Adaptação de um método de extração de DNA a partir de células da mucosa bucal baseado em parâmetros de qualidade / Adaptation of a DNA extraction method from buccal mucosa cells based on quality parameters

Umas das técnicas mais utilizadas para a análise de doenças genéticas é a extração de DNA para fins diagnósticos e de pesquisas. E a coleta das células da mucosa bucal por meio de swab se mostra um método ideal, pois possui uma abordagem segura, indolor, e eficiente para obtenção de DNA. Assim, o objetivo deste trabalho foi adaptar um método de extração de DNA a partir de células da mucosa bucal baseado em parâmetros de qualidade. Para isso, foi realizada a coleta da mucosa bucal de dez voluntários com swab para extração de DNA por meio do protocolo adaptado. Os parâmetros avaliados foram à quantidade, integridade e pureza do DNA obtido. Ainda para avaliar a aplicabilidade da técnica na amplificação de genes foi realizada a reação em cadeida da polimerase - PCR do gene da ?-globina. O método de extração de DNA de células de mucosa bucal adaptado apresentou DNA em quantidade suficiente, integridade e pureza necessária para amplificação em PCR. Os resultados dão um parecer favorável ao uso da técnica em vários aspectos

Padronização de montagem de cariótipo humano por meio de cultivo de linfócitos e bandeamento G: Standardization of human karyotyping through lymphocyte culture and G-banding

A citogenética humana conta com um conjunto de técnicas que permitem identificar os cromossomos e detectar anomalias como alterações numéricas, translocações, deleções, entre outras. A detecção dessas alterações pode levar ao diagnóstico de diversas doenças genéticas, descobrindo a causa de malformações congênitas, retardo mental, infertilidade, entre outros. Apesar de ser um exame essencial para o diagnóstico de diversas doenças, não há, na região de Maringá, qualquer estabelecimento que realize o procedimento via SUS. Dessa forma, este trabalho padronizou a técnica para obtenção de cariótipo para oferecimento gratuito através de um projeto de extensão. A técnica contou com um cultivo em meio RPMI 1640 enriquecido com soro bovino fetal e fitohemaglutinina. A obtenção de cromossomos metafásicos foi facilitada pela aplicação de colchicina, e os cromossomos foram corados por bandeamento G. O protocolo padronizado apresentou bons resultados, com alto número de células, várias delas em metáfase, e cromossomos bem corados, facilitando a análise microscópica