Preclinical studies investigation of the toxicological profile of hyperforin

UMF “Carol Davila” Bucureşti, Facultatea de Farmacie, disciplina de Farmacologie şi Farmacie clinică, Catedra de Farmacologie şi Farmacie clinică, IP USMF „Nicolae Testemiţanu” Republica Moldova, UMF “Carol Davila” Bucureşti, Facultatea de Farmacie, disciplina de Laborator clinic şi Igiena alimentaţiei, UASMV Bucureşti, Facultatea de Medicină Veterinară, disciplina de Anatomie patologicăObiectivul studiului: Date din literatura de specialitate susţin utilizarea extractelor de sunătoare pentru efectul antidepresiv, dar evidenţiază şi alte acţiuni farmacologice ale acestui produs vegetal: antiinflamatoare, antimicrobiană, antitumorală. Eficacitatea extractelor de Hypericum perforatum pare să fie imprimată de principiul activ, hiperforina. În acest studiu ne-am propus ca obiectiv investigarea profilului toxicologic al hiperforinei. Plecând de la datele de toxicitate obţinute vom putea stabili ulterior dozele eficace necesare testărilor farmacologice. Material şi metode: A fost determinată toxicitatea acută (doză unică) şi toxicitatea subacută (doze repetate) a hiperforinei, administrată la şoareci albi, masculi, suşa NMRI. Pentru determinarea toxicităţii acute s-a utilizat metoda claselor de toxicitate (conform ghidului OECD 423), care constă în utilizarea unor doze predefinite ce permit încadrarea substanţelor în clasele de toxicitate ale Sistemului Global Armonizat (GHS, Global Harmonized System) pentru substanţe chimice care produc toxicitate acută. Determinarea toxicităţii subacute s-a realizat prin administrarea pe cale orală (p.o.), la şoareci albi, masculi (20 animale/ lot), a trei doze de hiperforină: 50 mg/kg corp, 75 mg/ kg corp, 100 mg/kg corp, timp de 28 de zile consecutiv (1 doză/zi). În paralel s-a lucrat şi cu un lot martor, tratat cu apă distilată: 0,1 ml/10 g corp, p.o. La sfârşitul experimentului, animalele au fost sacrificate şi s-au recoltat probe de sânge pe care s-au determinat: hemoleucograma, transaminazele serice, fosfataza alcalină, bilirubina totală şi creatinina. Pentru realizarea examenului histopatologic, au fost recoltate fragmente de organe (ficat, rinichi, encefal) fixate ulterior în soluţie 10% formaldehidă. Secţiunile histologice de 4-6 microni au fost colorate prin metoda de rutină (hematoxilină- eozină). Rezultate. În conformitate cu ghidul OECD 423 pentru determinarea toxicităţii acute, hiperforina s-a încadrat în categoria 5 de toxicitate: DL50 > 5000 mg/ kg corp, p.o. Studiile de toxicitate subacută au evidenţiat faptul că administrarea hiperforinei induce creşterea semnificativă statistic a transaminazelor serice şi a fosfatazei alcaline (p<0,0001) comparativ cu lotul martor. Datele experimentale au evidenţiat o relaţie directă doză – efect toxic hepatic pentru valoarea TGP. Aceasta a crescut semnificativ statistic faţă de lotul martor, astfel: + 78,29% (p<0,0001) pentru doza de 50 mg/kg corp hiperforină; +107.02% (p<0,0001) pentru doza de 75 mg/kg corp hiperforină; + 158.10% (p<0,0001) pentru doza de 50 mg/kg corp hiperforină. Concluzii. Hiperforina prezintă o toxicitate acută redusă, evidenţiată prin încadrarea ei în clasa GHS 5 de toxicitate. În administrare subacută are efect toxic hepatic, dar nu influenţează valorile bilirubinei totale şi ale creatininei serice. Datele obţinute vor permite stabilirea dozelor eficace pentru investigarea profilului farmacologic al hiperforinei. Studiile au fost finanţate prin proiectul 9/23.12.2013 din competiţia USMF „Nicolae Testemiţanu”

Фармакологические экспериментальные исследования побочных эффектов ассоциации алпразолам+бромазепам

Disciplina Farmacologie şi Farmacie clinică, Facultatea Farmacie, UMF Carol Davila, Bucureşti, RomâniaIn lucrarea de faţă ne-am propus cercetarea preclinică a potenţialului farmacotoxicologic al asocierii dintre două benzodiazepine: alprazolam şi bromazepam. Cercetările noastre s-au efectuat la şoareci prin teste farmacologice specifice de evaluare a efectului miorelaxant (testul rotarod) şi a efectului asupra memoriei şi achiziţiei spaţiale (labirintul acvatic Morris). Dozele administrate au fost. alprazolam 0,5 mg/kg corp şi bromazepam 0,75 mg/kg corp. In urma cercetărilor efectuate, putem afirma că cele două benzodiazepine studiate, alprazolam şi bromazepam, la dozele administrate, singure sau in asociere, nu influenţează in sens negativ abilitatea şoarecilor de a se menţine pe axul in rotaţie sau capacitatea de a invăţa şi de a memora poziţia platformei in testul labirintului acvatic Morris.In the present paper we have researched, through experimental pharmacology studies, the pharmacotoxicological potential of the association between two benzodiazepine drugs: alprazolam and bromazepam. Our research has performed using specific pharmacological tests to evaluate the effect of miorelaxant (rotarod test) and effect on memory and spatial acquisition (Morris aquatic labyrinth). The doses administered were alprazolam 0.5 mg/kg body weight and bromazepam 0.75 mg/ kg body weight. Based on our research, we can state that the studied benzodiazepines, alprazolam and bromazepam, at the doses administered alone or in combination, do not adversely affect the ability of mice to maintain on the rotating spindle or the ability to learn and to remember platform position in the Morris aquatic labyrinth test.В этой статье мы поставили себе цель провести доклинические исследования фармакотоксикологического потенциала ассоциации между двумя бензодиазепинами: альпразоламином и бромазепамом. Наши исследования проводились на мышах с помощью специфических фармакологических тестов для оценки влияния миорелаксанта (тест ротарода) и влияния на память и пространственное поглощение (водный лабиринт Морриса). Доза альпразолама была 0,5 мг/кг массы тела и бромазепа – 0,75 мг/кг массы тела. Основываясь на наших исследованиях, мы можем констатировать, что два исследуемых бензодиазепина, альпразолам и бромазепам в указанных дозах, вводимых отдельно или в комбинации, не оказывают отрицательного влияния на способность мышей поддерживать ось вращения или способность учиться и помнить позицию платформы в тесте водного лабиринта Морриса

New perspectives in the treatment of diabetes mellitus type II

Universitatea de Medicină şi Farmacie “Carol Davila”, Bucureşti, Facultatea de FarmacieIntroducere. Diabetul zaharat este o patologie complexă, cu morbiditate şi mortalitate ridicate. La nivel mondial, prevalenţa diabetului este într-o continuă creştere, la toate grupele de vârstă, principalele cauze fiind obezitatea, alimentaţia nesănătoasă şi inactivitatea fizică. Prin urmare, pentru scăderea apariţiei de noi cazuri de diabet se impune o educaţie permanentă a populaţiei, cu modificarea radicală a stilului actual de viaţă. De asemenea, o importanţă crescândă o au şi terapiile antidiabetice, care trebuie să asigure pacienţilor un control glicemic cât mai eficient. Sistemul adrenergic este important pentru menţinerea homeostaziei organismului şi mediază răspunsul neuronal şi hormonal în condiţii de stres. Activarea receptorilor adrenergici beta-3 determină efecte metabolice esenţiale, mai ales asupra metabolismelor glucidic şi lipidic. Scopul lucrării. Cercetarea acţiunilor asupra metabolismelor glucidic şi lipidic a unei serii de compuşi nou-sintetizaţi cu structură beta- feniletilaminică, potenţial agonişti asupra receptorilor adrenergici beta-3. Material şi metode. S-au folosit două modele experimentale pentru inducerea tulburărilor metabolice: un model de diabet indus prin administrare de aloxan (130 mg/kg i.p., doză unică) şi un model de dislipidemie cu triton (400 mg/kg p.o., doză unică). Compuşii nou sintetizaţi au fost administraţi per os, în doze calculate în funcţie de doza letală 50 (DL50) anterior determinată. După mai multe administrări zilnice, şobolanii au fost sacrificaţi, iar pe sângele recoltat s-au făcut mai multe determinări: glicemie, colesterol total, LDL-colesterol, HDL-colesterol, trigliceride, activitatea enzimelor glucozo-6-fosfat dehidrogenaza, glucozo-6-fosfataza şi hexokinaza. Rezultate. în modelul de diabet aloxanic, compusul C2 s-a dovedit a fi cea mai activă substanţă antidiabetică, producând o scădere a glicemiei cu 42,13% (p<0,0001), a colesterolului total cu 47,09% (p<0,005) şi a trigliceridelor cu 56,30% (p<0,001) faţă de martorul diabetic. Toţi compuşii testaţi au redus greutatea corporală a animalelor, chiar dacă nu au influenţat consumul alimentar. În modelul de dislipidemie cu triton, toţi compuşii administraţi au redus valorile colesterolului total şi a LDL-colesterolului faţă de martorul hiperlipemic. În plus, compusul C3 a avut o influenţă pozitivă asupra HDL-colesterolului, determinând o creştere cu 131,61% (p<0,0001) faţă de martorul hiperlipemic. Concluzii. Noii derivaţi de beta-feniletilamină au avut efecte benefice asupra tulburărilor metabolice induse prin administrare de aloxan sau de triton la şobolani. Datele experimentale sugerează că aceşti compuşi au potenţial terapeutic ridicat pentru tratamentul dislipidemiilor şi/sau obezităţii. Compuşii merită cercetări farmacologice şi biochimice suplimentare pentru clarificarea mecanismelor moleculare de acţiune.Introduction. Diabetes mellitus is a complex pathology with high morbidity and mortality. Worldwide, the prevalence of diabetes is constantly increasing in all age groups, the main causes being obesity, unhealthy diets and physical inactivity. Therefore, to minimize the occurrence of new cases of diabetes it is required a lifelong people education, with radical change of current life style. Also of increasing importance are the antidiabetic therapies, which should provide patients a more effective glycemic control. Adrenergic system is important for maintaining homeostasis of the body and mediate neuronal and hormonal response to stress conditions. Beta-3 adrenergic receptor activation causes essential metabolic effects, especially on glucose and lipid metabolism. The aim of the study. Preclinical research on carbohydrate and lipid metabolism of a series of newly synthesized compounds with beta-phenylethylamine structure, potential agonists on beta-3 adrenergic receptors. Material and methods. Two models were used for the experimental induction of metabolic disorders: a model of induced diabetes by the administration of alloxan(130 mg/kg i.p., single dose) and a model of dyslipidemia with triton (400 mg/kg p.o., single dose). Newly synthesized compounds were orally administered at a dose calculated on the 50 lethal dose (LD50) previously determined. After several daily administrations, the rats were sacrificed and on the collected blood there were determined: glucose, total cholesterol, LDL-cholesterol, HDL-cholesterol, triglycerides, enzymatic activity of glucose-6- phosphate dehydrogenase, glucose-6-phosphatase and hexokinase. Results. In the model of alloxan diabetes, the compound C2 has proven to be the most active antidiabetic substance, yielding a 42.13% decrease of the blood glucose (p<0.0001), total cholesterol by 47.09% (p<0.005) andtriglycerides by 56.30%(p <0.001) compared to diabetic control. All tested compounds reduced the body weight of the animals, even if did not affect food consumption. In the model of triton induced dyslipidemia, all administered compounds decreased total cholesterol and LDL-cholesterol relative to hyperlipidemic control rats. In addition, compound C3 had a positive influence on HDL-cholesterol, causing an increase of 131.61% (p <0.0001) compared to hyperlipidemic control rats. Conclusions. New beta-phenylethylamine derivatives have beneficial effects on metabolic disorders induced by the administration of alloxan or tritonin rats. Experimental data suggest that these compounds have a high therapeutic potential for the treatment of dyslipidemia and/or obesity. The compounds deserves further pharmacological and biochemical research to clarify the molecular mechanisms of action