Complex interactions of cellular players in chronic Graft-versus-Host Disease

Chronic Graft-versus-Host Disease is a life-threatening inflammatory condition that affects many patients after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Although we have made substantial progress in understanding disease pathogenesis and the role of specific immune cell subsets, treatment options are still limited. To date, we lack a global understanding of the interplay between the different cellular players involved, in the affected tissues and at different stages of disease development and progression. In this review we summarize our current knowledge on pathogenic and protective mechanisms elicited by the major involved immune subsets, being T cells, B cells, NK cells and antigen presenting cells, as well as the microbiome, with a special focus on intercellular communication of these cell types via extracellular vesicles as up-and-coming fields in chronic Graft-versus-Host Disease research. Lastly, we discuss the importance of understanding systemic and local aberrant cell communication during disease for defining better biomarkers and therapeutic targets, eventually enabling the design of personalized treatment schemes

Immune cell profiles associated with exposure to phthalates (DEHP and DiNP) - A high-dimensional cell cytometry (CyTOF) approach

Bakgrunn: Forekomsten av immunrelaterte sykdommer har i løpet av de siste tiårene økt for personer som lever i den vestlige verden. Denne økningen, kan delvis skyldes økt eksponering fra kjemikalier fra hverdags produkter og diet som resultere i en kjemisk cocktail senario. Ftalater er en gruppe av slike hverdags kjemikalier. Mange er karakterisert som endokrine forstyrrende stoffer (EDC) og ftalat eksponering er assosiert med økning i immune relaterte sykdommer som astma og allergi. For øyeblikket er det lite som er kjent om handlings mekanismen (mode of action) for ftalat eksponering på immunceller. Dette er i en stor grad et resultat av kompleksiteten til immunsystemet og tidligere mangel på metoder for å undersøke handlingsmekanismene i høy-dimensjons detalj. Mål: Målet med denne masteroppgaven var å undersøke om høy-dimensjons celle analyse ved bruk av CyTOF kan oppdage assosiasjoner mellom ftalat eksponering og immuncelle profiler hos voksene. Mer spesifikt, var målet å identifisere subpopulasjoner eller funksjonelle karaktertrekk assosiert med DEHP (Di(2-ethylhexyl) phthalate ) og DiNP (Diisononyl phthalate) eksponering. Metode: Perifere blod mononukleære celler fra 28 friske deltakere ble analysert ved bruk av høy-dimensjons CyTOF analyse. Fjorten deltakere, syv damer og syv menn, ble inkludert i de høye og lave DEHP og DiNP eksponeringsgruppene. For hver deltaker ble to prøver kjørt. En prøve var ustimulert og var inkludert for å identifisere hoved populasjoner og subpopulasjoner i detalj, og uttrykk av funksjonelle markører på disse. Den andre prøven ble stimulert med phorbol 12-myristate 13-acetate og ionomycin og var inkludert for å se på hoved populasjoner, noen subpopulasjoner og cytokinuttrykket hos disse. Både manuell «gating», statistiske analyser og data-dreven clustring (unsupervised) ble utført for å identifisere gruppeforskjeller i immun celler hos de høyt og lavt eksponerte. Resultat og diskusjon: I gruppen med høy sammenlignet med lav eksponering for ftalater, observerte vi en økning i mengden av gitte immunceller funnet i det medfødte immun systemet, det vil si Mo og NK-celle subpopulasjoner. Den høyt eksponerte gruppen viste også et konsistent reduserende mønster. Vi fant redusert produksjon av IL-6 og TNFa i samme subpopulasjoner av B-celler i den høyt sammenlignet med den lavt eksponerte gruppen. I tillegg fant vi redusert uttrykk av HLA-DR i gdT-celler og CD69 i underpopulasjoner av Th-celler hos den høyt sammenlignet med den lavt eksponerte gruppen. Konklusjon: Den observerte økningen av celler i det medfødte immunsystemet kan antyde en tendens til høyere inflammasjon i personer med høy ftalat eksponering. Det reduserte uttrykket av IL-6 og TNFa fra samme B-celle subpopulasjoner og redusert uttrykk av aktiveringsmarkører på noen T-celle subpopulasjoner antyder en mulig funksjonell reduserende effekt på celler i det adaptive immun systemet som et resultat av høy ftalat eksponering. Innad i det medfødte og det adaptive immun systemet ser det ut til å være like tendenser i celle mengde og karaktertrekk, dette sammen med tidligere studier antyder en mulig effekt av ftalater på immun celler. Videre studier (eks. genuttrykk og in vitro studier) trengs for å bekrefte disse observasjonene

Structural elucidation of novel pro-inflammatory polysaccharides from Daphne mezereum L.

Daphne mezereum L., an important medicinal plant in Scandinavian folk medicine, was used to treat ailments such as diarrhea, swelling and stomach pain. A range of natural compounds have been isolated, but little attention has been given to the polysaccharides in this plant. Previous work in our group have shown that a polysaccharide enriched fraction from the bark of D. mezereum exhibited pro-inflammatory effects. To pursue this further, the aim of the present work was to isolate and characterize these polysaccharides. From the ethanol-precipitate of a water extract, one neutral (DMP-NF) and one acidic (DMP-AF) fraction was isolated by anion-exchange chromatography. GC, GC–MS and 1D- and 2D-NMR were used to characterize the polysaccharide structures. DMP-NF appeared to be a mixture of arabinan, arabinogalactan and hemicelluloses such as xyloglucan, mannan and xylan. DMP-AF contained a pectic polysaccharide mainly consisting of an unusually long homogalacturonan backbone. Enzymatic treatment by pectinase of DMP-AF yielded DMP-ED, which contained a rhamnogalacturonan-I backbone with arabinan, galactan and arabinogalactan side chains. Both DMP-NF and DMP-ED induced IFN-γ and TNF-α secretion in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), DMP-ED being the most potent fraction. DMP-AF was less active, which might be due to a less sterically available rhamnogalacturonan-I domain.</p

Phytochemical characterization and anti-inflammatory activity of a water extract of Gentiana purpurea roots

Ethnopharmacological relevance Gentiana purpurea was one of the most important medicinal plants in Norway during the 18th and 19th centuries, and the roots were used against different types of gastrointestinal and airway diseases. Aim of the study To explore the content of bioactive compounds in a water extract from the roots, a preparation commonly used in traditional medicine in Norway, to assess the anti-inflammatory potential, and furthermore to quantify the major bitter compounds in both roots and leaves. Materials and methods G. purpurea roots were boiled in water, the water extract applied on a Diaion HP20 column and further fractionated with Sephadex LH20, reverse phase C18 and normal phase silica gel to obtain the low molecular compounds. 1D NMR, 2D NMR, and ESI-MS were used for structure elucidation. HPLC-DAD analysis was used for quantification. The inhibition of TNF-α secretion in ConA stimulated peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) was investigated. Results Eleven compounds were isolated and identified from the hot water extract of G. purpurea roots. Gentiopicrin, amarogentin, erythrocentaurin and gentiogenal showed dose-dependent inhibition of TNF-α secretion. Gentiopicrin is the major secondary metabolite in the roots, while sweroside dominates in the leaves. Conclusions The present work gives a comprehensive overview of the major low-molecular weight compounds in the water extracts of G. purpurea, including metabolites produced during the decoction process, and show new anti-inflammatory activities for the native bitter compounds as well as the metabolites produced during preparation of the crude drug