Efficacy of different immunotherapy approaches toward treatment of doxorubicin-resistant and doxorubicinsensitive transplantable rhabdomyosarcoma

Aim: To evaluate the efficacy of different variants of immunotherapy, namely, adoptive LAK-therapy, vaccine therapy and their combination in vivo using transplantable murine MC-rhabdomyosarcoma resistant and sensitive to doxorubicin (Dox). Materials and Methods: The study was carried out on BALB/c mice bearing Dox-sensitive and Dox-resistant transplantable murine MC-rhabdomyosarcoma. LAK-therapy (using lymphocytes from lymph nodes of syngenic mice) was performed starting from day 7 after tumor cell transplantation for 5 days; LAK (3 x 106 cells in 0.2 ml medium) were injected in the region of tumor. The vaccine prepared on the base of tumor cell glycopeptides was administered intraperitoneally at the volume of 0.2 ml before or after tumor transplantation. Efficacy of immunotherapy was evaluated by tumor growth inhibition and life span of animals. Results: By the indexes of tumor growth inhibition and average life span, for animals bearing Dox-sensitive tumors vaccine therapy was the most effective, whilst adoptive LAK-therapy was the most effective for mice bearing Dox-resistant tumors. All applied variants of therapy — adoptive LAK-therapy, vaccine therapy and their combination were effective for treatment of mice bearing Dox-sensitive and Dox-resistant transplantable murine MC-rhabdomyosarcoma. Conclusion: The obtained data demonstrated that Dox-sensitive and Dox-resistant tumors differ by the sensitivity to different types of immunotherapy.Цель: изучить влияние различных видов иммунотерапии, а именно адоптивной ЛАК-терапии, вакцинотерапии, а также их комбинации, дать оценку их эффективности в условиях перевивной МХ-рабдомиосаркомы мышей, резистентной и чувствительной к доксорубицину. Материалы и методы: исследования проведены на мышах линии BALB/c с чувствительной и резистентной к доксорубицину перевивной МХ-рабдомиосаркомой. ЛАК-терапию (лимфоцитами лимфатических узлов сингенных мышей) проводили начиная с 7 сут после перевивки опухолевых клеток на протяжении 5 дней; ЛАК вводили в область опухоли в количестве 3 млн в 0,2 мл среды. Вакцину, полученную на основе гликопептидов опухолевых клеток, вводили мышам интраперитонеально в объеме 0,2 мл по двум схемам: до перевивки и после перевивки опухоли. Влияние иммунотерапии оценивали по проценту торможения роста опухоли и выживаемости животных. Результаты: данные проведенной иммунотерапии свидетельствуют, что у мышей с чувствительной к доксорубицину опухолью наиболее эффективна вакцинотерапия, а при резистентной опухоли — адоптивная ЛАК-терапия, что подтверждалось наибольшей протяженностью жизни и наиболее выраженным торможением роста опухоли у животных этой группы. Кроме того, сравнительный анализ результатов применения ЛАК-терапии, вакцинотерапии и их сочетания показал, что все ее виды эффективны у мышей как с чувствительной, так и резистентной к доксорубицину МХ-рабдомиосаркомой. Выводы: полученные данные свидетельствуют о том, что резистентные и чувствительные к доксорубицину опухоли отличаются чувствительностью к различным видам иммунотерапии, что, по всей вероятности, объясняется различными механизмами их действия

Antitumor action of lymphokin-activated сеlls of patients with soft tissue sarcomas and melanomas in dependence on expression of MHC classes I and II antigenes

Aim: To study expression of major histocompatibility complex (MHC) classes І and ІІ antigens and CD25, CD71, Ki-67, CD54, CD56, CD11b, PCNA on lymphocytes and tumor cells and antitumor action of lymphocytes activated with IL-2. Materials and Methods: Tumor explants (soft tissue sarcoma, n = 20, melanoma, n = 25) were co-cultivated in diffusion chambers with autologous lymphocytes; antitumor action was evaluated by morphologic patterns of explant’s growth. Expression of CD25, CD71, Ki-67, CD54, CD56, CD11b, PCNA was evaluated by the method of indirect fluorescence using respective monoclonal antibodies. Results: The highest antitumor action of lymphocytes toward soft tissue sarcoma and melanoma cells is observed if tumor cells are expressing MHC class I antigens. In the cases of soft tissue sarcoma no correlation between the level of antitumor activity of lymphocytes and expression of CD25, CD71, Ki-67, CD54, CD56, CD11b, PCNA has been found, whilst in the case of melanoma it is associated with the high level of CD11b expression. Conclusion: There is a direct correlation between sensitivity of soft tissue sarcoma and melanoma cells to action of lymphokin-activated killer cells and the level of MHC class I antigens.Цель: изучить экспрессию антигенов І и ІІ класса главного комплекса гистосовместимости (ГКГ) на лимфоцитах и опухолевых клетках (саркомы мягких тканей и меланома кожи) и противоопухолевое действие лимфоцитов, активированных и неактивированных ИЛ-2 параллельно с экспрессией некоторых рецепторов, характеризующих протеом. Материалы и методы: культивирование эксплантатов опухоли и аутологичных лимфоцитов в диффузионных камерах с дальнейшим изучением противоопухолевого действия лимфоцитов на основании морфологических особенностей роста эксплантатов. Экспрессию антигенов CD25, CD71, Ki-67, CD54, CD56, CD11b, ядерного антигена пролиферирующих клеток (ИПО-38) определяли методом непрямой флуоресценции с помощью соответствующих моноклональных антител. Результаты: наиболее выраженное противоопухолевое действие лимфоцитов как больных саркомами мягких тканей, так и меланомой проявляется по отношению к тем опухолевым клеткам, которые экспрессируют антигены I класса ГКГ. Установлено, что значение экспрессии указанных структур для противоопухолевого действия зависит от биологических особенностей опухоли: зависимости между уровнем противоопухолевой активности и экспрессией изученных рецепторов клетками больных саркомой не выявлено. В то же время наиболее выраженное противоопухолевое действие лимфоцитов больных меланомой сочеталось с высоким уровнем экспрессии ими CD11b. Выводы: установлена прямая зависимость чувствительности опухолевых клеток к действию лимфокинактивированных клеток от уровня экспрессии антигенов ГКГ I класса на клетках как меланомы, так и сарком