Trisomy 21-induced Dysregulation of Microglial Homeostasis in Alzheimer’s Brains is Mediated by USP25

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）是一种最为常见的与记忆、认知能力退化相关的渐进性神经退行性疾病。唐氏综合征（Down’s syndrome, DS）是早发型阿尔茨海默病的一个重要风险因素，作为最常见的智力障碍遗传疾病，厦门大学医学院神经科学研究所王鑫教授团队揭示了治疗阿尔茨海默病和唐氏综合征新的治疗靶点，并且在小鼠模型上利用USP25小分子抑制剂成功地改善了阿尔茨海默病小鼠的认知功能，缓解了神经退行性病变的病理进程。该研究工作由王鑫教授指导完成，厦门大学医学院助理教授郑秋阳和博士生李桂林完成主要实验工作，王世华、朱琳、高月、邓青芳、张洪峰、张丽珊、吴美玲、狄安洁参与了部分研究工作。厦门大学医学院许华曦、赵颖俊和孙灏教授在研究过程中给予大力帮助和支持，清华大学董晨教授提供了Usp25基因敲除小鼠，厦门大学附属妇女儿童医院周裕林教授和郑良楷博士帮助收集了脑组织样品。Down syndrome (DS), caused by trisomy of chromosome 21, is the most significant risk factor for early-onset Alzheimer’s disease (AD); however, underlying mechanisms linking DS and AD remain unclear. Here, we show that triplication of homologous chromosome 21 genes aggravates neuroinflammation in combined murine DS-AD models. Overexpression of USP25, a deubiquitinating enzyme encoded by chromosome 21, results in microglial activation and induces synaptic and cognitive deficits, whereas genetic ablation of Usp25 reduces neuroinflammation and rescues synaptic and cognitive function in 5×FAD mice. Mechanistically, USP25 deficiency attenuates microglia-mediated proinflammatory cytokine overproduction and synapse elimination. Inhibition of USP25 reestablishes homeostatic microglial signatures and restores synaptic and cognitive function in 5×FAD mice. In summary, we demonstrate an unprecedented role for trisomy 21 and pathogenic effects associated with microgliosis as a result of the increased USP25 dosage, implicating USP25 as a therapeutic target for neuroinflammation in DS and AD.This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (31871077, 81822014, and 81571176 to X.W.; 81701130 to Q.Z.), the National Key R&D Program of China (2016YFC1305900 to X.W.), the Natural Science Foundation of Fujian Province of China (2017J06021 to X.W.), the Fundamental Research Funds for the Chinese Central Universities (20720150061 to X.W.), and the BrightFocus Foundation (A2018214F to Yingjun Zhao). 该研究工作得到国家重点研发计划项目、国家自然科学基金、福建省自然科学基金、厦门大学校长基金的资助和支持

牙鲆一株弹状病毒病原的分离与鉴定

从患病牙鲆中分离鉴定了一株弹状病毒(Paralichthys olivaceus rhabdovirus,PoRV)。用过滤除菌后的患病牙鲆组织匀浆液,接种不同的鱼类细胞,其中有7种鱼类细胞出现明显的病变在对病毒进行挑斑分离后,测定了PoRV的滴度,显示PoRV在敏感鱼类细胞(Grass Carp Ovary,GCO)中的滴度达到106.5TCID50/mL;绘制了PoRV生长曲线;经蔗糖密度梯度离心提纯PoRV,负染及宿主细胞超薄切片的电镜观察,显示PoRV大小约为60nm×200nm。测定了PoRV

孔雀鱼胚胎心血管发育的显微观察

心血管系统的组织分化研究是近年热点课题之一1。胚体透明且发育速度快的鱼类胚胎由于具备便于观察的特性2，正广泛用于脊椎动物造血系统的发生、血细胞生成、及血循环系统分化时序、调控因子等研究3-5。孔雀鱼(Poecilia reticulata Peters)是卵胎生(Ovoviviparity)鱼类的代表种，其卵子在雌鱼的泄殖腔内受精发育，长成鱼后再出生；同时孔雀鱼又是一种小型观赏鱼类，在实验室易于饲养，能不断提供实验用卵和胚胎。因此，在本实验室长期进行鱼类组织细胞培养的基础上6-11，制备孔雀鱼胚胎组织标本，并对早期胚胎及心血管系统进行了体外培养，观察和比较了孔雀鱼胚胎心血管系统在体内、外的形成过程

大菱鲆弹状病毒毒株及其制备方法和应用

本发明公开了一种大菱鲆弹状病毒毒株及其制备方法和应用，大菱鲆弹状病毒毒株Scophthalmus maximus rahbdovirus，SMRV0207，CCTCC NO：V202006。将患病大菱鲆的肝、肾、心、脾组织取出后，剪碎、加入PBS进行匀浆，再加入双抗，置冰箱冰冻，取出融化后，离心，再将病毒粗提液经过滤后，分别接种到CLC0207细胞中，恒温继续培养。本方法易行，该病毒株在CLC0207细胞中能迅速增殖，增殖效价可达到108TCID50/ml，该病毒株可应用于海水鱼弹状病毒细胞工程疫苗制备

孔雀鱼胚心的体外培养

以卵胎生方式繁殖的孔雀鱼为材料，通过酶消化或机械方法脱去卵壳，经显微操作从发育早期的４０个胚胎中挑取胚心进行体外培养．这些鱼的胚心在体外维持搏动达４周的占８０％，其中搏动时间最长的有１４２ ｄ．利用鱼的胚体透明、可直接观察到其体内心脏搏动及血液循环等有利条件，同时对体外培养的胚心血管中血细胞颜色的变化及随心搏运动的现象做了观察分析．实现了孔雀鱼胚胎心的体外培养，体外培养的胚心可作为脊椎动物心脏及循环组织发育研究的一个模式系统

草鱼椎骨间质细胞系对水生动物病毒敏感性的测定

取草鱼椎骨间质组织体外培养，连续传代超过30次，建立了呈上皮细胞形态的草鱼椎骨间质细胞系GCVB，将自鳖，蛙，鱼中分离到的10株病毒分别接种于长成致密单层的GCVB细胞中，显微观察细胞病变情况，测定病毒滴度，结果表明，GCVB细胞对不同病毒株敏感性不同，如对鳜鱼病毒SCSV和虹鳟传染性胰腺环死病病毒IPNV不移敏感，仅引起轻微或不可察病变，病毒滴度低于10^1TCID50／mL，但中华鳖病毒TSV，蛙虹彩病毒中国分离株RGV9506，蛙虹彩病毒美国分离株FV3，烟脂鱼弹状病毒CSRV，锂春病毒血症毒SVCV，草鱼出血病病毒GCHV89／24，以及GCHV33／86这7个病毒株，可引起GCVB细胞产生不同程度病变，滴度在10^1.8-1067.5TCID50/mL，表明新建的草鱼椎骨间质细胞系GCVB对已测的10株水生动物病毒中的80％敏感,可用于检测，分离其他未知水生动物病毒

草鱼椎骨间质细胞系对水生动物病毒敏感性的测定

取草鱼椎骨间质组织体外培养，连续传代超过30次，建立了呈上皮细胞形态的草鱼椎骨间质细胞系GCVB，将自鳖，蛙，鱼中分离到的10株病毒分别接种于长成致密单层的GCVB细胞中，显微观察细胞病变情况，测定病毒滴度，结果表明，GCVB细胞对不同病毒株敏感性不同，如对鳜鱼病毒SCSV和虹鳟传染性胰腺环死病病毒IPNV不移敏感，仅引起轻微或不可察病变，病毒滴度低于10^1TCID50／mL，但中华鳖病毒TSV，蛙虹彩病毒中国分离株RGV9506，蛙虹彩病毒美国分离株FV3，烟脂鱼弹状病毒CSRV，锂春病毒血症毒SVCV，草鱼出血病病毒GCHV89／24，以及GCHV33／86这7个病毒株，可引起GCVB细胞产生不同程度病变，滴度在10^1.8-1067.5TCID50/mL，表明新建的草鱼椎骨间质细胞系GCVB对已测的10株水生动物病毒中的80％敏感,可用于检测，分离其他未知水生动物病毒

蛙病毒疫苗

本发明涉及名特优水产动物疾病防治的抗病毒疫苗。以蛙病毒CCTCC－V96004感染草鱼性腺细胞CO9510,得到大量扩增后,再用甲醛对其进行灭活处理,制备出抗蛙病毒疫苗。疫苗生产周期短,工艺简单,安全、无毒、不污染环境和水体,对蛙的免疫保护率高达95％