Papel de locus Ink4/Arf y del sustrato 2 del receptor de la insulina (IRS2) en la diabetes y la aterosclerosis

En el ratón, la inactivación completa del gen que codifica para el sustrato 2 del receptor de la insulina (Irs2-/-) provoca resistencia a insulina, síndrome metabólico y acelera la aterosclerosis. En la presente tesis se pretende profundizar en los mecanismos moleculares implicados en estos procesos patológicos estudiando (1) la expresión de la ruta de la señalización de la insulina mediada por IRS2 en células mononucleares de sangre periféricas de pacientes con SM sensibles y resistentes a insulina, (2) el efecto de la inactivación parcial de IRS2 sobre el desarrollo de la placa de ateroma en ratones hipercolesterolémicos deficientes en apoE y (3) el efecto del bloqueo de la ruta de la señalización de la insulina en la secreción de citoquinas proaterogénicas. Por otro lado, estudios genéticos a gran escala en humanos han demostrado recientemente una asociación entre polimorfismos de base única en la región cromosómica 9p21, cerca del locus Ink4/Arf, y un mayor riesgo de desarrollar Diabetes Mellitus Tipo 2. En la presente tesis, investigamos el efecto del incremento de la expresión del locus Ink4/Arf en el desarrollo de resistencia a insulina e intolerancia a la glucosa en condiciones de envejecimiento fisiológico normal. Para este fin utilizamos ratones transgénicos Super-Ink4/Arf, portadores de una copia extra del locus Ink4/Arf, en los que estudiamos (1) el papel del locus Ink4/Arf en la homeostasis de la glucosa y la insulina durante el envejecimiento, (2) el papel del locus Ink4/Arf en la funcionalidad de las células ß de los islotes pancreáticos y (3) el papel del locus Ink4/Arf en la señalización de la insulina en diferentes tejidos diana

Type 1 diabetic mellitus patientswith increased atherosclerosisriskdisplay decreased CDKN2A/2B/2BAS gene expression in leukocytes

Background: Type 1 diabetes mellitus (T1DM) patients display increased risk of cardiovascular disease (CVD) and are characterized by a diminished regulatory T (Treg) cell content or function. Previous studies have shown an association between decreased CDKN2A/2B/2BAS gene expression and enhanced CVD. In the present study the potential relationship between CDKN2A/2B/2BAS gene expression, immune cell dysfunction and increased cardiovascular risk in T1DM patients was explored. Methods: A cross-sectional study was performed in 90 subjects divided into controls and T1DM patients. Circulating leukocyte subpopulations analysis by flow cytometry, expression studies on peripheral blood mononuclear cell by qPCR and western blot and correlation studies were performed in both groups of subjects. Results: Analysis indicated that, consistent with the described T cell dysfunction, T1DM subjects showed decreased circulating CD4+CD25+CD127- Treg cells. In addition, T1DM subjects had lower mRNA levels of the transcription factors FOXP3 and RORC and lower levels of IL2 and IL6 which are involved in Treg and Th17 cell differentiation, respectively. T1DM patients also exhibited decreased mRNA levels of CDKN2A (variant 1 p16Ink4a), CDKN2A (p14Arf, variant 4), CDKN2B (p15Ink4b) and CDKN2BAS compared with controls. Notably, T1DM patients had augmented pro-atherogenic CD14++CD16+-monocytes, which predict cardiovascular acute events and enhanced common carotid intima-media thickness (CC-IMT). Conclusions: Decreased expression of CDKN2A/2B/2BAS in leukocytes associates with increased CC-IMT atherosclerosis surrogate marker and proatherogenic CD14++CD16+ monocytes in T1DM patients. These results suggest a potential role of CDKN2A/2B/2BAS genes in CVD risk in T1DM