Ethical and Clinical Aspects of Intensive Care Unit Admission in Patients with Hematological Malignancies: Guidelines of the Ethics Commission of the French Society of Hematology

Admission of patients with hematological malignancies to intensive care unit (ICU) raises recurrent ethical issues for both hematological and intensivist teams. The decision of transfer to ICU has major consequences for end of life care for patients and their relatives. It also impacts organizational human and economic aspects for the ICU and global health policy. In light of the recent advances in hematology and critical care medicine, a wide multidisciplinary debate has been conducted resulting in guidelines approved by consensus by both disciplines. The main aspects developed were (i) clarification of the clinical situations that could lead to a transfer to ICU taking into account the severity criteria of both hematological malignancy and clinical distress, (ii) understanding the process of decision-making in a context of regular interdisciplinary concertation involving the patient and his relatives, (iii) organization of a collegial concertation at the time of the initial decision of transfer to ICU and throughout and beyond the stay in ICU. The aim of this work is to propose suggestions to strengthen the collaboration between the different teams involved, to facilitate the daily decision-making process, and to allow improvement of clinical practice

Staphylococcus aureus infective endocarditis versus bacteremia strains: Subtle genetic differences at stake

AbstractInfective endocarditis (IE)(1) is a severe condition complicating 10–25% of Staphylococcus aureus bacteremia. Although host-related IE risk factors have been identified, the involvement of bacterial features in IE complication is still unclear. We characterized strictly defined IE and bacteremia isolates and searched for discriminant features. S. aureus isolates causing community-acquired, definite native-valve IE (n=72) and bacteremia (n=54) were collected prospectively as part of a French multicenter cohort. Phenotypic traits previously reported or hypothesized to be involved in staphylococcal IE pathogenesis were tested. In parallel, the genotypic profiles of all isolates, obtained by microarray, were analyzed by discriminant analysis of principal components (DAPC)(2). No significant difference was observed between IE and bacteremia strains, regarding either phenotypic or genotypic univariate analyses. However, the multivariate statistical tool DAPC, applied on microarray data, segregated IE and bacteremia isolates: IE isolates were correctly reassigned as such in 80.6% of the cases (C-statistic 0.83, P<0.001). The performance of this model was confirmed with an independent French collection IE and bacteremia isolates (78.8% reassignment, C-statistic 0.65, P<0.01). Finally, a simple linear discriminant function based on a subset of 8 genetic markers retained valuable performance both in study collection (86.1%, P<0.001) and in the independent validation collection (81.8%, P<0.01). We here show that community-acquired IE and bacteremia S. aureus isolates are genetically distinct based on subtle combinations of genetic markers. This finding provides the proof of concept that bacterial characteristics may contribute to the occurrence of IE in patients with S. aureus bacteremia

Lesmolécules HLA de classe II dans les lymphomes B non-hodgkiniens

Les lymphomes non-hodgkiniens de type B (LNH B)correspondent à des lymphocytes B malins qui apparaissent arrêtés à un stade donné de leur maturation et sont localisés dans les organes lymphoïdes secondaires. Ils font partie des rares tumeurs exprimant les molécules HLA de classe II. Nous avons cherché à caractériser les molécules HLA de classe II dans les LNH B, par rapport à des lymphocytes B normaux de rate, afin d'identifier d'éventuelles anomalies. Pour cela, nous avons étudié les différentes populations de molécules HLA de classe II à la surface par cytométrie en flux. Nous avons également recherché les molécules HLA-DR, DM et DO en western blot. Enfin, nous avons déterminé la localisation des molécules HLA-DR dans les différents compartiments intracellulaires par microscopie confocale. Nos résultats nous ont permis de différencier deux grands groupes de LNH B. Le premier regroupant les LNH B folliculaire et lymphocytique, qui ne présentent pas de différences majeures avec les lymphocutes B normaux. Le second groupe est composé des LNH B du manteau folliculaire et des LNH B à grandes cellules. Ces LNH B présentent de fortes différences par rapport aux lymphocytes B normaux. Ils présentent l'expression extrêment diminuée voir absente des molécules HLA-DR/CLIP en surface, une modification de la localisation dans les compartiements cellulaires des molécules HLA-DR, et une forte diminution de l'expression des molécules HLA-DO. Ces différences nous permettent d'envisager, pour le second groupe de LNH B, une modification importante de la voie de présentation des antigènes, avec des répercussions possibles au niveau de la réponse anti-tumorale T CD4 dépendante.GRENOBLE1-BU Sciences (384212103) / SudocSudocFranceF

NOUVELLE APPROCHE EXPERIMENTALE DU TRAITEMENT DE L'APLASIE MEDULLAIRE RADIO-INDUITE PAR EXPANSION EX VIVO DES PROGENITEURS HEMATOPOIETIQUES CD34 + (BENEFICE POTENTIEL DE LA MODULATION DE L'APOPTOSE RADIO-INDUITE)

LA SYMPTOMATOLOGIE DU SYNDROME AIGU DE L'IRRADIATION EST DOMINEE DANS LA GAMME DE DOSE DE 2 A 10 GY PAR LE SYNDROME HEMATOLOGIQUE. LA THERAPIE CELLULAIRE AUTOLOGUE EST UNE NOUVELLE APPROCHE THERAPEUTIQUE DE L'APLASIE MEDULLAIRE CONSECUTIVE A UNE IRRADIATION AIGUE ACCIDENTELLE FONDEE SUR LE CONCEPT DE L'HETEROGENEITE DES DOMMAGES AUTORISANT L'EPARGNE RELATIVE DES CELLULES SOUCHES ET PROGENITEURS HEMATOPOIETIQUES (CSPH). ELLE CONSISTE EN LA COLLECTE ET L'EXPANSION EX VIVO DES CSPH RESIDUELS PAR UNE CULTURE DE COURTE DUREE, DANS LE BUT DE PRODUIRE UN OU DES GREFFONS DE MATURITES DIFFERENTES CAPABLES DE REDUIRE APRES REINJECTION LA PHASE INITIALE DE NEUTROTHROMBOPENIE, DANS L'ATTENTE DE LA RESTAURATION SPONTANEE. CETTE APPROCHE POSE LE PROBLEME DE L'INTERFERENCE DE LA PHASE DE CULTURE AVEC LES PROCESSUS DELETERES RADIOINDUITS AU PREMIER RANG DESQUELS L'APOPTOSE. NOTRE ETUDE, UTILISANT EN PREMIER LIEU UN MODELE D'IRRADIATION IN VITRO DES CELLULES CD34 + DE PRIMATE NON HUMAIN, MONTRE QUE : 1/ L'APOPTOSE RADIOINDUITE AU NIVEAU DES CELLULES CD34 + EST UN PROCESSUS PRECOCE, MASSIF PENDANT LES 24 PREMIERES HEURES, IMPLIQUANT LE SYSTEME FAS/FAS-LIGAND. 2/ ELLE EST SIGNIFICATIVEMENT REDUITE (15% DE SURVIE A 24H) PAR UN TRAITEMENT PRECOCE (<30MN APRES L'IRRADIATION ; DOSE 2,5 GY A 6GY) A L'AIDE D'UNE COMBINAISON DE CYTOKINES ACTIVES AUX STADES PRECOCES DE L'HEMATOPOIESE (4F : SCF+FL+TPO+IL-3). 3/ LA COMBINAISON 4F PERMET UNE AMPLIFICATION (K) DES CELLULES IRRADIEES CULTIVEES PENDANT 6 JOURS (2,5GY ; KCD34 + : X4,2). NOS MODELES DE GREFFE AUTOLOGUE DE CELLULES SAINES 4-6 OU IRRADIEES (2,5 GY) IN VITRO 7 MONTRENT QUE : 4/ LES GREFFONS AMPLIFIES FAVORISENT LA RESTAURATION HEMATOLOGIQUE PRECOCE GRANULOCYTAIRE ET PLAQUETTAIRE PAR RAPPORT AUX GREFFONS DE CELLULES NON MANIPULEES. 5/ L'AMPLIFICATION DES CELLULES CAPABLES DE RECONSTITUER LES SOURIS NOD-SCID (SRC) PAR LE 4F EST FAIBLE (X2,2) ; CES CELLULES CONSTITUENT LE MEILLEUR CRITERE D'EVALUATION DE LA TRANPLANTABILITE DU GREFFON. 6/ EVALUEE SUR LE CRITERE DE LA RECONSTITUTION HEMATOLOGIQUE TARDIVE, L'EXPANSION PERMET LA REDUCTION DE LA TAILLE SEUIL DES GREFFONS DE 0,5 10 6 A 0,3 10 6 CELLULES CD34 +/KG. 7/ CE SEUIL POURRAIT ETRE ABAISSE PAR DES CULTURES SUR STROMA ALLOGENIQUE PREETABLI. 8/ CEPENDANT LA CONSTITUTION D'UN GREFFON DE TAILLE SUFFISANTE A PARTIR DE CELLULES RESIDUELLES CHEZ DES ANIMAUX IRRADIES NECESSITE UN AGENT RECRUTANT DES CSPH D'ACTION RAPIDE. 9/ UNE CYTOKINOTHERAPIE ANTIAPOPTOTIQUE D'URGENCE APPLIQUEE A UNE LARGE GAMME DE DOSE POURRAIT ETRE REALISEE DANS LE CADRE DES IRRADIATIONS AIGUES ACCIDENTELLES ET CONSTITUER UN COMPLEMENT DE LA THERAPIE CELLULAIRE AUTOLOGUE.GRENOBLE1-BU Sciences (384212103) / SudocSudocFranceF

SIGNALISATION INDUITE PAR LES MOLECULES HLA DE CLASSE II DANS LES CELLULES B LYMPHOIDES NORMALES ET MALIGNES FOLLICULAIRES

LES LYMPHOMES B NON-HODGKINIENS FONT PARTIE DES RARES TUMEURS A EXPRIMER DES MOLECULES HLA DE CLASSE II. CECI LEUR PERMET D'INTERAGIR DIRECTEMENT AVEC LES LYMPHOCYTES T CD4+ QUI INFILTRENT LA TUMEUR (TIL-T). LA SIGNALISATION INDUITE PAR LES MOLECULES HLA-DR PEUT INDUIRE SOIT L'APOPTOSE, SOIT LA PROLIFERATION. LA PREMIERE PARTIE DE CE TRAVAIL A ETE D'ETUDIER LE ROLE JOUE PAR LES MOLECULES HLA DE CLASSE II DANS L'INTERACTION ENTRE LES TIL-T CD4+ ET LES LYMPHOCYTES B MALINS DE LYMPHOME FOLLICULAIRE. PAR L'INTERMEDIAIRE DES MOLECULES HLA DE CLASSE II, DES CLONES DE TIL-T CD4+ SONT CAPABLES D'INDUIRE L'ACTIVATION DES LYMPHOCYTES B MALINS ET LEUR ENTREE EN PHASE G1 DU CYCLE CELLULAIRE (INDUCTION DU KI-67). AFIN DE DETERMINER SI LES LYMPHOCYTES B MALINS PRESENTENT DES ANOMALIES INTRINSEQUES LES EMPECHANT DE PROGRESSER DANS LE CYCLE CELLULAIRE, NOUS AVONS ETUDIE DANS UNE DEUXIEME PARTIE L'EFFET D'UNE SIGNALISATION INDUITE PAR LES MOLECULES HLA-DR DANS DES LYMPHOCYTES B NORMAUX. NOUS AVONS D'ABORD MONTRE QUE L'ORIENTATION VERS UNE VOIE APOPTOTIQUE OU PROLIFERATIVE NE DEPEND PAS DE L'ETAT D'ACTIVATION DU LYMPHOCYTE B, MAIS DE LA CAPACITE DU LIGAND A REGROUPER LES MOLECULES HLA-DR A LA SURFACE DE LA CELLULE. EN EFFET, UN AC ANTI-HLA-DR COUPLE A DES BILLES DE SEPHAROSE (QUI MIME LA RELATION AVEC UN LYMPHOCYTE T CD4+) INDUIT LA PROLIFERATION DES LYMPHOCYTES B NORMAUX ALORS QU'UN AC ANTI-HLA-DR COUPLE A UN AC SECONDAIRE, INDUIT L'APOPTOSE, SANS ENTREE PREALABLE DANS LE CYCLE CELLULAIRE. CES RESULTATS MONTRENT QUE DANS LES LYMPHOCYTES B TUMORAUX, L'ENTREE EN CYCLE CORRESPOND BIEN A UN DEBUT DE PROLIFERATION ET NON A UN PRELUDE A L'APOPTOSE. NOUS AVONS REPLACE LA SIGNALISATION HLA-DR DANS UN CONTEXTE PHYSIOLOGIQUE : LES LYMPHOCYTES B RECOIVENT D'ABORD UN SIGNAL INDUIT PAR L'INTERACTION D'UN ANTIGENE SUR LE RECEPTEUR A L'AG DU LYMPHOCYTE B, CE QUI INDUIT UNE PROLIFERATION. ENSUITE, ILS INTERAGISSENT AVEC DES LYMPHOCYTES T CD4+, ENTRAINANT UNE SIGNALISATION PAR LES MOLECULES HLA-DR DANS LE LYMPHOCYTE B. LA PROLIFERATION INDUITE PAR LA STIMULATION DU RECEPTEUR A L'AG EST REGULEE NEGATIVEMENT PAR CO-STIMULATION AVEC UN AC ANTI-HLA-DR LIE A UN AC SECONDAIRE. CECI SE TRADUIT AU NIVEAU DU CYCLE CELLULAIRE, PAR UNE DIMINUTION DE LA PHOSPHORYLATION DE LA PROTEINE PRB DUE A UNE DIMINUTION D'EXPRESSION DES CDK2, 4 ET 6 ET DES CYCLINES E ET A, ET A UN RETARD D'EXPRESSION DE LA CYCLINE D2. LES CDKIS P21 ET P27 NE SONT PAS IMPLIQUES. NOS RESULTATS MONTRENT QU'UN SIGNAL INDUIT PAR HLA-DR EST SUFFISANT POUR INDUIRE UNE PROLIFERATION. L'ABSENCE DE PROLIFERATION DANS LES LYMPHOCYTES B TUMORAUX SUGGERENT FORTEMENT LA PRESENCE D'UNE (OU PLUSIEURS) ANOMALIE(S) INTRINSEQUE(S) EMPECHANT LA PROGRESSION DANS LE CYCLE CELLULAIRE. CE BLOCAGE SEMBLE ETRE GENERAL PUISQU'IL N'AFFECTE PAS QUE LA VOIE HLA DE CLASSE II MAIS EGALEMENT LA VOIE IL4/CD40.GRENOBLE1-BU Sciences (384212103) / SudocSudocFranceF

Génération et mécanismes d'action anti-tumorale d'effecteurs lymphocytaires T CD4+ dans les lymphomes B malins

L'importance des lymphocytes T CD4+ dans la réponse immune anti-tumorale est de plus en plus révélée depuis ces dix dernières années. Nous nous sommes attachés à l'étude de leur fonction dans les lymphomes malins non hodgkiniens de type B. Dans la première partie de ce travail de thèse, nous avons étudié un modèle à partir des cellules fraîches splénique d'un patient porteur d'un lymphome B splénique de la zone marginale. Nous avons pu déterminer un effet fonctionnel des lymphocytes T CD4+ réactifs par rapport aux cellules malignes B autologues. Ces cellules T CD4+ sont capables d'induire une différenciation des lymphocytes B tumoraux en plasmocytes, et cette induction a été dévoilée pour la première fois dans un système cellulaire autologue. Nous avons ensuite étudié la capacité fonctionnelle des lymphocytes T CD4+ réactifs sur une lignée de lymphome B folliculaire obtenue dans notre laboratoire. Nous avons obtenu un effet cytotoxique par les cellules T CD4+ totales autologues venant des lymphocytes du sang périphérique. Cependant, cette cytotoxicité s'est montrée à la fois sur les cellules B malignes et les cellules B normales Iymphoblastoïdes. Un clonage a été ensuite réalisé dans le but d'écarter les clones non spécifiques et de trouver des clones T cytotoxiques spécifiques des cellules malignes. Parmi les six clones obtenus, trois sont considérés spécifiques et ils possèdent un TCR identique Vb17-Db1-Jb1.2. Ces clones exercent une cytotoxicité contre les cellules tumorales en reconnaissant l'antigène tumoral présenté par la molécule HLA-II DP et leur mécanisme de lyse correspond à la voie perforinelgranzymes.GRENOBLE1-BU Sciences (384212103) / SudocSudocFranceF

ETUDE DES MECANISMES DE RESISTANCE A L'APOPTOSE INDUITE PAR LA VOIE CD95 DANS LES LYMPHOMES MALINS NON-HODGKINIENS

GRENOBLE1-BU Sciences (384212103) / SudocSudocFranceF

Autres infections bactériennes

No abstract availabl

Whole lymphoma B cells allow efficient cross-presentation of antigens by dendritic cells.

International audienceBACKGROUND: In order to compensate for the paucity of defined tumor antigens (Ag) in non-Hodgkin's lymphomas, a promising approach might be the use of whole tumor cells as a source of tumor Ag to pulse antigen-presenting cells (APC). However, it is not presently known how the tumor cells should be delivered to APC to optimize the cross-presentation of tumor Ag to anti-tumor CD8 T cells. We aimed to compare CD20-opsonized, apoptotic and necrotic human tumor cells for their capacity to induce endocytosis and cross-presentation of tumor-associated Ag by dendritic cells (DC) or macrophages. METHODS: Endocytosis of human tumor-derived material by macrophages or DC was monitored by flow cytometry. We used a previously described influenza model and studied cross-presentation of viral Ag as cellular surrogate tumor-associated Ag by APC after endocytosis of lymphoma B cells treated by inactivated influenza virus. RESULTS: Optimal endocytosis was obtained when tumor cells were opsonized by an anti-CD20 antibody and, as expected, macrophages were more phagocytic than DC. However, Ag from opsonized, apoptotic and live cells, but not from necrotic lymphoma cells, were efficiently cross-presented by DC but not by macrophages. DISCUSSION: We have developed a new model with human primary lymphoma cells to study the cross-presentation of tumor-associated Ag by APC. The results we have obtained support the use of whole lymphoma cells from patients to pulse DC to induce an anti-tumor immune response