Hartmanns "Iwein" und die altnordische "Ivens saga" als produktive Rezeption

Anhand ausgewählter Themen (Alliteration, kelt. Mythos in höf. Roman, Genderthematik, König Artus und Protagonist, Löwe) werden die Schwerpunkte, Übersetzungsmethoden und Interpretationen der beiden Adaptionen Iwein und Ívens saga miteinander verglichen. Dabei werden für die jeweilige Thematik repräsentative Textstellen einander gegenüber gestellt und sowohl individuell, als auch vergleichend analysiert

Semi-rational engineering of Adh2 for improved methanol utilization in Komagataella phaffii

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Evaluation of different expression systems for the heterologous expression of pyranose 2-oxidase from Trametes multicolor in E. coli

The heterologous production of the industrially relevant fungal enzyme pyranose 2-oxidase in the prokaryotic host E. coli was investigated using 3 different expression systems, i.e. the well-studied T7 RNA polymerase based pET21d+, the L-arabinose inducible pBAD and the pCOLD system. Preliminary experiments were done in shaking flasks at 25°C and optimized induction conditions to compare the productivity levels of the different expression systems. The pET21d+ and the pCOLD system gave 29 U/L·h and 14 U/L·h of active pyranose 2-oxidase, respectively, whereas the pBAD system only produced 6 U/L·h. Process conditions for batch fermentations were optimized for the pET21d+ and the pCOLD systems in order to reduce the formation of inactive inclusion bodies. The highest productivity rate with the pET21d+ expression system in batch fermentations was determined at 25°C with 32 U/L·h. The pCOLD system showed the highest productivity rate (19 U/L·h) at 25°C and induction from the start of the cultivation. Using the pCOLD system in a fed batch fermentation at 25°C with a specific growth rate of μ = 0.15 h-1resulted in the highest productivity rate of active pyranose oxidase with 206 U/L·h

Der Zusammenhang zwischen Personalmangel und betrieblicher Weiterbildung: eine multivariate Analyse auf Basis der CVTS5‑Daten

Betriebliche Weiterbildung stellt für Unternehmen eine wichtige Ressource dar, um in einer sich rasch verändernden Arbeitswelt ihren Beschäftigten die notwendigen Fertigkeiten und Fähigkeiten zu vermitteln. Kann ein Betrieb dauerhaft Stellen nicht besetzen, stehen dem Unternehmen verschiedene unternehmerische Handlungsoptionen zur Verfügung, wobei die Weiterbildung hier gleichfalls eine mögliche Strategie zur Deckung des benötigten Kompetenzbedarfs darstellt. Vor diesem Hintergrund ging die vorliegende Studie der Forschungsfrage nach, ob sich ein positiver Zusammenhang zwischen Weiterbildungsausgaben für Kurse und Schulungen und einem antizipierten Personalmangel feststellen lässt. Auf Basis der Transaktionskostentheorie wurde darüber hinaus ein Anstieg der Ausgaben in Abhängigkeit der Qualifikationsstufen des gesuchten Personals postuliert. Die Hypothese gründet auf der Annahme, dass das ökonomische Risiko in Form von Weiterbildungsausgaben sinkt, wenn ein Kompetenzmangel auf einer höheren Qualifikationsebene auftritt und die Weiterbildung vergleichsweise Höherqualifizierte nach sich zieht. Die empirische Analyse erfolgte auf Basis der österreichischen Daten der EU-weiten Unternehmenserhebung CVTS5 (Continuing Vocational Training Survey 5). Im Rahmen der deskriptiven Analyse konnte zunächst kein positiver Zusammenhang zwischen Weiterbildungsausgaben und Personalmangel festgestellt werden - im Gegenteil, die Aufwendungen für betriebliche Weiterbildungskurse lagen bei Unternehmen ohne Stellenbesetzungsproblemen sogar geringfügig über jenen von Betrieben mit Personalmangel. Der Unterschied war allerdings statistisch nicht signifikant. Die anschließende multivariate Analyse lieferte stark divergierende Ergebnisse. Wird der Qualifikationsgrad des benötigten Personals nicht berücksichtigt, so lässt sich kein Zusammenhang zwischen betrieblichen Kurskosten und Personalmangel feststellen. Werden die Qualifikationsanforderungen der unbesetzten Stellen in die Analyse mitaufgenommen, so zeigt sich, dass ein Anstieg des Anteils an unbesetzten Stellen mit Lehre/BMS-Abschluss mit sinkenden Weiterbildungsaus gaben in Unternehmen in Zusammenhang steht. Auf der anderen Seite steigen die finanziellen Aufwendungen für Schulungen, je größer der Personalmangel auf Matura, Meisterebene ist. Aus Sicht der Autoren kann das als Hinweis betrachtet werden, dass die Bedeutung der klassischen Weiterbildung (in Form von Schulungen und Kursen) möglicherweise als betriebliche Reaktion auf Fachkräftemangel überschätzt wird. Anderen Handlungsmöglichkeiten wie die intensivere Auslastung des bestehenden Personals kommt hier womöglich eine höhere Bedeutung zu. Zukünftige Forschungsprojekte sollten daher verstärkt betrieblichen Planungs- und Entscheidungsprozesse bei dauerhaften Rekrutierungsproblemen in den Mittelpunkt stellen

Engineering of carbohydrate oxidoreductases for sensors and bio-fuelcells

Pyranose dehydrogenase (PDH) and pyranose 2-oxidase (POx) are flavoproteins that catalyze the oxidation of free, non-phosphorylated sugars to the corresponding ketosugars. Pyranose dehydrogenase has a broad substrate specificity for monosaccharides (and few disaccharides), but is limited to a narrow range of electron acceptors and reacts extremely slowly with dioxygen, whereas pyranose 2-oxidase shows pronounced specificity for glucose and displays high oxidase as well as dehydrogenase activity. For bio-fuelcell and sensor applications, oxygen reactivity is undesirable as it leads to electron leakage and the formation of damaging hydrogen peroxide; for biocatalytic applications, oxygen reactivity is advantageous, as oxygen is freely available and obviates downstream removal of undesired electron acceptors. Site-saturation mutagenesis libraries of eleven (POx) and twelve (PDH) residues around the active sites were screened for oxidase and dehydrogenase activities. In POx, variants T166R, Q448H, L545C, L547R and N593C displayed reduced oxidase activities (between 40% and 0.2% of the wildtype) concomitant with unaffected or even increased dehydrogenase activity, dependent on the electron acceptor used (DCPIP, 1,4-benzoquinone or ferricenium ion). Kinetic characterization showed that both affinity and turnover numbers can be affected. The switch from oxidase to dehydrogenase activity was also observed electrochemically using screen-printed electrodes. In this miniaturized set-up with a reaction volume of only 50 µL the dehydrogenase activity of variant N593C was entirely preserved in the presence of a suitable mediator, shuttling electrons from the FAD cofactor to the electrode surface. The oxidase activity, utilizing molecular oxygen as acceptor, is abolished in this variant. Of all variants of PDH that were produced by saturation mutagenesis, only variants of one position displayed increased oxygen reactivity to a minor degree. Histidine 103, carrying the covalently attached FAD cofactor, was substituted by tyrosine, phenylalanine, tryptophan and methionine. Variant H103Y displayed a five-fold increase of oxygen reactivity. Stopped flow analysis revealed that the mutation slowed down the reductive half-reaction whereas the oxidative half-reaction was affected to a minor degree. No alterations in the secondary structure were observed, but disruption of the FAD bond had negative effects on thermal and conformational stability. We also engineered PDH by systematically removing several N-glycosylation sites, in order to improve performance by reducing the distance of the active site to the electrode surface, improving accessibility for redox polymers and facilitate denser enzyme packing on the electrode. One glycosylation site, N319, was found to be indispensable for functional expression and folding of the enzyme, as no active variants could be obtained. A variant with two sites, N75 and N175 near the active site entrance, exchanged against G and Q, respectively, showed significantly improved properties when used on electrodes with Osmium-based redox polymers (Mediated Electron Transfer) and a low level of Direct Electron Transfer. The lack of two glycosylation sites results in minor negative effects on expression yield and stability. Removal of a third site, N252, on the opposite side of the active site entrance, does not bring further improvements in catalysis and electron transfer, but is detrimental to functional expression and stability. The bulk of hyperglycosylation of the recombinantly expressed enzyme (observed in both Pichia pastoris and Saccharomyces cerevisiae) is located only on this one glycosylation site. Please click Additional Files below to see the full abstract

Die PIAAC-Grundkompetenzen von Personen mit Lehrabschluss: ein Ländervergleich zwischen Österreich und Deutschland

Der vorliegende Beitrag geht der Frage nach, welche grundlegenden Unterschiede in der Lehrlingsausbildung bei einem Vergleich Österreich - Deutschland festzustellen sind und ob sich diese Differenzen auch in unterschiedlichen PIAAC-Grundkompetenzen widerspiegeln. Die empirischen Ergebnisse fallen überraschend aus: Trotz eines nachteiligen soziokulturellen Hintergrunds und geringerer Vorbildung sind die Personengruppen mit einem Lehrabschluss, welche nur über niedrige Lese- bzw. Alltagsmathematikkompetenzen verfügen, in Österreich signifikant kleiner. Der Zulauf von Personen mit Abitur hat jedoch in den letzten Jahren in Deutschland deutlich zugenommen, was sich auch in einem gehobenen Leistungsniveau bei den Lehrlingen niederschlägt. Da neueste Studien auf die zunehmende Bedeutung ausreichender Grundkompetenzen zum Zwecke anhaltender Beschäftigungsfähigkeit im späteren Erwerbsleben hinweisen, stellt sich die Frage, ob die Lehrlingsausbildung in Österreich ihren - eher kurzfristigen - Fokus bzgl. der Vermittlung von berufsspezifischen Kompetenzen nicht zugunsten einer stärkeren Betonung von zentralen Schlüsselkompetenzen ändern sollte

Auswirkungen unterschiedlicher Bildungslaufbahnen im vorschulischen und schulischen Bereich auf die PIAAC-Schlüsselkompetenzen

Erste Analysen der PIAAC-Daten weisen auf die hohe Relevanz des formalen Bildungssystems für den Aufbau der Schlüsselkompetenzen Lesen und Alltagsmathematik hin (vgl. Statistik Austria, 2013). Vor dem Hintergrund der Relevanz des Kompetenzerwerbs in der frühen Kindheit (vgl. Heckman, 2013) legt dieser Beitrag den Fokus bereits auf den Beginn der vorschulischen Betreuung und Erziehung, also den Kindergarten, und untersucht in einem nächsten Schritt die schulischen Bildungswege auf der Sekundarstufe I und II und deren Zusammenhang mit den bei PIAAC gemessenen Schlüsselkompetenzen

Mouse Mammary Tumor Virus Promoter-Containing Retroviral Promoter Conversion Vectors for Gene-Directed Enzyme Prodrug Therapy are Functional In Vitro and In Vivo

Gene directed-enzyme prodrug therapy (GDEPT) is an approach for sensitization of tumor cells to an enzymatically activated, otherwise nontoxic, prodrug. Cytochrome P450 2B1 (CYP2B1) metabolizes the prodrugs cyclophosphamide (CPA) and ifosfamide (IFA) to produce the cytotoxic substances phosphoramide mustard and isophosphoramide mustard as well as the byproduct acrolein. We have constructed a retroviral promoter conversion (ProCon) vector for breast cancer GDEPT. The vector allows expression of CYP2B1 from the mouse mammary tumor virus (MMTV) promoter known to be active in the mammary glands of transgenic animals. It is anticipated to be used for the generation of encapsulated viral vector producing cells which, when placed inside or close to a tumor, will act as suppliers of the therapeutic CYP2B1 protein as well as of the therapeutic vector itself. The generated vector was effectively packaged by virus producing cells and allowed the production of high levels of enzymatically active CYP2B1 in infected cells which sensitized them to killing upon treatment with both IFA and CPA. Determination of the respective IC50 values demonstrated that the effective IFA dose was reduced by sixteen folds. Infection efficiencies in vivo were determined using a reporter gene-bearing vector in a mammary cancer cell-derived xenograft tumor mouse model

Characterization of three pyranose dehydrogenase isoforms from the litter-decomposing basidiomycete Leucoagaricus meleagris (syn. Agaricus meleagris)

Nicht verfügbarMultigenicity is commonly found in fungal enzyme systems, with the purpose of functional compensation upon deficiency of one of its members or leading to enzyme isoforms with new functionalities through gene diversification. Three genes of the flavin-dependent glucosemethanolcholine (GMC) oxidoreductase pyranose dehydrogenase (AmPDH) were previously identified in the litter-degrading fungus Agaricus (Leucoagaricus) meleagris, of which only AmPDH1 was successfully expressed and characterized. The aim of this work was to study the biophysical and biochemical properties of AmPDH2 and AmPDH3 and compare them with those of AmPDH1. AmPDH1, AmPDH2 and AmPDH3 showed negligible oxygen reactivity and possess a covalently tethered FAD cofactor. All three isoforms can oxidise a range of different monosaccarides and oligosaccharides including glucose, mannose, galactose and xylose, which are the main constituent sugars of cellulose and hemicelluloses, and judging from the apparent steady-state kinetics determined for these sugars, the three isoforms do not show significant differences pertaining to their reaction with sugar substrates. They oxidize glucose both at C2 and C3 and upon prolonged reaction C2 and C3 double-oxidized glucose is obtained, confirming that the A. meleagris genes pdh2 (AY753308.1) and pdh3 (DQ117577.1) indeed encode CAZy class AA3_2 pyranose dehydrogenases. While reactivity with electron donor substrates was comparable for the three AmPDH isoforms, their kinetic properties differed significantly for the model electron acceptor substrates tested, a radical (the 2,2′-azino-bis[3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid] cation radical), a quinone (benzoquinone) and a complexed iron ion (the ferricenium ion). Thus, a possible explanation for this PDH multiplicity in A. meleagris could be that different isoforms react preferentially with structurally different electron acceptors in vivo.(VLID)192910