥件下，開發一即可自行向下傳熱之迴路，實驗裝置使用外徑6 mm，厚度2 mm之不鏽鋼管作為冷凝蓄壓槽與管路之材料，蒸發器與熱交換器則使用銅管製作，工作流體為充填率固定85 %之去離子水，加熱功率為30 W、50 W與70 W，並分別使用五種冷卻水溫(15 °C, 20 °C, 25 °C, 30 °C, 35 °C)。實驗改變兩種不同的蓄壓槽入口端高度與冷卻水溫度，探討在不同加熱功率下迴路之熱傳性能。 當蓄壓槽入口端高度較低時，槽內無足夠的空間給予蓄壓，導致流體回流致使迴路無法作動。則入口端高度較高時，蒸發端所產生之蒸汽可有效地傳至蓄壓槽內蓄壓，當蒸汽壓力足夠後，則可藉由壓力與重力作用使得管內液體回流至蒸發器，使迴路達成向下傳熱與循環作動。此外，當冷卻水溫度為25 °C與20 °C時，迴路有較佳的循環作動，加熱功率為70 W與冷卻水溫為30 °C時，可得迴路之最低熱阻為0.31 °C/W。[[abstract]]The main objective of this research was to develop a valve-less self-acting reverse thermosyphon loops (RTL) that transmits heat downwards with a modified inlet height of condenser reservoir. The condenser reservoir and vessels of this experiment were made of stainless steel with outer diameter and thickness of 6 mm and 2 mm respectively while the evaporator and heat exchanger were made of copper. The working fluid used was distilled water with a fixed filling ratio of 85%. Various heat inputs (30W, 50W, 70W) and temperatures of cooling water (15°C, 20°C, 25°C, 30°C, 35°C) were used. The loop heat transfer performance was determined by using various heat inputs and cooling water temperatures. When the inlet height of condenser reservoir was lower, the cyclical motion can’t take place as the accumulated pressure in the condenser reservoir is too low for putting working fluid into motion. However, when the inlet height of condenser reservoir is higher, the vapor from evaporator can be transmitted efficiently to the condenser reservoir. Thus, the fluid inside the vessels can flow back into evaporator with the assistance of pressure difference and gravitational force as the accumulated pressure was higher and sufficient. Hence, a downward heat transfer and cyclical motion can be achieved in the loop. Besides, a better cyclical motion was obtained when cooling water temperatures were at 25°C and 20°C whereas the lowest resistance which was 0.31°C/W happened at heat input of 70 W and cooling water temperature of 30 °C.[[tableofcontents]]目錄 中文摘要 I 英文摘要 II 目錄 IV 圖目錄 VI 表目錄 VIII 符號說明 IX 第一章 緒論 1 1.1 研究背景 1 1.2 文獻回顧 2 1.2.1 虹吸式熱管 2 1.2.2 迴路式虹吸熱管 10 1.2.3 逆虹吸迴路式熱管 12 1.3 研究目的 17 第二章 理論基礎 18 2.1 熱管介紹 18 2.1.1 熱管工作流體之選擇 19 2.1.2 熱管作動之條件 19 2.1.3 熱管熱傳限制 20 2.2 虹吸式熱管介紹 22 2.2.1 虹吸式熱管形式 23 2.2.2 虹吸式熱管之優點 24 2.3 逆虹吸迴路介紹 25 2.3.1 體積量測 26 2.3.2 性能評估 26 第三章 實驗設計與條件 27 3.1 影響實驗之變因 28 3.1.1 真空度 28 3.1.2 正負壓測漏 28 3.1.3 熱電偶線的誤差 29 第四章 實驗架設與步驟 30 4.1 逆虹吸迴路之架設 30 4.2 實驗參數及步驟 32 4.3 實驗設備 34 第五章 實驗結果與討論 37 5.1 迴路各點溫度變化(高度較低) 37 5.2 迴路各點溫度變化(高度較高) 38 5.3 熱阻值比較 41 5.3.1 不同冷卻水溫之加熱功率與熱阻關係 41 5.3.2 蓄壓槽入口端高度改變 42 第六章 結論與建議 43 參考文獻 44 附錄一 熱阻分析 47 附錄二 絕熱棉特性表 48 圖目錄 圖1-1 虹吸式熱管實驗架設圖 2 圖1 2 充填R-22與R134a之熱性能 3 圖1 3 充填水之熱性能 3 圖1 4 設備示意圖 4 圖1 5 恆溫槽與蒸發區溫度差異 5 圖1 6 恆溫槽與冷凝區溫差對整體熱傳係數之影響 5 圖1 7 密閉二相虹吸熱管實驗架設圖 6 圖1 8 密閉二相虹吸熱管內的溫度反應變化 7 圖1 9 在蒸發區溫度的變化 7 圖1 10 數值模型與實驗結果之比較 8 圖1 11 密閉二相虹吸式熱管尺寸示意圖 8 圖1 12 熱傳量與平均溫度之比較圖(A.R=7.45) 9 圖1 13 熱傳量與平均溫度之比較圖(A.R=9.8) 9 圖1 14 熱傳量與平均溫度之比較圖(A.R=11.8) 9 圖1 15 二相迴路式虹吸熱管示意圖 10 圖1 16 二相迴路式虹吸熱管效能圖 10 圖1 17 毛細燒結結構示意圖 11 圖1 18 加熱功率100W時不同表面之蒸發熱阻 11 圖1 19 無差壓式迴路之示意圖 12 圖1 20 外加機械泵之傳熱方式 13 圖1 21 自主向下傳熱之方式 14 圖1 22 逆虹吸迴路示意圖 15 圖1 23 長型迴路式傳熱裝置 15 圖1 24 可視化逆流熱虹吸迴路裝置 16 圖1 25 可視化逆流熱虹吸迴路裝置之效益圖 16 圖2 1 圖熱管作動示意圖 18 圖2 2 熱管熱傳限制示意圖 21 圖2 3 飛濺限制物理模型 21 圖2 4 虹吸熱管作動示意圖 22 圖2 5 單管虹吸熱管 23 圖2-6 迴路式平行熱虹吸熱管 23 圖2 7 迴路式虹吸熱管 24 圖2-8 逆虹吸迴路示意圖 25 圖3 1 實驗示意圖 27 圖3 2 水的三相圖 28 圖4 1 實驗運作示意圖 30 圖4 2 實驗架設圖 31 圖4 3 交流電源供應器 34 圖4 4 電加熱棒 35 圖4 5 真空幫浦 35 圖4 6 真空計 35 圖4 7 流量計I 36 圖4 8 流量計II 36 圖4 9 數據擷取器 36 圖4 10 流量顯示器 36 圖4 11 恆溫水槽 36 圖5 1 冷凝水溫35 °C時之溫度數據 37 圖5-2 冷凝水溫20 °C時之迴路溫度與時間數據圖 38 圖5-3 冷凝水溫25 °C時之迴路溫度與時間數據圖 39 圖5-4 冷凝水溫15 °C時之迴路溫度與時間數據圖 39 圖5-5 冷凝水溫30 °C時之迴路溫度與時間關係圖 40 圖5-6 冷凝水溫35 °C時之迴路溫度與時間關係圖 40 圖5 7 不同冷卻水溫之加熱功率與熱阻關係圖 41 圖5 8 改變蓄壓槽入口端高度之不同冷卻水溫與熱阻關係圖 42 表目錄 表4-1實驗參數 32[[note]]學號: 603350090, 學年度: 10

SEQUENCE AND TRANSCRIPTIONAL PROFILES OF RHO AND MICROSOMAL CLASS GST GENES IN MANILA CLAM VENERUPIS PHILIPPINARUM

谷胱甘肽硫转移酶是一类在细胞解毒和抗氧化过程中发挥重要作用的超家族酶系。采用 cDNA末端快速扩增技术,从菲律宾蛤仔中克隆获得Rho型GST和微粒体型GST基因的全长序列(分别命名为VpGSTR和VpGSTMi)。序列分析显示, VpGSTR和VpGSTMi的cDNA全长分别为942bp和661bp,编码234和149个氨基酸。系统分析结果表明,菲律宾蛤仔GSTR与GSTMi在进化树上的位置与其分类所处的位置一致。荧光定量PCR结果发现, VpGSTR和VpGSTMi广泛分布于所检测组织中,且在肝胰腺组织中表达量最高。在鳗弧菌侵染后, VpGSTR和VpGSTMi基因表达量在24h内均表现出明显的上升趋势。上述结果表明, VpGSTR和VpGSTMi可能在菲律宾蛤仔抵御细菌侵染导致的氧化应激中发挥重要功能。</p

菲律宾蛤仔(Venerupis philippinarum)Rho型GST和微粒体型GST的序列分析及表达特征研究

谷胱甘肽硫转移酶是一类在细胞解毒和抗氧化过程中发挥重要作用的超家族酶系。采用cDNA末端快速扩增技术,从菲律宾蛤仔中克隆获得Rho型GST和微粒体型GST基因的全长序列(分别命名为VpGSTR和VpGSTMi)。序列分析显示,VpGSTR和VpGSTMi的cDNA全长分别为942bp和661bp,编码234和149个氨基酸。系统分析结果表明,菲律宾蛤仔GSTR与GSTMi在进化树上的位置与其分类所处的位置一致。荧光定量PCR结果发现,VpGSTR和VpGSTMi广泛分布于所检测组织中,且在肝胰腺组织中表达量最高。在鳗弧菌侵染后,VpGSTR和VpGSTMi基因表达量在24h内均表现出明显的上升趋势。上述结果表明,VpGSTR和VpGSTMi可能在菲律宾蛤仔抵御细菌侵染导致的氧化应激中发挥重要功能

[[alternative]]以「小心吸血鬼—認識登革熱」為例

[[issue]]251