Possible mechanism of polycation liposome (PCL)-mediated gene transfer

AbstractA novel gene transfer system utilizing polycation liposomes (PCLs), obtained by modifying liposomes with cetyl polyethylenimine (PEI), was previously developed (Gene Ther. 7 (2002) 1148). PCLs show notable transfection efficiency with low cytotoxicity. However, the mechanism of PCL-mediated gene transfer is still unclear. In this study, we examined the intracellular trafficking of PCL–DNA complexes by using HT1080 cells, fluorescent probe-labeled materials, and confocal laser scan microscopy. We found that the PCL–DNA complexes were taken up into cells by the endosomal pathway, since both cellular uptake of the complex and gene expression were blocked by wortmannin, an inhibitor of this pathway. We also observed that the plasmid DNA and cetyl PEI complex became detached from the PCL lipids and was preferentially transferred into the nucleus in the form of the complex, whereas the PCL lipids remained in the cytoplasmic area, possibly in the endosomes. In fact, nigericin, which dissipates the pH gradient across the endosomal membrane, inhibited the detachment of lipids from the PCL–DNA complex and subsequent gene expression. Taken together, our data indicate the following mechanism for gene transfer by PCLs: PCLs effectively transfer DNA to endosomes and release cetyl PEI–DNA complexes into the cytosol. Furthermore, cetyl PEI also contributes to gene entry into the nucleus

Proteomic alteration in gastic adenocarcinomas from Japanese patients

BACKGROUND: Gastric adenocarcinomas comprise one of the common types of cancers in Asian countries including Japan. Comprehensive protein profiling of paired surgical specimens of primary gastric adenocarcinomas and nontumor mucosae derived from Japanese patients was carried out by means of two-dimensional gel electrophoresis (2D-EP) and liquid chromatography-electrospray ionic tandem mass spectrometry (LC-ESI-MS) to establish gastric cancer-specific proteins as putative clinical biomarkers and molecular targets for chemotherapy. RESULTS: Relatively common alterations in protein expression were revealed in the tumor tissues. Increases in manganese dismutase and nonhistone chromosomal protein HMG-1 (HMG-1) were observed, while decreases in carbonic anhydrases I and II, glutatione-S-transferase and foveolin precursor (gastrokine-1) (FOV), an 18-kDa stomach-specific protein with putative tumor suppressor activity, were detected. RT-PCR analysis also revealed significant down-regulation of FOV mRNA expression in tumor tissues. CONCLUSION: A possible pathological role for down-regulation of FOV in gastric carcinogenesis was demonstrated. Evaluation of the specific decreases in gene and protein expression of FOV in patients may be utilized as clinical biomarkers for effective diagnosis and assessment of gastric cancer

K. 14 族ヘテロ原子化合物の構造と活性との相関に関する基礎的研究テーマ区分 3) その他

新しいタイプの5配位有機ゲルマニウム化合物の合成と構造Synthesis and structure of novel pentavalent organogermanium compounds(神奈川大理、杏林大保健、食品総合研、Hungarian Academy of Sciences)○竹内敬人、田中克己、田中恵子、亀山真由美、Alajos Kalman、Laszlo Parkanyi近年、高配位ケイ素化合物の研究がCorriuを始めとする多くの研究者によって報告されているが、それと比較すると、高配位ゲルマニウム化合物の報告例は少ない。また、報告された14族高配位化合物の多くは、シラトラン(ゲルマトラン)やトリアリールシラン(ゲルマン)誘導体のように、高配位が立体的に強制されている系である。我々はゲルマニウム原子を鍵とする新しいタイプのホストの構築を計画しているが、そこでは、ゲスト捕捉の際にゲルマニウムの高配位能が重要な役割を果たすと期待される。そこで、我々はゲルマニウム原子の高配位能についての基礎的なデータを系統的に集める目的で、一連の、立体的強制のないゲルマニウム化合物を合成し、どの様な構造的条件が高配位が可能になるかを検討することにした。この目的に最適と考えられたのはt-BuGe (SCH_2COOH)_3 (1)である。1はt-BuGeCl_3とHSCH2COOHとの反応で容易に合成可能であると予想された。しかし、得られた結晶は予期に反して分子式がC_8H_O_4S_2Ge[(FBMS)(M+H)^+=310.9630; calcd for C_8H_^GeO_4S_2=310.9633]であり、1から1分子のSCH_2COOHが脱離したものと推定し、その構造をX線結晶解析で確認した。ORTEP図には以下の特徴が認められる。(1)ゲルマニウム原子は5配位であり、三角両錐構造をもっている。(2) Ge1-S1,G1-S2とGe1-C1結合はequatorialであるのに対し、Ge1-O1とGe1-O3結合はapicalでほぼ等しい長さ(ca. 2.04A; 標準的なGe-O共有結合(ca. 1.7-1.8A)より少し長い程度)を持つ。(3) Ge1、S1、S2、C1の4原子は同一平面にあり、Ge1を中心とする正三角形をつくる。(4) O1-Ge1-O3高配位結合はS1-S2-C1面に対してほとんど垂直である。ただし、それがつくる角度(166.7°)は理想的な三角両錐構造からの僅かなずれを示す。これらの事実から、我々が立体的な強制のない5配位化合物を得たことは確実である。実際、側鎖のS-CH_2結合は自由に回転でき、そうなれば-COOH基はゲルマニウムから遠く離れることが可能であり、1での高配位は、いわば自発的であるといえる。ただ、O1-C6結合長とO2-C6結合長がほとんど等しいため、Ge原子と配位したのがSCH_2COOH基のカルボニル酸素か、ヒドロキシル酸素かを確定する仕事が残った。解析のrefinementの結果、カルボキシル基水素原子は、隣接分子のと水素結合してつらなっており、カルボニル酸素原子がGe原子に配位していることが確定した。[figure] 5配位ケイ素化合物では、この種の三角両錐構造は、求核試薬とのS_N2型反応のモデルと認められている。5配位ゲルマニウム化合物についても同じことがいえるかどうかは興味深い問題である。1のメチレンプロトンのH-1 NMR、メチレン炭素、カルボニル炭素のC-13 NMRのいずれにおいても、観測されるシグナルはただ1本であり、溶液(CDCl_3)中では下に示すような早い平衡が起こっていることを示す。これはゲルマニウム原子上の分子内求核反応であり、固体構造はこの反応の中間の状態を観察していると考えられる。置換基の電子的、立体的性質が著しく異なる2の構造や性質がとどの程度異なるかが興味深い。2はPhGeCl_3とHSCH_2COOHとの反応で同様に合成された。そのX線結晶解析結果は、1と同様で、近似的な三角両錐構造であり、構造の面では両者に大きな差がなかった。また、溶液(DMSO-d_6)中でメチレンプロトン、メチレン炭素、カルボニル炭素がただ1種しか観測されない点も同じである。酸素をドナーとする他のゲルマニウム高配位化合物の合成も進行中である

Ge-73 NMR分光法による有機ゲルマニウム化合物の構造の研究

竹内研究室では,高配位有機ゲルマニウム化合物の合成と構造に関する研究を行っている。ゲルマニウム原子が高配位状態(すなわち4価以上の原子価を持つ状態)になると,化学シフトおよび線幅が,4価ゲルマニウムとは著しく異なる値を示す。しかし,Ge-73核はNMRの観測がもっとも困難な核であり,高配位化合物の全てでスペクトルの観測が可能なわけではない。我々はスペクトルの観測が可能な構造を保持しながら高配位状態を取りうるような化合物を設計し,合成し,測定を行なった。その結果の一部はSynthesis, Solid-state and Solution Structures of Tris[(2-methoxymethyl)phenyl] germanes with a Substituent on Germanium Y. Sugiyama, T. Matsumoto, H. Yamamoto, M. Nishikawa, M. Kinoshita, T. Takei, W. Mori and Y. Takeuchi, Tetrahedron, 59, 8689-8696 (2003).に発表した。その部分を以下に示す

Study of the structure of organogermanium compounds with the aid of Ge～73 NMR Spectroscopy

High-resolution solid-state MAS ^Ge NMR spectra of hexavalent germanium compounds, i.e., diiodogermylene (la) and bis(1-pyrrolyl)(meso-tetraphenylporphyrinato) germanium (3a) were determined. To the best of our knowledge, this is the first example of high-resolution solid-state ^Ge NMR spectra of hexacoordinated germanium nuclei

Ultrasound-guided thrombin injection for the treatment of an iatrogenic hepatic artery pseudoaneurysm: a case report

<p>Abstract</p> <p>Introduction</p> <p>Percutaneous transhepatic portal embolization is often performed to expand the indications for hepatic resection. Various etiologies of hepatic artery pseudoaneurysm have been reported, but regardless of the etiology, hepatic artery pseudoaneurysm is usually managed with an endovascular approach or open surgery, depending on the location and clinical symptomatology. However, it is difficult to manage hepatic artery pseudoaneurysm after percutaneous transhepatic portal embolization, since embolization of the hepatic artery may cause hepatic infarction</p> <p>Case presentation</p> <p>A 58-year-old Japanese man with hilar bile duct cancer underwent percutaneous transhepatic portal embolization to expand the indication for hepatic resection. Two days after percutaneous transhepatic portal embolization, our patient suddenly complained of abdominal pain. Contrast-enhanced computed tomography confirmed a pseudoaneurysm arising from a segmental branch of his right hepatic artery. Since embolization of the hepatic arterial branches may cause hepatic infarction, ultrasound-guided thrombin injection therapy was successfully performed for the pseudoaneurysm.</p> <p>Conclusion</p> <p>We performed a thrombin injection instead of arterial embolization to avoid hepatic infarction. The rationale of this choice may be insufficient. However, ultrasound-guided percutaneous thrombin injection therapy may be considered as an alternative to percutaneous transarterial embolization or surgical intervention for an iatrogenic hepatic artery pseudoaneurysm.</p

Percutaneous Endoscopic Gastrostomy, Duodenostomy and Jejunostomy

Although enteral feeding by nasal gastric tube is popular for the patients who have a swallowing disability and require long-term nutritional support, but have intact gut, this tube sometimes causes aspiration pneumonia or esophageal ulcer. For these patients, conventional techniques for performance of a feeding gastrostomy made by surgical laparotomy have been used so far. However, these patients are frequently poor anesthetic and operative risks. Percutaneous endoscopic gastrostomy (PEG) which can be accomplished with local anesthesia and without the necessity for laparotomy has become popular in the clinical treatment for these patients. PEG was performed in 31 cases, percutaneous endoscopic duodenostomy (PED) in 1 case, and percutaneous endoscopic jejunostomy (PEJ) in 2 cases. All patients were successfully placed, and no major complication and few minor complications (9%) were experienced in this procedure. After this procedure, some patients could discharge their sputa easily and their pneumonia subsided. PED and PEJ for the patients who had previously received gastrostomy could also be done successfully with great care. Our experience suggests that PEG, PED, and PEJ are rapid, safe, and useful procedures for the patients who have poor anesthetic or poor operative risks

Computed tomography(CT)で診断された化膿性脊椎炎の検討

京都府立医科大学附属北部医療センター放射線科京都府立医科大学附属北部医療センター整形外科市立福知山市民病院　放射線科Department of Radiology, North Medical Center Kyoto Prefectural University of MedicineDepartment of Orthopaedic Surgery, North Medical Center Kyoto Prefectural University of MedicineDepartment of Radiology, Fukuchiyama City Hospital胸腹部CT検査で化膿性脊椎炎と診断された症例を対象に、臨床情報とCT所見について検討した。CT検査時の依頼目的は感染症を示唆しない場合もあった。化膿性脊椎炎の診断根拠となったCT所見は椎体周囲に脂肪濃度混濁・軟部陰影や低吸収域であり、骨破壊も見られた。化膿性脊椎炎をCTで診断するには、椎体周囲の脂肪濃度混濁とわずかな骨破壊を検出することが重要である