4 research outputs found
The immunochemical cross-reactivity between cytoplasmic and mitochondrial mammalian lysyl-tRNA synthetases
Animal and fungal cells (in contrast to prokaryotes) contain two distinct sets of related aminoacyl-tRNA synthetases (aaRSs) encoded by nuclear genes and functioning in cytosol and mitochondria. The structural differences between mitochondrial and cytoplasmic enzymes may reflect the functional adaptation to fulfil mitochondrial processes in addition to protein synthesis. Mitochondrial import of nuclearencoded tRNAs has been described in yeast, plants and protozoans but it has not been observed in mammalian cells. Ifs established that mitochondrial lysyl-tRNA synthetase (MSK) plays a prominent role in the transport of tRNA into yeast mitochondria for complementation o f mitochondrial tRNAs genes mutations. We tried to identify MSK homologues in mammalian cells with the help of monospecific antibodies against pre-MSK by ELISA and Western-blot analysis. We have identified cross-reactive proteins in mitochondrial and cytoplasmic fractions of mammalian cell lysates. These data, together with the results of cross-aminoacylation on mitochondrial and cytoplasmic tRNAs, suggest the presence of common antigenic determinants in the mitochondrial and cytoplasmic lysyl-tRNA synthetases from higher animals.ΠΠ»ΡΡΠΈΠ½ΠΈ Π΅ΡΠΊΠ°ΡΡΠΎΡ Π½Π° Π²ΡΠ΄ΠΌΡΠ½Ρ Π²ΡΠ΄ ΠΏΡΠΎΠΊΠ°ΡΡΠΎΡ ΠΌΡΡΡΡΡΡ Π΄Π²Ρ ΡΡΠ·Π½Ρ Π³ΡΡΠΏΠΈ Π°ΠΌΡΠ½ΠΎΠ°ΡΠΈΠ»-ΡΠ ΠΠ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΠ°Π·, ΡΠΊΡ ΠΊΠΎΠ΄ΡΡΡΡΡΡ ΡΠ΄Π΅ΡΠ½ΠΈΠΌ Π³Π΅Π½ΠΎΠΌΠΎΠΌ ΡΠ° ΡΡΠ½ΠΊΡΡΠΎΠ½ΡΡΡΡ Π² ΡΠΈΡΠΎΠ·ΠΎΠ»Ρ Ρ ΠΌΡΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΡΡΡ
. Π‘ΡΡΡΠΊΒΡΡΡΠ½Ρ Π²ΡΠ΄ΠΌΡΠ½Π½ΠΎΡΡΡ ΠΌΡΠΆ ΡΠ΅ΡΠΌΠ΅Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΌΡΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΡΠΉ Ρ ΡΠΈΡΠΎΠΏΠ»Π°Π·ΒΠΌΠΈ ΠΌΠΎΠΆΡΡΡ Π±ΡΡΠΈ Π²ΡΠ΄ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½Π½ΡΠΌ ΡΡΠ½ΠΊΡΡΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΠΎΡ Π°Π΄Π°ΠΏΡΠ°ΡΡΡ Π΄ΠΎ ΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ², ΡΠΊΡ Π²ΡΠ΄Π±ΡΠ²Π°ΡΡΡΡΡ Π² ΠΌΡΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΡΡΡ
, ΠΊΡΡΠΌ ΡΡΠ°ΡΡΡ Π² Π±ΡΠΎΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·Ρ Π±ΡΠ»ΠΊΠ°. ΠΠΌΠΏΠΎΡΡ ΡΠΈΡΠΎΠ·ΠΎΠ»ΡΠ½ΠΈΡ
ΡΠ ΠΠ Ρ ΠΌΡΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΡΡ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΎ Π΄Π»Ρ Π΄ΡΡΠΆΠ΄ΠΆΡΠ², ΡΠΎΡΠ»ΠΈΠ½ Ρ Π½Π°ΠΉΠΏΡΠΎΡΡΡΠΈΡΠΈΡ
, ΠΎΠ΄Π½Π°ΠΊ Π²ΡΠ½ Π½Π΅ ΡΠΏΠΎΡΡΠ΅ΡΡΠ³Π°Π²ΡΡ Π² ΠΊΠ»ΡΡΠΈΠ½Π°Ρ
ΡΡΠ°Π²ΡΡΠ². ΠΠΈΡΠ²Π»Π΅Π½ΠΎ, ΡΠΎ ΠΌΡΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΡΠ°Π»ΡΠ½Π° Π»ΡΠ·ΠΈΠ»-ΡΠ ΠΠ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΠ°Π·Π° (MSK) Π²ΡΠ΄ΡΠ³ΡΠ°Ρ ΠΏΡΠΎΠ²ΡΠ΄Π½Ρ ΡΠΎΠ»Ρ Ρ ΡΡΠ°Π½ΡΠΏΠΎΡΡΡ ΡΠ ΠΠ Ρ ΠΌΡΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΡΡ Π΄ΡΡΠΆΠ΄ΠΆΡΠ² Π΄Π»Ρ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½ΒΡΠ°ΡΡΡ ΠΌΡΡΠ°ΡΡΠΉ ΠΌΡΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΈΡ
Π³Π΅Π½ΡΠ² ΡΠ ΠΠ ΠΠ° Π΄ΠΎΠΏΠΎΠΌΠΎΠ³ΠΎΡ ΠΌΠΎΠ½ΠΎΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΡΡΠ½ΠΈΡ
Π°Π½ΡΠΈΡΡΠ» ΠΏΡΠΎΡΠΈ npe-MSK ΠΌΠΈ Π·ΡΠΎΠ±ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠΏΡΠΎΠ±Ρ ΡΠ΄Π΅Π½ΡΠΈΡΡΠΊΡΠ²Π°ΡΠΈ Π³ΠΎΠΌΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈ MSK Ρ ΠΊΠ»ΡΡΠΈΠ½Π°Ρ
ΡΡΠ°Π²ΡΡΠ² ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Π°ΠΌΠΈ ELISA Ρ ΠΠ΅ΡΡΠ΅ΡΠ½-Π±Π»ΠΎΡΠΈΠ½Π³Π°. Π ΡΠΈΡΠΎΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ½ΠΈΡ
Ρ ΠΌΡΡΠΎΒΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΈΡ
ΡΡΠ°ΠΊΡΡΡΡ
Π»ΡΠ·Π°ΡΡΠ² ΠΊΠ»ΡΡΠΈΠ½ ΡΡΠ°Π²ΡΡΠ² Π½Π°ΠΌ Π²Π΄Π°Π»ΠΎΡΡ Π²ΠΈΡΠ²ΠΈΡΠΈ Π±ΡΠ»ΠΊΠΈ, ΡΠΊΡ ΠΌΠ°ΡΡΡ ΡΠΌΡΠ½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΡΡΠ½ΠΈΠΉ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Ρ
ΡΠ΅ΡΡ Π· MSK Π Π°Π·ΠΎΠΌ Π· ΡΠ΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°ΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Ρ
ΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π°ΠΌΡΠ½ΠΎΠ°ΡΠΈΠ»ΡΠ²Π°Π½Π½Ρ ΡΡ Π΄Π°Π½Ρ Π΄Π°ΡΡΡ ΠΏΡΠ΄ΡΡΠ°Π²Ρ Π΄Π»Ρ ΠΏΡΠΈΠΏΡΡΠ΅Π½Π½Ρ ΡΠΎΠ΄ΠΎ Π½Π°ΡΠ²Π½ΠΎΡΡΡ ΡΠΏΡΠ»ΡΠ½ΠΈΡ
Π°Π½ΡΠΈΠ³Π΅Π½Π½ΠΈΡ
Π΄Π΅ΡΠ΅ΡΠΌΡΠ½Π°Π½Ρ Ρ ΠΌΡΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΈΡ
Ρ ΡΠΈΡΠΎΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠ°ΒΡΠΈΡΠ½ΠΈΡ
Π»ΡΠ·ΠΈΠ»-ΡΠ ΠΠ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΠ°Π· ΡΡΠ°Π²ΡΡΠ².ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΡΠΊΠ°ΡΠΈΠΎΡ (Π² ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠΈΠ΅ ΠΎΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ ΠΏΡΠΎΠΊΠ°ΡΠΈΠΎΡ) ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Ρ Π΄Π²Π΅ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΠ΅ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ°ΡΠΈΠ»-ΡΠ ΠΠ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΠ°Π·, ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡΡΠ΅ΒΠΌΡΡ
ΡΠ΄Π΅ΡΠ½ΡΠΌ Π³Π΅Π½ΠΎΠΌΠΎΠΌ ΠΈ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΡΡΡΡΠΈΡ
Π² Ρ ΠΈ ΡΠΎ Π·ΠΎΠ»Π΅ ΠΈ ΠΌΠΈΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΠΈΡΡ
. Π‘ΡΡΡΠΊΡΡΡΠ½ΡΠ΅ ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠΈΡ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ ΡΠ΅ΡΠΌΠ΅Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΌΠΈΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΠΈΠΉ ΠΈ ΡΠΈΡΠΎΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΡ ΠΌΠΎΠ³ΡΡ Π±ΡΡΡ ΠΎΡΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΒΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ Π°Π΄Π°ΠΏΡΠ°ΡΠΈΠΈ ΠΊ ΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ°ΠΌ, ΠΏΡΠΎΠΈΡΡ
ΠΎΠ΄ΡΡΠΈΠΌ Π² ΠΌΠΈΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΒΡΠΈΡΡ
ΠΏΠΎΠΌΠΈΠΌΠΎ ΡΡΠ°ΡΡΠΈΡ Π² Π±ΠΈΠΎΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·Π΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° ΠΠΌΠΏΠΎΡΡ ΡΠΈΡΠΎΠ·ΠΎΠ»ΡΠ½ΡΡ
ΡΠ ΠΠ Π² ΠΌΠΈΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΠΈΠΈ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½ Ρ Π΄ΡΠΎΠΆΠΆΠ΅ΠΉ, ΡΠ°ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ ΠΈ ΠΏΡΠΎΡΡΠ΅ΠΉΡΠΈΡ
, ΠΎΠ΄Π½Π°ΠΊΠΎ Π½Π΅ Π½Π°Π±Π»ΡΠ΄Π°Π»ΡΡ Π² ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°Ρ
ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡΠ°ΡΒΡΠΈΡ
. Π£ΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΎ, ΡΡΠΎ ΠΌΠΈΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΠΈΠ°Π»ΡΠ½Π°Ρ Π»ΠΈΠ·ΠΈΠ»-ΡΠ ΠΠ ΡΠΈΠ½ΒΡΠ΅ΡΠ°Π·Π° (MSK) ΠΈΠ³ΡΠ°Π΅Ρ Π²Π΅Π΄ΡΡΡΡ ΡΠΎΠ»Ρ Π² ΡΡΠ°Π½ΡΠΏΠΎΡΡΠ΅ ΡΠ ΠΠ Π² ΠΌΠΈΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΠΈΠΈ Π΄ΡΠΎΠΆΠΆΠ΅ΠΉ Π΄Π»Ρ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½ΡΠ°ΡΠΈΠΈ ΠΌΡΡΠ°ΡΠΈΠΉ ΠΌΠΈΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΡΡ
Π³Π΅Π½ΠΎΠ² ΡΠ ΠΠ. Π‘ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΠΌΠΎΠ½ΠΎΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ
Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π» ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ² npe-MSK ΠΌΡ ΠΏΠΎΠΏΡΡΠ°Π»ΠΈΡΡ ΠΈΠ΄Π΅Π½ΡΠΈΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ Π³ΠΎΠΌΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈ MSK Π² ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°Ρ
ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡΠ°ΡΡΠΈΡ
ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Π°ΠΌΠΈ ELISA ΠΈ ΠΠ΅ΡΡΠ΅ΡΠ½-Π±Π»ΠΎΡΠΈΠ½Π³Π°. Π ΡΠΈΡΠΎΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ
ΠΈ ΠΌΠΈΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΡΡ
ΡΡΠ°ΠΊΡΠΈΡΡ
Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΎΠ² ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡΠ°ΡΡΠΈΡ
Π½Π°ΠΌ ΡΠ΄Π°Π»ΠΎΡΡ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠΈΡΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ, ΠΈΠΌΠ΅ΡΡΠΈΠ΅ ΠΈΠΌΠΌΡΠ½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡ Ρ MSK Π ΡΠΎΠ²ΠΎΠΊΡΠΏΠ½ΠΎΡΡΠΈ Ρ ΡΠ΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°ΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ°ΡΠΈΠ»ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΡΡΠΈ Π΄Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π΄Π°ΡΡ ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠΈΡΡ Π½Π°Π»ΠΈΒΡΠΈΠ΅ ΠΎΠ±ΡΠΈΡ
Π°Π½ΡΠΈΠ³Π΅Π½Π½ΡΡ
Π΄Π΅ΡΠ΅ΡΠΌΠΈΠ½Π°Π½Ρ Ρ ΠΌΠΈΡΠΎΡ
ΠΎΠ½Π΄ΡΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΡΡ
ΠΈ ΡΠΈΡΠΎΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ
Π»ΠΈΠ·ΠΈΠ»-ΡΠ ΠΠ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΠ°Π· Π²ΡΡΡΠΈΡ
ΠΆΠΈΠ²ΠΎΒΡΠ½ΡΡ