Development of aquantitative ELISA detection method for Varicella Zoster Virus(VZV) antigen

目的:建立水痘-带状疱疹病毒(VzV)抗原的双抗体夹心ElISA定量检测方法,用于质控VzV灭活疫苗研发和生产中抗原含量。方法:以VzV中和单抗5f6C8为包被抗体、8H5d1为酶标抗体,构建定量检测VzV抗原的双抗体夹心ElISA方法,并对本方法的特异性、灵敏度、准确性、线性和稳定性等性能进行分析。结果:建立的双抗体夹心定量检测VzV抗原的ElISA方法,线性范围为0.4μg~13μg/Ml,相关系数为r2=0.994,定量限度为0.4μg/Ml;变异系数CV80%。与VzV以外的相关病毒样本没有交叉反应。结论:构建的VzV抗原ElISA定量检测方法的各项性能符合定量检测需要,可用于VzV灭活疫苗的研发和生产过程的抗原含量检测。Objective:To develop a quantitative enzyme linked immunosorbent assay(Q-ELISA) to determine the concentration of Varicella Zoster Virus(VZV) antigen.This method was used to determine VZV antigen content at each stage of VZV inactived vaccine developing and manufacturing process.Methods: A double antibody sandwich Q-ELISA was developed to determine concentration of VZV antigen,which was based on the the high-affinity neutralizing monoclonal antibodies 5F6C8 as capture antibodies,and 8H5D1 as HRP-labeled antibody.The performance of reagent were evaluated.Results: The Q-ELISA for VZV antigen content was successfully developed.The reagent had good performance.The quantitation scope was 0.4 μg~13 μg/ml,The coefficient correlation was 0.994,the limit of detection was 0.4 μg /ml,the recovery was between 87.5% and 111.6%.The stability was up to 80% after reagent was heated for 6 days at 37℃.The variation coefficient was lower than 15%,and the reagent was no reaction with other sample except VZV antigen.Conclusion: The Q-ELISA for VZV antigen was developed with good specificity,accuracy and stability.The method can be used to determine VZV antigen content during development and production of VZV inactived vaccine

似鮈（Pseudogobio vaillanti）的分子生物地理学分析

似鮈（Pseudogobio vaillanti）是广布于中国淡水水体中的一种小型鲤科鱼类．通过分析线粒体细胞色素b（cytb）基因序列变异，探讨似鮈不同地理种群的相互关系，研究似鮈的生物地理学过程，并讨论其物种分化的现状．收集了来自辽河、长江（赣江、信江等）、富春江、珠江、万泉河等水系的样品．在获得的似鮈61个样本的线粒体cytb基因全序列（1140bp）中，共检测出了45个单倍型．线粒体单倍型的网络分析发现45个单倍型不形成一个网络图，而是分成9个单元群．邻接树的结果显示，这些单倍型形成5个大的分支，基本上与地理分布相对应，分别是长江1、珠江、海南、长江2和辽河等水系．综合分析似鮈单倍型的相互关系和地理分布及分子钟的计算显示这一分布格局形成于5Ma前-3Ma前，其后的200多万年中没有地理种群的交流．尽管似鮈不同地理种群的分子差异很大，但从形态上这些隔离的地理种群之间没有明显的差异，我们认为这反映出似鮈进化较保守．与似绚一样在中国东部广布的种类很多，它们的地理分布格局的形成过程多被解释为第四纪冰期的扩散．与它们相比，似鮈的地理格局的形成时间和物种分化状态是一个特例

中国似鮈鱼类生物地理学过程研究

本研究采用线粒体DNACytb基因序列来进行比较分析不同地理种群似鮈鱼类的相互关系,研究中国似鮈鱼类的生物地理学过程。本研究样品来自辽河、长江(赣江、信江等)、富春江、珠江、万泉河等水系:系统树的生成使用Mega2.1软件中的Neighbor Joining(NJ)法;线粒体单倍型之间的网络关系分析用TCS1.

似鮈（Pseudogobio vaillanti）的分子生物地理学分析

似鮈（Pseudogobio vaillanti）是广布于中国淡水水体中的一种小型鲤科鱼类．通过分析线粒体细胞色素b（cytb）基因序列变异，探讨似鮈不同地理种群的相互关系，研究似鮈的生物地理学过程，并讨论其物种分化的现状．收集了来自辽河、长江（赣江、信江等）、富春江、珠江、万泉河等水系的样品．在获得的似鮈61个样本的线粒体cytb基因全序列（1140bp）中，共检测出了45个单倍型．线粒体单倍型的网络分析发现45个单倍型不形成一个网络图，而是分成9个单元群．邻接树的结果显示，这些单倍型形成5个大的分支，基本上与地理分布相对应，分别是长江1、珠江、海南、长江2和辽河等水系．综合分析似鮈单倍型的相互关系和地理分布及分子钟的计算显示这一分布格局形成于5Ma前-3Ma前，其后的200多万年中没有地理种群的交流．尽管似鮈不同地理种群的分子差异很大，但从形态上这些隔离的地理种群之间没有明显的差异，我们认为这反映出似鮈进化较保守．与似绚一样在中国东部广布的种类很多，它们的地理分布格局的形成过程多被解释为第四纪冰期的扩散．与它们相比，似鮈的地理格局的形成时间和物种分化状态是一个特例

似鮈(Pseudogobio vaillanti)的分子生物地理学分析

似鮈(Pseudogobiovaillanti)是广布于中国淡水水体中的一种小型鲤科鱼类.通过分析线粒体细胞色素b(cytb)基因序列变异,探讨似鮈不同地理种群的相互关系,研究似鮈的生物地理学过程,并讨论其物种分化的现状.收集了来自辽河、长江(赣江、信江等)、富春江、珠江、万泉河等水系的样品.在获得的似鮈61个样本的线粒体cytb基因全序列(1140bp)中,共检测出了45个单倍型.线粒体单倍型的网络分析发现45个单倍型不形成一个网络图,而是分成9个单元群.邻接树的结果显示,这些单倍型形成5个大的分支,

鳜稚鱼摄食行为的社会学习

社会学习是动物快速获得新行为的有效途径。本研究对鳜稚鱼摄食行为的社会学习进行了检验和分析。将500尾未驯化鱼平均分配到实验组和对照组中,并在实验组中另外加入50尾已驯化鱼作为示范鱼。采用分批投饵方法群体驯化两组实验鱼摄食死饵料鱼,测量两组实验鱼摄食每批死饵料鱼的群体袭击反应时间和群体袭击持续时间。结果显示,实验组的群体袭击反应时间比对照组的稳定;实验组的群体袭击持续时间比对照组的短,且在第1次、5次、6次训练时存在显著差异。由此分析鳜稚鱼具有社会学习能力,示范鱼可能通过局域增强和反应易化社会学习过程,分