Produção in vitro de embriões derivados de oócitos obtidos em diferentes fases da onda folicular de vacas Nelore(Bos taurus indicus)

O objetivo foi avaliar, em vacas Nelore, a influência da fase da onda folicular na qualidade e quantidade dos oócitos recuperados, através da OPU (ovum pick-up), assim como a produção de blastocistos. Todos os animais (n=10) receberam em dia aleatório do ciclo estral um implante auricular de progestágeno (Crestar) e uma aplicação de 2 mg de Benzoato de Estradiol (Estrogin) com o objetivo de sincronizar a onda folicular. Após sete dias o implante foi retirado e foi aplicada uma dose de 2ml de um análogo da PGF2 (Preloban®). Após de 24 hs as doadoras foram submetidas à aspiração do folículo dominante (AFD) sendo então este momento considerado dia 0. Após a AFD, as doadoras foram submetidos a OPU nos dias 3, 5, 7, e 9 (Grupo D3, D5, D7 e D9) da nova onda folicular. Foram realizadas quatro fases (Fase 1, 2, 3 e 4) onde os animais foram trocados de grupo a cada fase, de forma que cada animal foi submetido aos quatro tratamentos. A cada fase o protocolo era iniciado com dois dias de intervalo entre um grupo e outro, iniciando pelo grupo D9 e na seqüência os grupos D7, D5, D3, desta forma todas as doadoras foram aspiradas no mesmo dia, porém com a onda folicular em dias diferentes. O objetivo deste delineamento foi para que as aspirações fossem efetuadas no mesmo dia, de forma que os oócitos recuperados fossem maturados, fertilizados e cultivados in vitro numa mesma sessão de PIV. Duas hipóteses foram testadas: 1- O número de oócitos viáveis recuperados seria maior na fase inicial da onda folicular (dia 3) ou logo após a divergência folicular (dia 5) do que obtidos em períodos mais tardios da fase de dominância (dias 7 e 9). 2- Os oócitos aspirados no início da onda folicular (dia 3 ou 5) teriam melhor competência e produziriam maior número de blastocistos do que oócitos obtidos no final da onda (dias 7 e 9), pois estes estariam num grau de atresia avançado. Não houve diferença no número...The objective of this experiment was to evaluate in Nelore cows the influence of the moment of the follicular wave in the quality and amount of the recovered oocytes, through the OPU, (ovum pick-up), as well as the production of blastocysts. All the animals (n=10) received in random day of the estrous cycle an auricular progestogen implant (Crestar) and was administered of 2mg of estradiol benzoate (Estrogin) with the objective of synchronizing the follicular wave. After seven days the implant was removed and a dose of 2ml of an analogous of PGF2 was administrated (Preloban®). After 24 hours the donors were submitted later of the dominant follicle aspiration (DFA) being then this moment considered day 0. After DFA the donors were submitted to OPU after on the 3, 5, 7, and 9 days (Groups D3, D5, D7 and D9) of the new follicular wave. Four sessions were accomplished (sessions 1, 2, 3 and 4) where the animals were changed from group to each phase, so that each animal it was submitted to the four treatments. To each phase the protocol was begun with two days of interval among a group and other, beginning for the group D9 and in the sequence the groups D7, D5, D3, this way all of the donors were aspirated in the same day, however with the follicular wave in different days. The objective of this outline was so that the aspirations were made in the same day, so that the recovered oocytes they went maturated, fertilized and development in vitro in a same session of IVP. Two hypotheses were tested: 1 - the number of recovered viable oocytes would be larger numerical in the initial phase of the wave follicular (day 3) or soon after the follicular divergence (day 5) of those obtained in later periods of the dominancy phase (days 7 and 9). 2 - The oocytes aspirated in the beginning of the follicular wave (day 3 or 5) they would be better competent and they would produce larger number of blastocysts than oocytes obtained in the end of the wave ...Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP

Chemically Assisted Enucleation Results in Higher G6PD Expression in Early Bovine Female Embryos Obtained by Somatic Cell Nuclear Transfer

Despite extensive efforts, low efficiency is still an issue in bovine somatic cell nuclear transfer (SCNT). The hypothesis of our study was that the use of cytoplasts produced by chemically assisted enucleation (EN) would improve nuclear reprogramming in nuclear transfer (NT)-derived embryos because it results in lower damage and higher cytoplasm content than conventional EN. For that purpose, we investigated the expression of two X-linked genes: X inactive-specific transcript (XIST) and glucose 6-phosphate dehydrogenase (G6PD). In the first experiment, gene expression was assessed in day-7 female blastocysts from embryonic cell NT (ECNT) groups [conventional, ECNT conv; chemically assisted, ECNT deme (demecolcine)]. Whereas in the ECNT conv group, only one embryo (25%; n = 4) expressed XIST transcripts, most embryos showed XIST expression (75%; n = 4) in the ECNT deme group. However, no significant differences in transcript abundance of XIST and G6PD were found when comparing the embryos from all groups. In a second experiment using somatic cells as nuclear donors, we evaluated gene expression profiles in female SCNT-derived embryos. No significant differences in relative abundance (RA) of XIST transcripts were observed among the groups. Nonetheless, higher (p < 0.05) levels of G6PD were observed in SCNT deme and in vitro-derived groups in comparison to SCNT conv. To know whether higher G6PD expression in embryos derived from SCNT chemically assisted EN indicates higher metabolism in embryos considered of superior quality or if the presence of higher reactive oxygen species (ROS) levels generated by the increased oxygen consumption triggers G6PD activation, the expression of genes related to stress response should be investigated in embryos produced by that technique.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP

Museu da Paisagem: desafios para uma cidadania paisagística

Artigo baseado na comunicação proferida no VIII Congresso de Estudos Rurais & VIII Encontro Rural RePort: Paisagens culturais: heranças e desafios no território, realizado na Escola Superior Agrária do Instituto Politécnico de Viana do Castelo, Viana do Castelo, 05-07 , dezembro 2019.Englobando tanto os aspetos materiais como os aspetos imateriais e intangíveis, o conceito de paisagem é atravessado por uma rica rede de narrativas feita da interação, ao longo do tempo, das mais diversas atividades humanas no território natural habitado, vivenciado, sentido e culturalmente construído. Sendo um sistema vivo, dinâmico e mutável, uma paisagem não pode ser congelada ou encerrada entre paredes, pois transborda e envolve as vidas dos seus atores sociais, sempre em permanente transformação. A promoção do diálogo que a iniciativa “Observatórios de Paisagem, desafios para além do enquadramento jurídico” incentiva é um passo importante para uma ação concertada e coerente. O propósito desta comunicação é o de partilhar o desafio da criação de um Museu da Paisagem, uma plataforma museológica (www.museudapaisagem.com) que pretende contribuir para a construção e manutenção de paisagens saudáveis, equilibradas nas suas diversas tensões e nos diferentes ecossistemas envolvidos. Este é um projeto inclusivo e participativo que pretende ser uma solução artística e cultural assente na valorização dos territórios, trilhando o caminho para uma cidadania paisagística cada vez mais desperta.info:eu-repo/semantics/publishedVersio