Testing the biological activity of selected standards for enzymes from the cholinesterase group

Cholinesterasy (ChEs) jsou skupinou enzymů, které katalyzují hydrolýzu acetylcholinu na cholin a kyselinu octovou. Jedná se o základní proces umožňující obnovu cholinergního receptoru. Mezi skupinu esteras se řadí acetylcholinesterasa (AChE) a butyrylcholinesterasa (BChE). Oba enzymy mají z 65 % stejnou sekvenční homologii aminokyselin a jsou kódovány různými geny na lidských chromozomech. Tyto dva enzymy se navzájem liší substrátovou specifitou a místem exprese. Inhibitory cholinesteras (galantamin, donepezil a rivastigmin), které zvyšují cholinergní neurotransmisy, jsou využívány pro snížení příznaků Alzheimerovy choroby inhibitory Brutonovy tyrosinkinasy (BTK) (tirabrutinib, evobrutinib a branebrutinib) snižují aktivaci fosfolipasy γ 2, která byla identifikována jako genetický rizikový faktor Alzheimerovy choroby.Cholinesterases (ChEs) are a group of enzymes that catalyze the hydrolysis of acetylcholine to choline and acetic acid. This is a basic process enabling the recovery of the cholinergic receptor. The group of esters includes acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BChE). Both enzymes share 65% amino acid sequence homology and are encoded by different genes on human chromosomes. These two enzymes differ from each other in substrate specificity and site of expression. Cholinesterase inhibitors (galantamine, donepezil and rivastigmine), which increase cholinergic neurotransmissions, are used to reduce the symptoms of Alzheimer's disease Bruton tyrosine kinase (BTK) inhibitors (tirabrutinib, evobrutinib and branebrutinib) reduce the activation of phospholipase γ 2, which has been identified as a genetic risk factor for Alzheimer's disease

Hydrazony 4-(trifluormethyl)benzohydrazidu jako nové inhibitory acetyl- a butyrylcholinesterázy

Based on the broad spectrum of biological activity of hydrazide-hydrazones, trifluoromethyl compounds, and clinical usage of cholinesterase inhibitors, we investigated hydrazones obtained from 4-(trifluoromethyl)benzohydrazide and various benzaldehydes or aliphatic ketones as potential inhibitors of acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BuChE). They were evaluated using Ellman's spectrophotometric method. The hydrazide-hydrazones produced a dual inhibition of both cholinesterase enzymes with IC50 values of 46.8-137.7 mu M and 19.1-881.1 mu M for AChE and BuChE, respectively. The majority of the compounds were stronger inhibitors of AChE; four of them (2-bromobenzaldehyde, 3-(trifluoromethyl)benzaldehyde, cyclohexanone, and camphor-based 2o, 2p, 3c, and 3d, respectively) produced a balanced inhibition of the enzymes and only 2-chloro/trifluoromethyl benzylidene derivatives 2d and 2q were found to be more potent inhibitors of BuChE. 4-(Trifluoromethyl)-N'-[4-(trifluoromethyl)benzylidene]benzohydrazide 2l produced the strongest inhibition of AChE via mixed-type inhibition determined experimentally. Structure-activity relationships were identified. The compounds fit physicochemical space for targeting central nervous systems with no apparent cytotoxicity for eukaryotic cell line together. The study provides new insights into this CF3-hydrazide-hydrazone scaffold.Na základě širokého spektra biologické aktivity hydrazidhydrazonů, trifluormethylových sloučenin a klinického použití inhibitorů cholinesterázy jsme zkoumali hydrazony získané z 4-(trifluormethyl)benzohydrazidu a různých benzaldehydů nebo alifatických ketonů jako potenciální inhibitory acetylcholinesterázy (AChE) a butyrylcholinesterázy. (BuChE). Byly hodnoceny pomocí Ellmanovy spektrofotometrické metody. Hydrazid-hydrazony produkovaly duální inhibici obou cholinesterázových enzymů s hodnotami IC50 46,8-137,7 uM a 19,1-881,1 uM pro AChE a BuChE, v daném pořadí. Většina sloučenin byla silnějšími inhibitory AChE; čtyři z nich (2-brombenzaldehyd, 3-(trifluormethyl)benzaldehyd, cyklohexanon a 2o, 2p, 3c a 3d na bázi kafru, v tomto pořadí) produkovaly vyváženou inhibici enzymů a pouze deriváty 2-chlor/trifluormethylbenzylidenu 2d a Bylo zjištěno, že 2q jsou silnějšími inhibitory BuChE. 4-(Trifluormethyl)-N'-[4-(trifluormethyl)benzyliden]benzohydrazid 21 produkoval nejsilnější inhibici AChE prostřednictvím inhibice smíšeného typu stanovené experimentálně. Byly identifikovány vztahy mezi strukturou a aktivitou. Sloučeniny zapadají do fyzikálně-chemického prostoru pro cílení na centrální nervový systém bez zjevné cytotoxicity pro eukaryotické buněčné linie dohromady. Studie poskytuje nové poznatky o tomto CF3-hydrazid-hydrazonovém lešení

Nové jodované hydrazid-hydrazony a jejich analogy jako inhibitory acetyl- a butyrylcholinesterázy

Background: Hydrazide-hydrazones have been known as scaffold with various biological activities including inhibition of acetyl- (AChE) and butyrylcholinesterase (BuChE). Cholinesterase inhibitors are mainstays of dementias' treatment. Objective: Twenty-five iodinated hydrazide-hydrazones and their analogues were designed as potential central AChE and BuChE inhibitors. Methods: Hydrazide-hydrazones were synthesized from 4-substituted benzohydrazides and 2-/4-hydroxy-3,5-diiodobenzaldehydes. The compounds were investigated in vitro for their potency to inhibit AChE from electric eel and BuChE from equine serum using Ellman's method. We calculated also physicochemical and structural parameters for CNS delivery. Results: The derivatives exhibited a moderate dual inhibition with IC50 values ranging from 15.1-140.5 and 35.5 to 170.5 mu mol.L-1 for AChE and BuChE, respectively. Generally, the compounds produced a balanced or more potent inhibition of AChE. N '-[(E)-(4-Hydroxy-3,5-diiodophenyl)methylidene]-4-nitrobenzohydrazide 2k and 4-fluoro-N '-(2-hydroxy-3,5-diiodobenzyl)benzohydrazide 3a were the most potent inhibitors of AChE and BuChE, respectively. Structure-activity relationships were established, and molecular docking studies confirmed interaction with enzymes. Conclusion: Many novel hydrazide-hydrazones showed lower IC50 values than rivastigmine against AChE and some of them were comparable for BuChE to this drug used for the treatment of dementia. They interact with cholinesterases via non-covalent binding into the active site. Based on the BOILED-Egg approach, the majority of the derivatives met the criteria for blood-brain-barrier permeability.Pozadí: Hydrazid-hydrazony byly známy jako lešení s různými biologickými aktivitami, včetně inhibice acetyl- (AChE) a butyrylcholinesterázy (BuChE). Inhibitory cholinesterázy jsou základními kameny léčby demencí. Cíl: Dvacet pět jodovaných hydrazid-hydrazonů a jejich analogů bylo navrženo jako potenciální centrální inhibitory AChE a BuChE. Metody: Hydrazid-hydrazony byly syntetizovány ze 4-substituovaných benzohydrazidů a 2- / 4-hydroxy-3,5-dijodbenzaldehydů. Sloučeniny byly zkoumány in vitro na jejich schopnost inhibovat AChE z elektrického úhoře a BuChE z koňského séra pomocí Ellmanovy metody. Vypočítali jsme také fyzikálně-chemické a strukturní parametry pro dodávku CNS. Výsledky: Deriváty vykazovaly mírnou duální inhibici s hodnotami IC50 v rozmezí od 15,1 do 140,5 a 35,5 až 170,5 umol.L-1 pro AChE a BuChE. Obecně sloučeniny způsobovaly vyváženou nebo účinnější inhibici AChE. N '- [(E) - (4-hydroxy-3,5-dijodfenyl) methyliden] -4-nitrobenzohydrazid 2k a 4-fluor-N' - (2-hydroxy-3,5-dijodbenzyl) benzohydrazid 3a byly nejvíce silné inhibitory AChE a BuChE. Byly stanoveny vztahy mezi strukturou a aktivitou a studie molekulárního dokování potvrdily interakci s enzymy. Závěr: Mnoho nových hydrazid-hydrazonů vykázalo nižší hodnoty IC50 než rivastigmin proti AChE a některé z nich byly srovnatelné pro BuChE s tímto lékem používaným k léčbě demence. Interakují s cholinesterázami prostřednictvím nekovalentní vazby na aktivní místo. Na základě přístupu BOILED-Egg splňovala většina derivátů kritéria pro propustnost hematoencefalické bariéry

N- [3,5-Bis (trifluormethyl) fenyl] -5-brom-2-hydroxybenzamid Analogy: Nové inhibitory acetyl- a butyrylcholinesterázy

Background: Development of acetyl- (AChE) and butyrylcholinesterase (BuChE) inhibitors belongs to viable strategies for the treatment of dementia and other diseases related to decrease in cholinergic neurotransmission. Objective: That is why we designed twenty-two analogues of a dual AChE-BuChE salicylanilide inhibitor, N[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]-5-bromo-2-hydroxybenzamide 1, to improve its potency. Methods: We prepared N,N-disubstituted (thio)carbamates via direct acylation with (thio)carbamoyl chloride, N-n-alkyl monosubstituted carbamates using isocyanates as well as its salicylanilide core analogues. The derivatives were evaluated in vitro against AChE from electric eel and BuChE from equine serum using spectrophotometric Ellman's method. Results: The compounds showed moderate inhibition of both AChE and BuChE with IC50 from 18.2 to 196.6 mu mol.L-1 and 9.2 to 196.2 mu mol.L-1, respectively. Importantly, based on the substitution pattern, it is possible to modulate selectivity against AChE or BuChE and some derivatives also produced a balanced inhibition. In general, the most promising analogues were N-alkyl (C-2-C-6) carbamates and isomers with a changed position of phenolic hydroxyl. N-[3,5-Bis(trrfluoromethyl)phenyl]-3-bromo-5-hydroxybenzamide 4a was the best inhibitor of both cholinesterases. Conclusion: A wide range of the derivatives improved the activity of the bit 1, they were superior to carbamate drug rivastigmine against AChE and some of them also against BuChE. The most promising derivatives also fit physicochemical space and structural features for CNS drugs together with an escalated lipophilicity.Pozadí: Vývoj inhibitorů acetyl- (AChE) a butyrylcholinesterázy (BuChE) patří k životaschopným strategiím pro léčbu demence a dalších onemocnění souvisejících se snížením cholinergní neurotransmise. Cíl: Proto jsme navrhli dvaadvacet analogů duálního inhibitoru salicylanilidu AChE-BuChE, N [3,5-bis (trifluormethyl) fenyl] -5-brom-2-hydroxybenzamidu 1, abychom zlepšili jeho účinnost. Metody: Připravili jsme N, N-disubstituované (thio) karbamáty přímou acylací s (thio) karbamoylchloridem, N-n-alkyl monosubstituované karbamáty s použitím isokyanátů i analogů salicylanilidového jádra. Deriváty byly hodnoceny in vitro proti AChE z elektrického úhoře a BuChE z koňského séra pomocí spektrofotometrické Ellmanovy metody. Výsledky: Sloučeniny vykazovaly mírnou inhibici jak AChE, tak BuChE s IC50 od 18,2 do 196,6 umol.L-1, respektive 9,2 až 196,2 umol.L-1. Důležité je, že na základě substitučního vzorce je možné modulovat selektivitu proti AChE nebo BuChE a některé deriváty také produkovaly vyváženou inhibici. Obecně nejslibnějšími analogy byly N-alkyl (C-2-C-6) karbamáty a izomery se změněnou polohou fenolického hydroxylu. N- [3,5-Bis (trfluormethyl) fenyl] -3-brom-5-hydroxybenzamid 4a byl nejlepším inhibitorem obou cholinesteráz. Závěr: Široká škála derivátů zlepšila aktivitu bitu 1, byly lepší než karbamátové léčivo rivastigmin proti AChE a některé z nich také proti BuChE. Nejslibnější deriváty také zapadají do fyzikálně-chemického prostoru a strukturálních vlastností pro léky na CNS spolu s eskalovanou lipofilitou

5-Aryl-1,3,4-oxadiazol-2-aminy zdobené dlouhým alkylem a jejich analogy: Syntéza, inhibice acetyl- a butyrylcholinesterázy a studie dokování

2,5-Disubstituted 1,3,4-oxadiazoles are privileged versatile scaffolds in medicinal chemistry that have exhibited diverse biological activities. Acetyl- (AChE) and butyrylcholinesterase (BChE) inhibitors are used, e.g., to treat dementias and myasthenia gravis. 5-Aryl-1,3,4-oxadiazoles decorated with dodecyl linked via nitrogen, sulfur or directly to this heterocycle have been designed as potential inhibitors of AChE and BChE. They were prepared from commercially available or in-house prepared hydrazides by reaction with dodecyl isocyanate to form hydrazine-1-carboxamides 2 (yields 67-98%) followed by cyclization using p-toluenesulfonyl chloride and triethylamine in 41-100% yields. Thiadiazole isostere was also synthesized. The derivatives were screened for inhibition of AChE and BChE using Ellman's spectrophotometric method. The compounds showed a moderate dual inhibition with IC50 values of 12.8-99.2 for AChE and from 53.1 mu M for BChE. All the heterocycles were more efficient inhibitors of AChE. The most potent inhibitor, N-dodecyl-5-(pyridin-4-yl)-1,3,4-thiadiazol-2-amine 3t, was subjected to advanced reversibility and type of inhibition evaluation. Structure-activity relationships were identified. Many oxadiazoles showed lower IC50 values against AChE than established drug rivastigmine. According to molecular docking, the compounds interact non-covalently with AChE and BChE and block entry into enzyme gorge and catalytic site, respectively.2,5-Disubstituované 1,3,4-oxadiazoly jsou využívané v lékařské chemii, protože vykazují různé biologické aktivity. Inhibitory acetyl- (AChE) a butyrylcholinesterázy (BChE) se používají např. k léčbě demence a myasthenia gravis. 5-Aryl-1,3,4-oxadiazoly zdobené dodecylem vázaným přes dusík, síru nebo přímo na tento heterocyklus byly navrženy jako potenciální inhibitory AChE a BChE. Byly připraveny z komerčně dostupných nebo interně připravených hydrazidů reakcí s dodecylisokyanátem za vzniku hydrazin-1-karboxamidů 2 (výtěžky 67-98 %) s následnou cyklizací za použití p-toluensulfonylchloridu a triethylaminu ve 41-100% výtěžcích. Byl také syntetizován thiadiazolový izoster. Deriváty byly testovány na inhibici AChE a BChE pomocí Ellmanovy spektrofotometrické metody. Sloučeniny vykazovaly mírnou duální inhibici s hodnotami IC50 12,8-99,2 pro AChE a od 53,1 uM pro BChE. Všechny heterocykly byly účinnějšími inhibitory AChE. Nejúčinnější inhibitor, N-dodecyl-5-(pyridin-4-yl)-1,3,4-thiadiazol-2-amin 3t, byl podroben pokročilému hodnocení reverzibility a typu inhibice. Byly identifikovány vztahy mezi strukturou a aktivitou. Mnoho oxadiazolů vykazovalo nižší hodnoty IC50 proti AChE než zavedený lék rivastigmin. Podle molekulárního dokování sloučeniny interagují nekovalentně s AChE a BChE a blokují vstup do aktivního místa

2-Hydroxy-N-fenylbenzamidy a jejich estery inhibují acetylcholinesterázu a butyrylcholinesterázu

The development of novel inhibitors of acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BuChE) represents a viable approach to alleviate Alzheimer's disease. Thirty-six halogenated 2-hydroxy-N-phenylbenzamides (salicylanilides) with various substitution patterns and their esters with phosphorus-based acids were synthesized in yields of 72% to 92% and characterized. They were evaluated for in vitro inhibition of AChE from electric eel and BuChE from equine serum using modified Ellman's spectrophotometric method. The benzamides exhibited a moderate inhibition of AChE with IC50 values in a narrow concentration range from 33.1 to 85.8 mu M. IC50 values for BuChE were higher (53.5-228.4 mu M). The majority of derivatives inhibit AChE more efficiently than BuChE and are comparable or superior to rivastigmine-an established cholinesterases inhibitor used in the treatment of Alzheimer's disease. Phosphorus-based esters especially improved the activity against BuChE with 5-chloro-2-{[4-(trifluoromethyl)phenyl]carbamoyl}phenyl diethyl phosphite 5c superiority (IC50 = 2.4 mu M). This derivative was also the most selective inhibitor of BuChE. It caused a mixed inhibition of both cholinesterases and acted as a pseudo-irreversible inhibitor. Several structure-activity relationships were identified, e.g., favouring esters and benzamides obtained from 5-halogenosalicylic acids and polyhalogenated anilines. Both 2-hydroxy-N-phenylbenzamides and esters share convenient physicochemical properties for blood-brain-barrier penetration and thus central nervous system delivery.ých inhibitorů acetylcholinesterázy (AChE) a butyrylcholinesterázy (BuChE) představuje životaschopný přístup ke zmírnění Alzheimerovy choroby. Třicet šest halogenovaných 2-hydroxy-N-fenylbenzamidů (salicylanilidů) s různými substitučními vzory a jejich estery s kyselinami na bázi fosforu bylo syntetizováno ve výtěžcích 72% až 92% a charakterizováno. Byly hodnoceny in vitro inhibice AChE z elektrického úhoře a BuChE z koňského séra pomocí modifikované Ellmanovy spektrofotometrické metody. Benzamidy vykazovaly mírnou inhibici AChE s hodnotami IC50 v úzkém koncentračním rozmezí od 33,1 do 85,8 mu M. Hodnoty IC50 pro BuChE byly vyšší (53,5 až 228,4 uM). Většina derivátů inhibuje AChE účinněji než BuChE a je srovnatelná nebo lepší než rivastigmin-zavedený inhibitor cholinesteráz používaný při léčbě Alzheimerovy choroby. Estery na bázi fosforu zvláště zlepšily aktivitu proti BuChE s 5-chlor-2 - {[4- (trifluormethyl) fenyl] karbamoyl} fenyl diethylfosfitem 5c (IC50 = 2,4 um M). Tento derivát byl také nejelektivnějším inhibitorem BuChE. Způsobil smíšenou inhibici obou cholinesteráz a působil jako pseudo-ireverzibilní inhibitor. Bylo identifikováno několik vztahů mezi strukturou a aktivitou, např. Zvýhodněné estery a benzamidy získané z 5-halogenenosalicylových kyselin a polyhalogenovaných anilinů. Jak 2-hydroxy-N-fenylbenzamidy, tak estery sdílejí vhodné fyzikálně-chemické vlastnosti pro pronikání hematoencefalickou bariérou, a tím dodávku centrálního nervového systému

Novel Inhibitors of Acetyl- and Butyrylcholinesterase Derived from Benzohydrazides: Synthesis, Evaluation and Docking Study

On the basis of previous reports, novel 2-benzoylhydrazine-1-carboxamides were designed as potential inhibitors of acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BChE). Inhibitors of these enzymes have many clinical applications. 2-(Substituted benzoyl)hydrazine-1-carboxamides decorated with N-methyl or tridecyl were prepared with three methods from commercially available or self-prepared hydrazides and isocyanates. For methyl derivatives, N-succinimidyl N-methylcarbamate was used or methyl isocyanate was prepared via Curtius rearrangement. Tridecyl isocyanate was synthesized again via Curtius rearrangement or from triphosgene and tridecylamine. The compounds were evaluated for the inhibition of AChE and BChE using Ellman’s spectrophotometric method. Most of the derivatives showed the dual inhibition of both enzymes with IC50 values of 44–100 µM for AChE and from 22 µM for BChE. In general, the carboxamides inhibited AChE more strongly. A large number of the compounds showed better or quite comparable inhibition of cholinesterases in vitro than that of the drug rivastigmine. Molecular docking was performed to investigate the possible conformation of the compounds and their interactions with target enzymes. In both AChE and BChE, the compounds occupied the enzyme active cavity, and, especially in the case of BChE, the compounds were placed in close proximity to the catalytic triad

Trimethoxycinnamáty a jejich cholinesterázová inhibitorní aktivita

A series of twelve nature-inspired 3,4,5-trimethoxycinnamates were prepared and characterized. All compounds, including the starting 3,4,5-trimethoxycinnamic acid, were tested for their ability to inhibit acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BChE) in vitro; the selectivity index (SI) was also determined. 2-Fluororophenyl (2E)-3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-prop-2-enoate demonstrated the highest SI (1.71) in favor of BChE inhibition. 2-Chlorophenyl (2E)-3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)prop-2-enoate showed the highest AChE-inhibiting (IC50 = 46.18 mu M) as well as BChE-inhibiting (IC50 = 32.46 mu M) activity with an SI of 1.42. The mechanism of action of the most potent compound was determined by the Lineweaver-Burk plot as a mixed type of inhibition. An in vitro cell viability assay confirmed the insignificant cytotoxicity of the discussed compounds on the two cell lines. Trends between structure, physicochemical properties and activity were discussed.Byla připravena a charakterizována série dvanácti přírodou inspirovaných 3,4,5-trimethoxycinnamátů. Všechny sloučeniny, včetně výchozí 3,4,5-trimethoxyskořicové kyseliny, byly testovány na jejich schopnost inhibovat acetylcholinesterázu (AChE) a butyrylcholinesterázu (BChE) in vitro; byl také stanoven index selektivity (SI). 2-Fluorofenyl (2E)-3-(3,4,5-trimethoxyfenyl)-prop-2-enoát vykazoval nejvyšší SI (1,71) ve prospěch inhibice BChE. 2-Chlorfenyl (2E)-3-(3,4,5-trimethoxyfenyl)prop-2-enoát vykazoval nejvyšší aktivitu AChE-inhibice (IC50 = 46,18 uM) i BChE-inhibice (IC50 = 32,46 uM) s SI = 1,42. Mechanismus účinku nejúčinnější sloučeniny byl stanoven pomocí Lineweaver-Burk grafu jako smíšeného typu inhibice. Test životaschopnosti buněk in vitro potvrdil nevýznamnou cytotoxicitu diskutovaných sloučenin na dvou buněčných liniích. Byly diskutovány trendy mezi strukturou, fyzikálně-chemickými vlastnostmi a aktivitou

Nové analogy aminoguanidinhydrazonu: od potenciálních antimikrobiálních látek k účinným inhibitorům cholinesterázy

Aseries of thirty-one hydrazones of aminoguanidine, nitroaminoguanidine, 1,3-diaminoguanidine, and (thio)semicarbazide were prepared from various aldehydes, mainly chlorobenzaldehydes, halogenated salicylaldehydes, 5-nitrofurfural, and isatin (yields of 50–99%). They were characterized by spectral methods. Primarily, they were designed and evaluated as potential broad-spectrum antimicrobial agents. The compounds were effective against Gram-positive bacteria including methicillin-resistant Staphylococcus aureus with minimum inhibitory concentrations (MIC) from 7.8 M, as well as Gram-negative strains with higher MIC. Antifungal evaluation against yeasts and Trichophyton mentagrophytes found MIC from 62.5 M. We also evaluated inhibition of acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BuChE). The compounds inhibited both enzymes with IC50 values of 17.95–54.93 M for AChE and 1.69 M for BuChE. Based on the substitution, it is possible to modify selectivity for a particular cholinesterase as we obtained selective inhibitors of either AChE or BuChE, as well as balanced inhibitors. The compounds act via mixed-type inhibition. Their interactions with enzymes were studied by molecular docking. Cytotoxicity was assessed in HepG2 cells. The hydrazones differ in their toxicity (IC50 from 5.27 to >500 M). Some of the derivatives represent promising hits for further development. Based on the substitution pattern, it is possible to modulate bioactivity to the desired one.Řada třiceti jedna hydrazonů aminoguanidinu, nitroaminoguanidinu, 1,3-diaminoguanidinu, a (thio)semikarbazid byly připraveny z různých aldehydů, zejména chlorbenzaldehydů, halogenovaných salicylaldehydy, 5-nitrofurfural a isatin (výtěžky 50–99 %). Byli charakterizováni spektrálními metodami. Primárně byly navrženy a vyhodnoceny jako potenciálně širokospektrální antimikrobiální látky. Sloučeniny byly účinné proti grampozitivním bakteriím včetně methicilin-rezistentní Staphylococcus aureus s minimálními inhibičními koncentracemi (MIC) od 7,8 M, stejně jako gramnegativní kmeny s vyšší MIC. Antifungální hodnocení proti kvasinkám a Trichophyton mentagrophytes zjistili MIC od 62,5 M. Hodnotili jsme také inhibici acetylcholinesterázy (AChE) a butyrylcholinesteráza (BuChE). Sloučeniny inhibovaly oba enzymy s hodnotami IC50 17,95–54,93 M pro AChE a 1,69 M pro BuChE. Na základě substituce to Je možné modifikovat selektivitu pro konkrétní cholinesterázu, jak jsme získali selektivní inhibitory buď AChE nebo BuChE, stejně jako vyvážené inhibitory. Sloučeniny působí prostřednictvím inhibice smíšeného typu. Jejich interakce s enzymy byly studovány molekulárním dokováním. Byla hodnocena cytotoxicita v buňkách HepG2. Hydrazony se liší svou toxicitou (IC50 od 5,27 do >500 M). Některé z deriváty představují slibné hity pro další rozvoj. Na základě substitučního vzoru ano možné modulovat bioaktivitu na požadovano