靶向HIV-1 vif的高效siRNA的筛选及慢病毒介导的体外抗病毒研究

RNAi技术在艾滋病治疗研究中已展现出巨大的潜力,兼具高效抑制特性和保守性的siRNA靶位是其获得成功应用的重要基础。本研究选择以HIV-1 vif基因为靶区筛选高效保守的RNAi序列,共选择设计了30个识别不同位点的siRNA序列,以pSUPER为载体构建了相应的shRNA表达质粒。通过与pNL4-3质粒在293FT细胞中进行共转染抑制实验,以及对初筛获得的高效序列进行保守性分析显示siRNA-vif37序列具有高效抑制效率和较好的保守性特征。通过与pGL3-vif报告质粒的共转染实验证明siRNA-vif37具有vif基因抑制特异性。带有shRNA-vif37表达元件的重组慢病毒转导后的MT-4细胞在HIV-1NL4-3体外攻毒实验中可显示出较有效的抑制病毒复制的能力,本研究进一步对转导后细胞进行克隆化筛选,获得稳定整合shRNA-vif37表达元件的MT-4-vif37细胞克隆,该细胞具有显著的抑制病毒复制的能力,在高攻毒剂量下仍可获得良好的抑制效果。本研究为进一步应用RNAi技术进行新型艾滋病治疗方法研究提供了重要基础

Preventive effect and mechanisms of 3,3-diindolylmethane on oxidative stress induced by hydrogen peroxide in HaCaT cells

目的:探究3,3'-二吲哚甲烷(dIM)对过氧化氢(H_2O_2)诱导人角质形成细胞(HACAT)氧化应激作用的预防效应及可能机制。方法:体外培养HACAT细胞,用H_2O_2建立氧化应激模型。采用CCk-8法检测不同浓度(1~20μMOl/l)dIM对HACAT细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测dIM作用前后细胞内活性氧自由基(rOS)含量的变化;WESTErn blOT检测不同浓度dIM(0、5、10μMOl/l)对HACAT氧化应激相关蛋白核因子(nf-κb)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPkS)磷酸化表达水平的影响。结果:成功建立了HACAT氧化应激模型。CCk-8法研究结果显示1-10μMOl/l dIM对HACAT细胞无明显毒性作用(P>0.05);流式细胞术检测结果表明10μMOl/l dIM预处理可有效预防由H_2O_2诱导的HACAT内rOS产生(P0.05).Flow cytometry results indicated that pretreatment with DIM(10 μmol/L) could inhibit the level of intracellular ROS(P<0.05).With increasing concentration of DIM,the levels of p-p38-MAPK,p-JNK and p-NF-κB were significantly depressed.CONCLUSION:DIM could protect HaCaT cells from H_2O_2-induced oxidative stress via suppressing production of ROS levels and down-regulating the expression of NF-κB and members of MAPKs.DIM might be used as an effective drug to treat or reduce oxidative stressmediated injury in skin cells.国家自然科学基金青年基金(81101562); 广东省科技计划项目(2012B060300005); 广东省自然科学基金(S2012010009633

中国物理海洋学研究70年：发展历程、学术成就概览

本文概略评述新中国成立70年来物理海洋学各分支研究领域的发展历程和若干学术成就。中国物理海洋学研究起步于海浪、潮汐、近海环流与水团,以及以风暴潮为主的海洋气象灾害的研究。随着国力的增强,研究领域不断拓展,涌现了大量具有广泛影响力的研究成果,其中包括:提出了被国际广泛采用的"普遍风浪谱"和"涌浪谱",发展了第三代海浪数值模式;提出了"准调和分析方法"和"潮汐潮流永久预报"等潮汐潮流的分析和预报方法;发现并命名了"棉兰老潜流",揭示了东海黑潮的多核结构及其多尺度变异机理等,系统描述了太平洋西边界流系;提出了印度尼西亚贯穿流的南海分支(或称南海贯穿流);不断完善了中国近海陆架环流系统,在南海环流、黑潮及其分支、台湾暖流、闽浙沿岸流、黄海冷水团环流、黄海暖流、渤海环流,以及陆架波方面均取得了深刻的认识;从大气桥和海洋桥两个方面对太平洋–印度洋–大西洋洋际相互作用进行了系统的总结;发展了浅海水团的研究方法,基本摸清了中国近海水团的分布和消长特征与机制,在大洋和极地水团分布及运动研究方面也做出了重要贡献;阐明了南海中尺度涡的宏观特征和生成机制,揭示了中尺度涡的三维结构,定量评估了其全球物质与能量输运能力;基本摸清了中国近海海洋锋的空间分布和季节变化特征,提出了地形、正压不稳定和斜压不稳定等锋面动力学机制;构建了"南海内波潜标观测网",实现了对内波生成–演变–消亡全过程机理的系统认识;发展了湍流的剪切不稳定理论,提出了海流"边缘不稳定"的概念,开发了海洋湍流模式,提出了湍流混合参数化的新方法等;在海洋内部混合机制和能量来源方面取得了新的认识,并阐述了混合对海洋深层环流、营养物质输运等过程的影响;研发了全球浪–潮–流耦合模式,推出一系列海洋与气候模式;发展了可同化主要海洋观测数据的海洋数据同化系统和用于ENSO预报的耦合同化系统;建立了达到国际水准的非地转(水槽/水池)和地转(旋转平台)物理模型实验平台;发展了ENSO预报的误差分析方法,建立了海洋和气候系统年代际变化的理论体系,揭示了中深层海洋对全球气候变化的响应;初步建成了中国近海海洋观测网;持续开展南北极调查研究;建立了台风、风暴潮、巨浪和海啸的业务化预报系统,为中国气象减灾提供保障;突破了国外的海洋技术封锁,研发了万米水深的深水水听器和海洋光学特性系列测量仪器;建立了溢油、危险化学品漂移扩散等预测模型,为伴随海洋资源开发所带来的风险事故的应急处理和预警预报提供科学支撑。文中引用的大量学术成果文献(每位第一作者优选不超过3篇)显示,经过70年的发展,中国物理海洋学研究培养了一支实力雄厚的科研队伍,这是最宝贵的成果。这支队伍必将成为中国物理海洋学研究攀登新高峰的主力军

Eco-physiological Adaptation of the Dominant Species of Two Plant Groups to the Habitat on the Northern Slope of the Kunlun Mountain

昆仑山北坡沙漠化日趋严重，直接影响当地畜牧业生产和绿洲生态系统的稳定。因此，针对昆仑山北坡的植被研究刻不容缓。本研究以昆仑山北坡前山带和绿洲平原区两植物类群优势种为研究对象，通过对植物光合生理特性、叶片性状和抗氧化系统的研究，期望回答前山带和平原区植物的光合适应策略，其叶片对环境胁迫的性状表现，胁迫环境下其内部生理生化适应机理等一系列科学问题。主要研究结果如下：（1）前山带植物的光合和蒸腾速率日变化多为单峰曲线，中午没有明显的&ldquo;午休&rdquo;现象；平原区多为双峰曲线，中午有明显的&ldquo;午休&rdquo;现象，一般出现在13：00-14：00之间。前山带比平原区植物具有更高的最大净光合速率（Pmax）、光补偿点（LCP）、光饱和点（LSP）、羧化效率（CE），具有更低的CO2补偿点（CCP）和CO2饱和点（CSP）。用气体交换法测定的植物水分利用效率大小顺序与叶片&delta;13C顺序基本一致，前山带植物水分利用效率（WUE）和叶片稳定性同位素丰度值都大于平原区植物。（2）植物叶片单位重量、单位面积的氮含量和净光合速率（Nmass，Narea，Pmax/mass，Pmax/area）前山带大于平原区。平原区植物的光合氮素利用（PNUE）大于前山带，说明平原区植物在有限的氮素供应条件下，具有更高效的资源利用效率。前山带植物遭受着间歇性水分胁迫，加之更强的太阳辐射和风蚀作用，植物分配更多的叶氮于细胞壁，同时累积大量渗透调节物质，形成了更厚而面积小的叶片，即比叶面积（SLA）较小，比叶重（LMA）较大。为了适应山地的特殊环境，前山带植物在叶片结构性状上做出一定的适应策略性响应。（3）前山带植物的活性氧（O2-,H2O2）和丙二醛（MDA）含量高于平原区，也印证了前山带植物遭受更严重的环境胁迫。超氧物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）的活性及脯氨酸（Pro）、可溶性糖（Soluable Sugar）、类胡萝卜素含量（Car），亦表现为前山带大于平原区。前山带植物虽遭受着多重胁迫作用，但植物体内活性氧（AOS）仍然维持在低浓度范围，而低浓度AOS正好诱导防御基因表达，及时清除活性氧，维持了植物正常的生理功能。（4）前山带海拔的变化造成光、温、水、热等一系列的环境变化，分布于不同海拔高度上的植物，在光合、叶片性状和抗氧化方面亦表现出各自不同的特征。光合： Pmax、蒸腾速率（Tr）、气孔导度（Gs）、气孔限制值（Ls）、量子效率（AQY）、CE、光呼吸速率（Rp）随海拔的升高而降低；LCP、LSP、暗呼吸速率（Rd）、CCP、CSP、光能利用率（PE）、WUE随海拔的升高而升高。叶片性状： Pmax/area、Pmax/mass、PNUE、Nmass、&delta;13C、SLA、叶绿素含量（Chl）随海拔的升高而降低； Narea、LMA随海拔的升高而升高。抗氧化： MDA、O2-、H2O2、Pro、Soluable Sugar、Car、SOD、POD随海拔的升高而升高；CAT随海拔的升高而降低

准格尔盆地东南缘梭梭种群结构与动态研究

通过样地调查和数据统计分析, 对准噶尔盆地东南缘梭梭种群现状绘制径级结构图, 编制生命表、分析存活曲线、死亡率曲线和寿命期望等参数, 并运用时间序列模型预测种群数量动态。结果表明: 种群整体结构属于增长型, 但梭梭种群幼苗个体少, 龄级个体数目少于龄级的个体数目。存活曲线基本接近Deevey 型, 种群偏离典型存活曲线的程度与幼苗缺乏有关; 环境因素和人为干扰的影响, 梭梭在 ~ V 龄级死亡率较高, 种群在第级出现死亡高峰, 且只有少量幼年个体能进入成年阶段, 个体平均生存能力的期望在第级最大; 时间序列分析表明, 在未来第龄级的个体会呈现老龄个体增加的趋势, 种群稳定性长期维持困难。适当的人工辅助恢复和现有植株及生境的保护是保持梭梭种群自然更新和种群恢复的关键

Experimemtal Study on One New Immunostimulated Blue Algae as Additive in Feed for Anguilla japonica Black Fry

免疫增强蓝藻是把胸腺素α1(Tα1)基因转移到蓝藻-聚球藻PCC 7942(Synechococcussp.PCC7942)染色体上后获得稳定表达的转基因蓝藻,经小鼠实验初步表明其有生物学活性并且口服有效.本实验采用该免疫增强蓝藻饲喂日本鳗鲡(Anguilla japonica)黑仔,并采集分离了一种养殖鳗鱼流行性发病弧菌(Vibriosp.),对饲喂了免疫增强蓝藻的黑仔鳗进行感染试验.实验表明饲喂添加免疫增强蓝藻的饲料后,黑仔鳗各检测组织器官Tα1含量显著提高,免疫增强蓝藻提高了试验鱼的免疫能力,增强了抗逆、抗病菌感染能力,并具有一定的促生长作用.免疫增强蓝藻作为鱼类饲料添加剂适口性好,适宜添加量为(0.5~1)×10-6左右.The immunostimulated blue algae is a effectively expressed transgenic blue algae which has translated human thymosin-alpl1(Tα_1) gene to Synechococcus sp.PCC7942.It has been confirmed that immunocompetence is available to mice and can be utilized by oral administration.We fed japonica eel with the immunostimulated Synechococcus sp.as immunostimulated additive,isolated an epidemic pathogenic Vibrio sp.(04~09)from the diseased japonica eel, infected the black fry which were fed with the immunostimulated blue algae with Vibrio sp..The experiment shows that contents of Tα_1 in the tissues and organs of the black fry increased obviously.The immunostimulated Synechococcus sp.can elevate the immune ability of japonica eel,increase the ability of resisting the bacterial pathogens such as Vibrio sp.and environmental stresses,stimulate the growth of japonica eel.The immunostimulated blue algae is an appropriate additive of copulated feed for the rare aquicultured fish and additive dosages is about(0.5~1.0) ×10~(-6)

昆仑山前山带植物群落调查及相似性初步研究

对塔克拉玛干沙漠南缘,昆仑山北坡前山带的荒漠植物群落进行调查。结果显示:(1)在调查区域内发现21种植物,参与建群种15种,其他6种为偶见种。21种植物分属于10科20属,其中菊科(Compositae)和藜科(Chenopodiaceae)植物13种;研究区5种植物群落的优势种分别为塔里木沙拐枣(Calligonum roborovskii)、琵琶柴(Reaumuria songarica)、河西苣(Hexinia polydichotoma)、蒿类植物(昆仑蒿Artemisia nanschanica+昆仑绢蒿Seriphidium korovinii)与驼绒藜(Ceratoides latens)。(2)植物群落沿海拔高度变化地带性更替明显,低山砾质壤土母质上为塔里木沙拐枣和琵琶柴群落,集中分布范围分别为2 200~2 300 m和2 250~2 400 m,中部沙质土壤母质上为蒿类植物和河西苣群落,蒿类植物群落分布于海拔2 400~2 500 m,河西苣群落集中于2 500 m高大沙丘丘间低地;驼绒藜群落在砾质土壤和沙质土壤母质上均有分布,海拔范围在2 380~2 800 m。(3)群落结构简单,整体盖度小于10%,物种密度为4~13株(丛)/m2,灌木层优势种单一,密度很小(1.2株(丛)/m2),草本层冠幅水平低,盖度小(小于5%);群落间高度、盖度、密度存在不同程度差异,物种丰富度指数(dMA)和生物多样性指数(D、H′、Jsw、Jgi)差异并不明显,总体处于较低水平。(4)群落盖度、密度、高度和物种数随海拔高度变化趋势不同,生物多样性指数随着海拔高度增加呈增加趋势;群落相似性比较显示,低海拔地区植物群落间的相似性高于高海拔地区