Concordancia de antígenos de dengue en el ELISA de captura de IgM (MAC ELISA) en el IICS-UNA

El dengue es una enfermedad aguda grave considerada actualmente como infección reemergente, cuyo vector principal es el Aedes aegypti. En Paraguay en el 2007 fueron reportados 28.181 casos, 55 se clasificaron como fiebre hemorrágica del dengue de los cuales 7 fallecieron. El 90% de los casos fueron de Asunción y del Departamento Central, 10% del resto del país. En los últimos años se han desarrollado diferentes sistemas inmunoenzimáticos para el diagnóstico del dengue, entre ellos el ELISA de captura de IgM (MAC ELISA). El objetivo de este estudio observacional analítico de corte transverso fue comparar la prueba del MAC ELISA desarrollada en el Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud (IICS) utilizando antígenos suministrados por el Instituto Pedro Kouri (IPK) de Cuba y el Evandro Chagas de Brasil, con el kit comercial ELISA IgM por captura para virus del dengue (Focus Diagnostics Inc. Cypress, CA, USA). Fueron seleccionados al azar 92 sueros de pacientes codificados que concurrieron al IICS con sospecha dedengue, respetándose la confidencialidad de los mismos. La concordancia obtenida fue del 94.6% (Índice Kappa: 0.891) utilizando el antígeno del IPK y 96.7% (Índice Kappa: 0.9350) con el antígeno del Evandro Chagas, mostrándose alta significancia estadística (p<0.00001) en ambos casos. La excelente concordancia obtenida con los dos antígenos indica que los mismos pueden ser utilizados indistintamente en la prueba del MAC ELISA desarrollada en el IICS, a fin de apoyar el diagnóstico del dengue a menor costo y que sería de producción local

Perfil clínico, hematológico y serológico en pacientes con sospecha de dengue del IICS-UNA, 2009-2013

El dengue constituye una de las enfermedades transmitidas por mosquitos más importante a nivel mundial. La enfermedad puede cursar con un cuadro asintomático, presentarse con un amplio rango de manifestaciones clínicas inespecíficas o cierto porcentaje puede derivar en casos graves. Este estudio observacional descriptivo de corte transverso tuvo como objetivo determinar las características clínicas, parámetros hematológicos y presencia de IgM en 92 pacientes que acudieron al IICS-UNA con sospecha clínica de dengue en el periodo 2009 al 2013. Se utilizó el MAC-ELISA desarrollado en el IICS-UNA, se registraron los datos clínicos-epidemiológicos a través de una encuesta y se determinaron los parámetros hematológicos. Se obtuvieron resultados positivos para IgM en 51/92 (55%) pacientes y resultados negativos en 41/92 (45%). Las características clínicas más frecuentes fueron: fiebre, cefalea, mialgias y artralgias. Entre los pacientes con IgM positiva, 14/51 (27%) manifestaron dolores abdominales, 19/51 (37%) reportaron letargo o postración y 20/51 (39%) declararon tener náuseas y/o vómitos, 4/51 (8%) presentaron leucopenia, 10/51 (20%) valores de hematocrito disminuido y 6/51 (12%) plaquetopenia. Sólo 13/92 (14%) pacientes declararon haber cursado con la enfermedad anteriormente. Del total de pacientes, 4/92 (4%) manifestaron haber presentado algún tipo de hemorragia. Los resultados obtenidos en el estudio refuerzan la importancia de integrar todos los parámetros posibles: detección de IgM, perfil hematológico y la clínica del paciente con sospecha de dengue para brindar un mejor diagnóstico. Así también, es necesario resaltar en cuanto a los signos de alarma para una intervención rápida a fin de evitar complicaciones

Implementation of a flavivirus detection system in mosquitoes

Los Flavivirus constituyen virus transmitidos por artrópodos, principalmente mosquitos. Pueden producir enfermedades en humanos y animales, también incluyen virus específicos de insectos que solo infectan y se replican en los insectos, no así en vertebrados. En Paraguay los virus dengue, fiebre amarilla y Zika fueron detectados en infecciones humanas, pero los estudios de flavivirus en mosquitos son aún escasos. Por ello, el objetivo del presente estudio fue implementar un sistema de detección de flavivirus en mosquitos en el IICS-UNA. Primero, se organizaron capacitaciones en colecta, preparación de pools y procesamiento por técnicas de RT-PCRs convencionales realizadas por expertos internacionales a profesionales locales (bioquímicos y biólogos). Además, se implementaron planillas de registro de datos y de control de transporte de muestras de los lugares de colectas hasta el IICS-UNA. Se prepararon en total 201 pools de 1 a 35 mosquitos cada uno agrupados por especie, localidad, entre otros criterios. Para asegurar la integridad del RNA extraído se realizó la detección de un control interno (Actina-1), siendo todos los pools positivos para el mismo, 91/201 pools fueron positivos para flavivirus. Se realizó la secuenciación de 19/91 pools positivos para flavivirus identificándose flavivirus de insectos (detectándose principalmente Culex Flavivirus, cell fusing agents Flavivirus y Kamiti river virus), evidenciando la elevada distribución de estos virus. Estos resultados demuestran que fue factible implementar el sistema de detección de flavivirus en mosquitos, lo cual podría contribuir a fortalecer la vigilancia y control de estas virosis, así como el conocimiento sobre la importancia ecológica de flavivirus de insectos.Fil: Cardozo, Fátima. Instituto de Investigciones En Ciencias de la Salud; ParaguayFil: Rojas, Alejandra. Instituto de Investigaciones En Ciencias de la Salud; ParaguayFil: Bernal, Cynthia. Instituto de Investigaciones En Ciencias de la Salud; ParaguayFil: Ferreira, Luis. Ministerio de Salud Pública y Bienestar Social. Servicio Nacional de Erradicación al Paludismo ; ParaguayFil: Diaz, Luis Adrian. Universidad Nacional de Cordoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Páez, Malvina. Instituto de Investigaciones En Ciencias de la Salud; ParaguayFil: Guillén, Yvalena. Instituto de Investigaciones En Ciencias de la Salud; ParaguayFil: Contigiani de Minio, Marta Silvia. Universidad Nacional de Cordoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Mendoza, Laura. Instituto de Investigaciones En Ciencias de la Salud; Paragua

Búsqueda de flavivirus en individuos con sospecha clínica de dengue y resultado negativo para el antígeno NS1 en Paraguay

Los flavivirus son responsables de una considerable morbi-mortalidad a nivel mundial. Entre ellos, el virus del dengue (DENV) es causante de graves problemas de salud pública en Paraguay. El objetivo del estudio fue detectar infecciones por flavivirus a través de una reacción de RT-nested PCR genérica para flavivirus en 195 muestras de individuos con sospecha de dengue, negativos por el test inmunocromatográfico (antígeno NS1 – DENV), provenientes del área metropolitana de Asunción entre 2011 y 2013. Las muestras positivas para flavivirus fueron sometidas a dos reacciones de RT-nested PCRs específicas para DENV. El límite de detección (LD) para flavivirus fue de 0,2 UFP/reacción. En total 43/195 muestras fueron positivas para flavivirus. De estas, 38/43 (88,4%) correspondieron a DENV (6 DENV-1, 30 DENV-2 y 2 DENV-3). Además, 5/43 casos (11,6%) positivos para flavivirus fueron negativos para DENV por ambas reacciones específicas, pudiendo deberse a infecciones por otros flavivirus. Los resultados sugieren que la utilización de una reacción genérica seguida de otras reacciones específicas para DENV en casos febriles negativos para NS1 por el método inmunocromatográfico permitiría detectar más casos de infecciones por DENV y además, podría contribuir a la identificación de casos debido a infecciones por otros flavivirus

Búsqueda de los virus del nilo occidental, de la encefalitis de san Luis y de la encefalitis equina venezolana en mosquitos de Paraguay – resultados preliminares.

El objetivo general del proyecto fue determinar la presencia de arbovirus encefalíticos (VEEV, WNV y SLEV) en poblaciones humanas y de mosquitos de Paraguay.CONACYT - Consejo Nacional de Ciencias y TecnologíaPROCIENCI

Estudio de Fiebre Amarilla en primates en áreas de brote de los departamentos de San Pedro y Central del Paraguay

La Fiebre Amarilla (FA) es una de las más importantes zoonosis que afecta a poblaciones humanas. La FA silvestre es imposible de ser erradicada, manteniéndose activa en zonas tropicales en África y Sudamérica. Todas las especies de primates son susceptibles y se consideran reservorios en el medio silvestre. La mortalidad es baja, se desconoce su valor con precisión, sin embargo existen epizootias con alta mortalidad, en humanos varía entre 20-50%. El objetivo de este trabajo fue buscar evidencias de FA en primates capturados en áreas de brote de FA de los departamentos de San Pedro y Central del Paraguay mediante la técnica de Neutralización por reducción de placas para FA cepa vacunal 17 D. Los resultados en los 35 primates estudiados fueron negativos, quizás por lo tardío del momento en la toma de muestras y bajo número de primates capturados

Búsqueda de virus encefalíticos (wnv, slev y veev) en sueros de pacientes con sospecha de síndrome febril agudo y trastornos neurológicos.

Los virus del Nilo Occidental (WNV), de la Encefalitis de San Luis (SLEV) y de la Encefalitis Equina Venezolana (VEEV) pueden producir enfermedades febriles agudas que podrían ser confundidas con el dengue u otras patologías; también pueden causar trastornos neurológicos graves. Estos virus todavía no han sido detectados en nuestro país, sin embargo, existen reportes de circulación de los mismos en países limítrofes. El Paraguay cuenta con las condiciones favorables para propiciar el mantenimiento del ciclo de transmisión de estos virus, por lo que se considera de suma importancia el estudio de ellos en pacientes con afecciones previamente mencionadas.CONACYT - Consejo Nacional de Ciencias y TecnologíaPROCIENCI

Detection of neutralizing antibodies against flaviviruses in free-ranging birds, Paraguay (2016-2018)

Saint Louis encephalitis virus (SLEV), West Nile virus (WNV) and Ilheus virus (ILHV) are flaviviruses maintained by enzootic transmission networks between mosquitoes and birds. They have been detected in South America, with no records for Paraguay. We detected the presence of neutralizing antibodies for SLEV, WNV and ILHV in free-ranging birds collected in Paraguay (2016-2018). Four positive samples were detected in resident birds: one SLEV (rufous-bellied thrush), one WNV (barred antshrike) and two ILHV (white-tipped dove and shiny cowbird). These results bring new information about enzootic activity of flaviviruses in Paraguay.Fil: Cardozo, Fátima. Universidad Nacional de Asunción. Rectorado. Instituto de Investigaciones En Cs. de la Salud; ParaguayFil: Bernal, Cynthia. Universidad Nacional de Asunción. Rectorado. Instituto de Investigaciones En Cs. de la Salud; ParaguayFil: Rojas, Alejandra. Universidad Nacional de Asunción. Rectorado. Instituto de Investigaciones En Cs. de la Salud; ParaguayFil: Diaz, Luis Adrian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología Dr. J. M. Vanella; ArgentinaFil: Spinsanti, Lorena Ivana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología Dr. J. M. Vanella; ArgentinaFil: Páez, Malvina. Universidad Nacional de Asunción. Rectorado. Instituto de Investigaciones En Cs. de la Salud; ParaguayFil: Guillén, Yvalena. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología Dr. J. M. Vanella; ArgentinaFil: Lesterhuis, Arne. Asociacion Guyra Paraguay (guyra); ParaguayFil: Yanosky, Alberto. Universidad Autónoma de Encarnación; ParaguayFil: Contigiani de Minio, Marta Silvia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología Dr. J. M. Vanella; ArgentinaFil: Mendoza, Laura. Universidad Nacional de Asunción. Rectorado. Instituto de Investigaciones En Cs. de la Salud; Paragua

Serum biomarkers and anti-flavivirus antibodies at presentation as indicators of severe dengue.

BackgroundDengue is the most common vector-borne viral disease worldwide. Most cases are mild, but some evolve into severe dengue (SD), with high lethality. Therefore, it is important to identify biomarkers of severe disease to improve outcomes and judiciously utilize resources.Methods/principal findingsOne hundred forty-five confirmed dengue cases (median age, 42; range ConclusionsMultiple, readily available factors were associated with SD in this population. These findings will aid in the early detection of potentially severe dengue cases and inform the development of new prognostics for use in acute-phase and serial samples from dengue cases

Alphaviruses: Serological evidence of human infection in Paraguay (2012-2013)

Alphaviruses can produce febrile illness and encephalitis in dead-end hosts such as horses and humans. Within this genus, the Venezuelan Equine Encephalitis virus (VEEV) complex includes pathogenic epizootic subtypes and enzootic subtypes that are not pathogenic in horses (except subtype IE, Mexican strains), although they can cause febrile symptoms in humans. The Rio Negro virus (RNV - VEEV subtype VI) circulates in Argentina, where it was associated with undifferentiated febrile illness. Mayaro (MAYV) and Una (UNAV) viruses belong to a different group, the Semliki Forest virus complex, with confirmed circulation. Objective: The present study aimed to determine RNV, MAYV, and UNAV seroprevalences by plaque reduction neutralization test in 652 samples of Paraguayan individuals mainly from the Central Department, between years 2012 and 2013. Methods: Samples with antibodies titer >1:20 against RNV were also tested for Mosso das Pedras - subtype IF, subtype IAB, and Pixuna (PIXV) - subtype IV viruses that belongs to VEEV antigenic complex. Results: The overall seroprevalence of RNV was 3.83%, and for UNAV it was 0.46%, and no neutralizing antibodies were detected against MAYV in the studied population. Two of the twenty-seven heterotypic samples were positive for PIXV. The 50.1% of neutralizing antibody titers against RNV were high (equal to or greater than 1/640), suggesting recent infections. The effect of age on the prevalence of RNV was negligible. Conclusions: These results bring new information about neglected alphaviruses in South America, and these data will serve as the basis for future studies of seroprevalence of other VEEV, and studies to search potential hosts and vectors of these viruses in the region.Fil: Cardozo, Fátima. Universidad Nacional de Asunción. Rectorado. Instituto de Investigaciones En Cs. de la Salud; ParaguayFil: Konigheim, Brenda Salome. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología "Dr. J. M. Vanella"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Albrieu Llinás, Guillermo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología "Dr. J. M. Vanella"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Rivarola, María Elisa. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología "Dr. J. M. Vanella"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Aguilar, Javier. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología "Dr. J. M. Vanella"; ArgentinaFil: Rojas, Alejandra. Universidad Nacional de Asunción. Rectorado. Instituto de Investigaciones En Cs. de la Salud; ParaguayFil: Quaglia, Agustín Ignacio Eugenio. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología "Dr. J. M. Vanella"; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Laboratorio de Arbovirus y Arenovirus; ArgentinaFil: Paez, Malvina. Universidad Nacional de Asunción. Rectorado. Instituto de Investigaciones En Cs. de la Salud; ParaguayFil: Guillén, Yvalena. Universidad Nacional de Asunción. Rectorado. Instituto de Investigaciones En Cs. de la Salud; ParaguayFil: Diaz, Luis Adrian. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología "Dr. J. M. Vanella"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Vallejos, María Asunción. Universidad Nacional de Asunción. Rectorado. Instituto de Investigaciones En Cs. de la Salud; ParaguayFil: Herebia, Lilian. Universidad Nacional de Asunción. Rectorado. Instituto de Investigaciones En Cs. de la Salud; ParaguayFil: Recalde, María Lidia. Universidad Nacional de Asunción. Rectorado. Instituto de Investigaciones En Cs. de la Salud; ParaguayFil: Contigiani de Minio, Marta Silvia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología "Dr. J. M. Vanella"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Mendoza, Laura. Universidad Nacional de Asunción. Rectorado. Instituto de Investigaciones En Cs. de la Salud; Paragua