Comparison of photoreactivity of Folch extracts of Bruch’s membrane isolated from human eye globes of different age groups

W tej pracy licencjackiej podjęto się zbadania i porównania fotoreaktywności ekstraktów lipidowych z błon Brucha izolowanych z oczu ludzkich od donorów z trzech grup wiekowych. Praca podejmuje zatem tematykę zmian starczych w błonie Brucha jak i możliwego związku pomiędzy procesem starzenia w obszarze błony Brucha a stresem oksydacyjnym w siatkówce. W celu uzyskania ekstraktów lipidowych z badanych błon Brucha wykonano ekstrakcję metodą Folcha. Fotoreaktywność ekstraktów badano w układzie liposomowym oraz w roztworach homogenicznych przy wykorzystaniu metod oksymetrii EPR, pułapkowania spinowego EPR oraz bezpośredniej detekcji fosforescencji tlenu singletowego. Wykazano, że ekstrakty lipidowe z błon Brucha z wszystkich grup wiekowych są fotoreaktywne, generują tlen singletowy oraz aniorodnik ponadtlenkowy podczas naświetlania światłem niebieskim. Nie zaobserwowano jednoznacznej zmiany fotoreaktywności z wiekiem dawców.In this bachelor thesis, photoreactivity of lipid extracts from Bruch's membranes isolated from human eyes from donors of three age groups was investigated. The work addresses also aging changes in Bruch's membrane and the possible relationship between the aging process in the Bruch's membrane area and oxidative stress in the retina. Extraction of lipids from the Bruch’s membranes was performed using the Folch method. Photoreactivity of the extracts was studied both in the liposomal system and in homogeneous solutions using EPR oximetry, EPR spin trapping and direct detection of singlet oxygen phosphorescence. It has been shown that lipid extracts from Bruch's membranes of all age groups are photoreactive - they generate singlet oxygen and superoxide anion upon blue light irradiation. The observed photo reactivity was not related to the age of donors