探针熔解曲线分析结合多种引物扩增技术在K-ras基因突变检测中的应用

肿瘤等疾病往往伴有多种体细胞突变，近年来，某些基因的突变情况已经作为癌症预后和治疗疗效预测的一种生物分子标记物，服务于分子靶向治疗。在化疗无效的结直肠癌患者中，针对EGFR的靶向治疗药物目前取得了重大进展。但大量研究表明，患者一旦携带有K-ras基因第2号外显子密码子12和13上的突变，就表现出对EGFR靶向治疗药物的耐药。因此，K-ras基因的突变与否可作为结直肠癌患者进行EGFR靶向治疗的有效预测因子。 体细胞突变往往存在大量的野生型背景，对检测技术的要求极高。本论文以探针熔解曲线分析为基本技术平台，结合不同的引物扩增技术和PCR策略建立并验证了三种针对K-ras常见七种突变类型的检测体...Somatic mutations are often found in cancer. In recent years, several somatic mutations are taking roles as biological molecular markers which are used in prognosis and therapy efficacy prediction in cancer, which serves in molecular targeted therapy. Targeted therapies against EGFR have made significant progress in chemotherapy-refractory metastatic colorectal cancer. However, a number of studies...学位：理学硕士院系专业：生命科学学院生物学系_生物化学与分子生物学学号：2172009115210

急性髓系白血病NPM1基因突变检测方法的研究

本研究旨在建立检测急性髓系细胞白血病(AML)患者NPM1基因突变的方法。针对NPM1基因突变集中区域设计引物/探针,建立高分辨熔解曲线方法(HRM)和等位基因特异PCR方法(AS-PCR),通过89份AML标本进行了临床评估,并采用毛细管电泳法(CE)和测序法作为对照进行了验证。结果表明,通过上述4种方法共检出阳性标本17例(19.1%),其中A型突变15例,B型和Nm型突变各1例。上述方法中HRM法检测全面,灵敏度为5%,而AS-PCR法有一定的漏检,但灵敏度高达0.01%。结论:考虑到操作的难易程度,同时也结合临床样品的检测情况,HRM在临床上可法用于NPM1突变筛查,而AS-PCR法可用于后续的微小残留病定量检测