Analysis of in vitro binding of dietary fibers by the phytoestrogen, daidzein, in the presence and absence of iron

Includes bibliographic references

Adverse Events Associated with Methimazole Therapy of Graves' Disease in Children

Objective. Graves' disease is the most common cause of hyperthyroidism in the pediatric population. Antithyroid medications used in children and adults include propylthiouracil (PTU) and methimazole (MMI). At our center we have routinely used MMI for Graves' disease therapy. Our goals are to provide insights into adverse events that can be associated with MMI use. Methods. We reviewed the adverse events associated with MMI use in our last one hundred consecutive pediatric patients treated with this medication. Results. The range in the patient age was 3.5 to 18 years. The patients were treated with an average daily dose of MMI of 0.3±0.2 mg/kg/day. Adverse events attributed to the use of the medication were seen in 19 patients at 17±7 weeks of therapy. The most common side effects included pruritus and hives, which were seen in 8 patients. Three patients developed diffuse arthralgia and joint pain. Two patients developed neutropenia. Three patients developed Stevens-Johnson syndrome, requiring hospitalization in 1 child. Cholestatic jaundice was observed in 1 patient. No specific risk-factors for the development of adverse events were identified. Conclusions. MMI use in children is associated with a low but real risk of minor and major side effects

Antivirale Testung supramolekularer Wirkstoffträger auf Biopolymerbasis für Antisense- und siRNA-Wirkstoffe gegen HIV- 1

Die Entwicklung von Wirkstoffträgern für Antisense-Oligdesoxyonukleotide auf der Basis von Protamin-Nanopartikeln stellt einen interessanten Ansatz für antivirale Strategien dar. So konnte gezeigt werden, dass bereits ab einem 1,5-fachen Massenüberschuss an Protamin eine spontane Komplexbildung mit Antisense-Wirkstoffen stattfindet, die einen Größenbereich von etwa 200 nm aufweisen und durch eine Oberflächenladung von ca. + 20 mV charakterisiert sind. Aufgrund dieser physikalischen Eigenschaften besitzen diese Nanopartikel nahezu ideale Eigenschaften, die intrazelluläre Verfügbarkeit von Antisense-Wirkstoffen entscheidend zu verbessern. Eine sehr gute zelluläre Aufnahme von Protamin/Antisense-Nanopartikeln konnte entsprechend in primären humanen Makrophagen als auch in lymphozytären T-Zellen gezeigt werden. Die Anwendung dieser Wirkstoffträger in den beschriebenen Zellen erwies sich dabei als sehr gut verträglich und zeigte keine toxischen Wirkungen in insgesamt drei unterschiedlichen Testverfahren zur Bestimmung der Zelltoxizität. Darüber hinaus konnte gezeigt werden, dass Protamin/Antisense-Nanopartikel mit unmodifizierten Antisense-Oligodesoxynukleotiden ein sehr günstiges intrazelluläres Auflösungsverhalten besitzen, was zu einer kontinuierlichen Freisetzung des inkorporierten Antisense- Wirkstoffs führte. Dabei wurde deutlich, dass nach spätestens 72 Stunden ein vollständiger Zerfall des Nanopartikels stattfand und der Wirkstoff sich gleichmäßig in intrazellulären Kompartimenten verteilte. Im Gegensatz dazu stellen Protamin/Antisense-Nanopartikel mit modifizierten Phosphorothioat-Wirkstoffen ein äußerst stabiles System dar, das zu keiner merklichen intrazellulären Wirkstofffreisetzung selbst nach 72 Stunden führte. Es konnte gezeigt werden, dass Protamin/AS-ODN-Nanopartikel die Expression eines von einem lentiviralen Vektor exprimierten Reportergens konzentrationsabhängig in primären humanen Makrophagen inhibieren konnte. Die antivirale Wirksamkeit dieser Wirkstoffträger konnte auch gegen das HIV-1-spezifische Transaktivatorprotein Tat in transient transfizierten Zielzellen der HIV-1-Infektion spezifisch demonstriert werden. Hier wurde eine selektive Inhibition der Tat-vermittelten Transaktivierung von 35 % bei einer Konzentration von 2 MikroM in Jurkat-Zellen nachgewiesen. Auch in primären Makrophagen, die mit einem HIV-1-Wildtypisolat infiziert wurden, führte die Anwendung von Protamin/AS-ODN-Nanopartikeln mit spezifischen Sequenzen gegen ein HIV-1-Gen zu einer deutliche Reduktion der Virusausbreitung in der Kultur. Bei einer wiederholten Behandlung von HIV-1-infizierten Makrophagen mit Protamin/AS-ODN-Nanopartikel in einer Konzentration von 2 MikroM zeigten nur einige wenige Zellen eine Infektion mit dem Virus, während sich in unbehandelten Zellen eine komplett durchinfizierte Kultur manifestiert hatte. Entsprechend der ungünstigen Bioverfügbarkeit von AS-PTO-Wirkstoffen nach intrazellulärem Transport in Form von Protamin-Nanopartikeln konnte für diese Formulierungen keine biologische Wirkung in Zellkultursystemen nachgewiesen werden. Die Inkorporation von destabilisierenden Zusätzen in die Nanopartikelmatrix bietet hier Möglichkeiten, die intrazelluläre Dekomplexierung dieser Wirkstoffträger günstig zu beeinflussen. Als Neuentwicklung konnte ein kolloidales Trägersystem für siRNA-Wirkstoffe auf der Basis von Protamin-Nanopartikeln entwickelt werden. Es konnte gezeigt werden, dass Protaminbase als auch Protaminsulfat siRNA-Wirkstoffe ab einem 2,5-fachen Massenüberschuss komplexieren. Protamin basierte Nanopartikel für siRNA-Wirkstoffe waren durch ein sehr günstiges Zellaufnahmeverhalten und fehlende zytotoxische Wirkung in primären humanen Makrophagen gekennzeichnet. Trotz dieser idealen Ausgangsbedingungen zeigten biologische Wirksamkeitstestungen sowohl gegen das endogene Protein Lamin A/C als auch virale Hemmversuche in HIV-1- infizierten primären Makrophagen nur marginale Effekte. Eine weitere Optimierung der Nanopartikelzusammensetzung und Untersuchungen zur intrazellulären Stabilität sind nötig, um die biologische Aktivität dieser Formulierungen entscheidend zu verbessern. Oberflächenmodifizierte Nanopartikel auf der Basis von Gelatine erwiesen sich in den durchgeführten Experimente als besonders vielversprechend. Hier konnte gezeigt werden, dass ein spezifisches Targeting von T-Zellen mit CD3-Gelatine-Nanopartikel realisiert werden kann, die auf ihrer Oberfläche kovalent einen anti-CD3-Antikörper tragen, der gegen die T-Zell spezifische Zeta-Kette des T-Zell-Rezeptor-Komplexes gerichtet ist. Untersuchungen mit konfokaler Mikroskopie und Durchflusszytometrie zeigten, dass dabei die Zellaufnahme dieser Wirkstoffträger von der Expression des durch den Antikörper erkannten Zielantigens auf der Oberfläche der Zielzellen ist. In Zellen mit besonders starker Expression des CD3-Epitops wurden Gelatine-Nanopartikel mit oberflächengebundenem anti-CD3-Antikörper zu einem sehr bedeutendem Ausmaß selektiv aufgenommen. In Kompetitionsexperimenten mit freiem anti-CD3-Antikörper konnte diese Aufnahme deutlich reduziert werden, was für die selektive Bindung und Internalisierung der CD3-Gelatine- Nanopartikel über den oberflächengebundenen Antikörper schließen läßt. Durch diese Untersuchungen konnte gezeigt werden, dass CD3-Gelatine-Nanopartikel das Potential besitzen, als selektives Wirkstoffträgersystem für T-Zellen eingesetzt zu werden

Vav1 inhibits RANKL-induced osteoclast differentiation and bone resorption

Vav1 is a Rho/Rac guanine nucleotide exchange factor primarily expressed in hematopoietic cells. In this study, we investigated the potential role of Vav1 in osteoclast (OC) differentiation by comparing the ability of bone marrow mononuclear cells (BMMCs) obtained from Vav1-deficient (Vav1−/−) and wild-type (WT) mice to differentiate into mature OCs upon stimulation with macrophage colony stimulating factor and receptor activator of nuclear kappa B ligand in vitro. Our results suggested that Vav1 deficiency promoted the differentiation of BMMCs into OCs, as indicated by the increased expression of tartrate-resistant acid phosphatase, cathepsin K, and calcitonin receptor. Therefore, Vav1 may play a negative role in OC differentiation. This hypothesis was supported by the observation of more OCs in the femurs of Vav1−/− mice than in WT mice. Furthermore, the bone status of Vav1−/− mice was analyzed in situ and the femurs of Vav1−/− mice appeared abnormal, with poor bone density and fewer number of trabeculae. In addition, Vav1-deficient OCs showed stronger adhesion to vitronectin, an αvβ3 integrin ligand important in bone resorption. Thus, Vav1 may inhibit OC differentiation and protect against bone resorption

Untersuchung zum Zusammenhang sozialmedizinischer Daten und der Prävalenz der Hüftdysplasie an einer großen Entbindungsklinik in Ostbayern

Die vorliegende Studie zeigt eine Tendenz zu einer leicht erhöhten Rate der kongeni-talen Hüftdysplasie (Inzidenz=6,2% unter den Neugeborenen; Prävalenz=10,82% unter den befragten Eltern) sowie einen deutlich erhöhten Anteil an bei Geburt rei-fungsverzögerten IIa Hüftgelenken von 35,56% unter den Neugeborenen. Um ein etwaig vorliegendes Hüftdysplasienest in der bayrischen Oberpfalz ausmachen zu können, bedürfe es jedoch in der Zukunft weiterer Studien an umfassenderen Patien-tenkollektiven. Folgende Risikofaktoren stellen sich bezüglich der Entwicklung einer kongenitalen Hüftdysplasie als statistisch signifikant dar: • Beckenendlage (P= 0,0065 nach Fisher). Die Wahrscheinlichkeit, als Neugeborenes aus Beckenendlage an mindestens einem pathologischen Hüftgelenk zu leiden, liegt bei 15,38%. Der Anteil des reifungsverzö-gerten Hüfttyps IIa zeigt sich mit 46,15% unter den Neugeborenen aus Beckenend-lage als am höchsten unter allen ermittelten Geburtslagen. • Plurigravidität (P= 0,0014 nach Fisher). Die Wahrscheinlichkeit, als drittgeborenes Kind an einem dysplastischen Hüftgelenk zu leiden, beträgt 21,43%. Folgende Risikofaktoren stellen sich bezüglich eines erhöhten Risikos einer Hüft-dysplasie als nicht statistisch signifikant dar: • Weibliches Geschlecht (P= 0,2420 nach Fisher). Mädchen zeigen sich 4,39-mal häufiger von pathologischen Hüften betroffen als Jungen. Der reifungsverzögerte Hüfttyp IIa betrifft mit einem Anteil von 45,54% mehr Mädchen als Jungen mit einem Anteil von 30,49%. Unter Einbezug des reifungsver-zögerten Hüfttyps IIa stellt sich das weibliche Geschlecht als signifikanter Risikofak-tor dar (P= 0,0238 nach Fisher). • Positive Familienanamnese (P=1 nach Fisher). Jedoch ergibt sich für jene Neugeborene, deren Eltern (Verwandte 1. Grades) von einer Hüftdysplasie betroffen waren, eine Wahrscheinlichkeit von 5 % an pathologi- schen Hüftgelenken zu erkranken, im Vergleich zu 0% wenn Verwandtschaft höhe-ren Grades betroffen war. Die hohe Co-Inzidenz unter Geschwistern kann anhand dieser Studie nicht bestätigt werden (0%). • Linke Seite (P=1 nach Fisher). Linke Hüften zeigen sich 1,33-mal häufiger pathologisch ausgebildet als rechte Hüf-ten. Durchschnittlich ergibt sich jedoch auf beiden Seiten ein Hüfttyp Ia nach Graf. • Frühgeburt (P=0,2002 nach Fisher). Im vorliegenden Studienkollektiv beläuft sich die Wahrscheinlichkeit des Auftretens von pathologischen Hüftgelenken bei Frühgeborenen auf 16,67% • Hypotrophie (P=1 nach Fisher). Die Wahrscheinlichkeit, als hypotrophes Neugeborenes an einer Hüftdysplasie zu leiden, beträgt 2,78%. • Hypertrophie (P=0,1733 nach Fisher). Unter den hypertrophen Neugeborenen liegt die Wahrscheinlichkeit von einer dysplastischen Hüfte betroffen zu sein bei 8,34%. Bezogen auf den reifungsverzö-gerten Hüfttyp IIa findet sich unter den hypertrophen Neugeborenen mit 54,17% der größte prozentuale Anteil. Das Durchschnittsgewicht der Säuglinge steigert sich mit zunehmendem Unreifegrad der Hüften (3387,78 Gramm bei mindestens einem Hüft-typ Ia/b; 3444,63 Gramm bei mindestens einem Hüfttyp IIa; 3445,50 Gramm bei min-destens einer dysplastischen Hüfte). • Art der Entbindung (P=0,7063 nach Fisher). Unter den vaginal Entbundenen liegt eine Wahrscheinlichkeit von 2,88% vor, von einem pathologischen Hüftgelenk betroffen zu sein, wohingegen sich die Wahr-scheinlichkeit unter den mittels Sectio Entbundenen auf 4,44% beläuft. • Geburt in der kalten Jahreszeit (P=0,2594 nach Fisher). Die Wahrscheinlichkeit, bei Geburt im Herbst/Winter an einer pathologischen Hüfte zu leiden, liegt um den Faktor 2,77 höher, nämlich bei 5,43%, als bei Geburt im Früh-ling/Sommer. Bezüglich des bei Geburt reifungsverzögerten Hüfttyps IIa kann diese Tendenz nicht bekräftigt werden (Anteil von 41,18% in den warmen Monaten im Ver-gleich zu 29,35% in den kalten Monaten). Mit 37,11% erweist sich ein relativ hoher Anteil der Eltern bezüglich der Hüftdyspla-sie als nicht aufgeklärt. Es kann kein Unterschied bezüglich der Inzidenz der Hüft-dysplasie zwischen den Neugeborenen aufgeklärter sowie unaufgeklärter Eltern ausgemacht werden (P=0,1532 nach Fisher). Jedoch führen höheres Wissen und Verständnis um eine Erkrankung zu einer besseren Compliance. Deswegen ist eine adäquate Aufklärung gerade im Falle einer Hüftdysplasie- wo ein frühzeitiger Be-handlungsbeginn sowie Geduld bis zum Eintreten der Behandlungsergebnisse ge-fordert sind- umso wichtiger, um eine adäquate Mitarbeit der Eltern zu erzielen